描述
2×Hieff™ HotStart PCR 基因分型主混合物（含染料）是一种即用型 PCR 预混溶液，含有 Hieff™ HotStart Taq DNA 聚合酶、dNTP 和优化的缓冲系统。它只需添加引物和模板进行扩增，大大简化了实验程序，实现了高通量操作并提高了实验结果的可重复性。Hieff™ HotStart Taq DNA 聚合酶是一种配体修饰的耐热 Taq DNA 聚合酶，其活性随温度变化而调节。其酶活性在室温下被完全阻断，在 95°C 加热时释放。Hieff™ HotStart DNA 聚合酶的激活仅需 2-3 分钟，并与现有的 PCR 程序兼容。该产品可防止样品制备和温度循环阶段的非特异性扩增，使其适用于基因分型实验。
特征
- 方便、即用型混合物
- 热稳定性——95°C 时半衰期超过 40 分钟
- 生成带有 3'-dA 突出端的 PCR 产物
应用
- 小鼠基因分型
- 热启动 PCR
规格
| 保真度 (与 Taq 相比) | 1 × |
| 热启动 | 不 |
| 悬垂 | 3'-A |
| 聚合酶 | Taq DNA聚合酶 |
| 反应格式 | SuperMix 或 Master Mix |
| 反应速度 | 标准 |
| 产品类型 | PCR 预混液 (2×) |
成分
| 姓名 | 10108ES03 | 10108ES08 | 10108ES50 | 10108ES60 |
| 2× Hieff™ HotStart PCR 基因分型主混合物（含染料） | 1 毫升 | 5×1毫升 | 50×1毫升 | 100×1毫升 |
数字
引自” hnRNPA1 敲低通过调节 LAS1L 外显子 9 的可变剪接促进 NSCLC 转移和 EMT， 正面。肿瘤学。 ，2022 年 6 月 23 日。分子和细胞肿瘤学， 第 12 卷 - 2022 年“
运输和储存
用冰袋运输。储存于 -20°C，保质期为 2 年。
PCR反应体系（50 μL）
| 成分 | 卷 | 浓度。 |
| 氢键2哦 | 至 50 微升 | - |
| 脱氧核糖核酸 | / | - |
| 引物 F (10 μM) | 2 微升 | 0.4 μM |
| 引物 R (10 μM) | 2 微升 | 0.4 μM |
| 2×希夫™ HotStart PCR 基因分型主混合物（含染料） | 25 微升 | 1× |
| DNA类型 | 输入 |
| 基因组 DNA | 50 纳克至 100 纳克 |
| 质粒 | 100pg-20ng |
| 基因 | 1-5 μL |
PCR 循环
| 温度。 | 时间 | 周期 |
| 95摄氏度 | 5 分钟 | 1 |
| 95°C | 30 秒 | 三十五 |
| 50-60℃ | 30 秒 | |
| 72°C | 30 秒/kb | |
| 72摄氏度 | 10 分钟 | 1 |
[1] Han P、Cao P、Yue J 等。hnRNPA1 敲低通过调节 LAS1L 外显子 9 的可变剪接促进 NSCLC 转移和 EMT。Front Oncol。2022；12：837248。2022 年 6 月 23 日发布。doi：10.3389/fonc.2022.837248(影响因子：5.738)
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