描述
2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix(含染料)是即用型 2× 预混合溶液,含有 Hieff Canace™ AdvanceFast 高保真 DNA 聚合酶、dNTPs 和优化的缓冲系统,其中含有预添加的电泳指示剂。预混液中含有预添加的电泳指示剂,PCR 产物可直接电泳,扩增产物为平端。2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,反应体系中只需加入引物和模板即可。另外产品中还含有特异性保护剂,使得预混液在反复冻融后仍能保持稳定的活性。
超高保真: 易发生突变的错配率低 高GC基因;
速度快: 速度快如 5秒/kb;
适用性广泛: 可用于扩增GC含量为20-80%的基因,耐受20%的血液和小鼠裂解物;
稳定性好: 37°C保存7天不影响性能;
易于使用: 只需添加引物和模板进行扩增,用蓝色上样染料直接电泳。
规格
货号 | 10164ES01 | 10164ES03 | 10164ES08 |
尺寸 | 250 微升 | 1 毫升 | 5×1毫升 |
数字
图:Hieff Canace™ AdvanceFast 高保真 DNA 聚合酶与其他品牌产品相比保真度较高 (A)。该检测是通过检查从不同物种基因组中扩增的 6 个富含 GC(约 80%)片段的 PCR 产物的突变频率进行的。将 Hieff Canace™ AdvanceFast 高保真 DNA 聚合酶扩增的 PCR 产物克隆到载体中,然后为每个序列选择 100 个单克隆进行 Sanger 测序。
Hieff Canace™ AdvanceFast 高保真 DNA 聚合酶具有高扩增速度 (B)、高 GC 扩增兼容性 (C) 和血液耐受性 (D)。 客户的PCR和测序结果表明,Hieff Canace™ AdvanceFast 高保真DNA聚合酶在PCR产量和特异性(EH)方面具有良好的表现。
贮存
本产品储存于-25~-15℃,保存期限为1年。
指示
- 推荐的PCR反应体系。
成分 | 容量(μL) | 最终的 专注 |
2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR 主混合物(含染料)* | 二十五 | 1× |
模板** | 十 | - |
向前 引物(10 μmol/L)*** | 2 | 0.4微摩尔/升 |
撤销 引物(10 μmol/L) | 2 | 0.4微摩尔/升 |
氢键2哦 | 最多 50 | - |
表1 PCR反应体系
*1×预混合物含有 2 mM Mg2+ 和 200 μM dNTP。
**建议范围10-200 ng,cDNA样本上传体积范围不超过反应体系的1/10,建议1-2.5 μL。
***PCR反应体系中引物最终浓度范围为0.2-1 μM,建议0.4 μM。
- 反应程序。
循环 步 | 温度。 | 时间 | 周期 |
初始变性 | 98℃ | 30 秒 | 1 |
变性 | 98℃ | 10 秒 | 30-35 |
退火* | 60℃ | 5 秒 | |
扩大** | 72℃ | 5-10秒/kb | |
最终的 扩大 | 72℃ | 2 分钟 | 1 |
表 2 PCR反应程序
*建议温度:60°C,可设置温度梯度,找到引物退火的最佳温度。建议退火时间设置为5秒,可在5-30秒之间调整。退火时间过长可能导致凝胶上扩增产物分散。
**延伸时间:建议5秒/kb,也可根据需要延长至10秒/kb。
笔记
- 本产品仅供研究使用。
- 为了您的安全,请穿着工作服和戴一次性手套进行操作。
文件:
引文及参考文献:
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