描述
DNase I是一种内切酶，能消化单链和双链DNA，产生单脱氧核苷酸或单链或双链寡脱氧核苷酸。它能水解磷酸二酯键，产生含有5'-磷酸基团和3'-OH基团的单脱氧核苷酸和寡脱氧核苷酸。平均消化产物是最小的多聚四核苷酸。DNase I能催化多种形式的DNA，如单链DNA、双链DNA，甚至染色质（其切割速率受组蛋白影响）。最适pH范围为7-8。DNase I的活性依赖于Ca2+ 并可被二价金属离子激活，例如 Co2+,锰2+, 锌2+等 5 mM Ca2+ 可以保护酶不被水解。在Mg的存在下2+，该酶可以随机识别并切割任何DNA链上的任意位点；并且在Mn2+，能同时识别两条DNA链，并在几乎相同的位置进行切割，形成平末端， 或者有1-2个核苷酸伸出的粘末端。DNase I广泛应用于DNA-free RNA的制备；体外转录后去除模板DNA；RT-PCR和RT-qPCR反应前制备DNA-free RNA；与DNA聚合酶I结合，通过缺口易位进行DNA标记；DNA片段化文库构建。
本产品按照GMP工艺要求生产，产品以液体形式提供。
特征
- DNA特异性内切酶
- 降解双链和单链 DNA
- 产品是含有 5'-磷酸和 3'-OH 的短寡核苷酸
应用
- 从 RNA 样本中去除污染的基因组 DNA
- 转录反应中 DNA 模板的降解
规格
| 来源 | 重组 大肠杆菌 含有 DNase I 基因 |
| 最佳温度 | 37℃ |
| 存储缓冲区 | 10 mM Tris-HCl pH 7.6，2 mM CaCl2, 50% (v/v) 甘油 |
| 单位定义 | 在37°C下，10分钟内完全降解1μg质粒DNA所需的酶量。（反应缓冲液为：10 mM Tris-HCl pH 7.6、2.5 mM MgCl2, 0.5 毫米氯化钙2，1 μg质粒DNA） |
成分
| 部件编号 | 姓名 | 10611ES76 （500单位） | 10611ES84 （2,000 美元） | 10611ES92 （10,000单位） |
| 10611 | 脱氧核糖核酸酶 I (DNase I) GMP 级 (2 U/μL) | 250 微升 | 1 毫升 | 5 毫升 |
运输和储存
脱氧核糖核酸酶I（DNase I）GMP级产品采用干冰运输，可在-15℃~-25℃保存一年。
数字
图 1. DNase I 来自
[1] Lu Z, Liu H, Song N, et al. METTL14 通过 N<sup>6</sup>-甲基腺苷依赖性 Sirt1 下调加重足细胞损伤和肾小球病进展。Cell Death Dis. 2021;12(10):881。2021 年 9 月 27 日发表。doi:10.1038/s41419-021-04156-y（影响因子：8.469）
[2] 余燕，王燕，张伟等。由成骨前体衍生基质和水凝胶组成的仿生骨膜-骨替代物用于修复大段骨缺损。Acta Biomater。2020；113：317-327。doi：10.1016/j.actbio.2020.06.030（影响因子：7.242）
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