描述
S-腺苷甲硫氨酸(S-Adenosyl methionine,SAM)是参与甲基转移反应的辅助底物,在体内是由三磷酸腺苷和甲硫氨酸在腺苷转移酶作用下合成的。SAM在25℃下配制成10 mM HCl、10%乙醇、pH 4的溶液。本产品按GMP工艺要求生产,以液体形式提供。
特征
- 经过验证的特定产品流程和分析方法
- 产品特定的稳定性
- 文件遵循适用的 GMP 指南
- AOF 生产流程和原材料 (TSE & BSE)
- 亚硝胺声明
- 提供监管支持文件
- 规模化生产
应用
- mRNA 疫苗和治疗剂的酶促加帽工艺
- 生物聚合物的酶甲基化
规格
CAS 编号 | 485-80-3 |
公式 | 碳15赫23否6哦5服务+ |
分子量 | 399.44 克/摩尔 |
纯度(HPLC) | > 90% |
内容 | 32 毫米±2 毫米 |
合成 (1X) | 10 mM HCl,10% 乙醇,pH 4,25℃ |
结构 | ![]() |
成分
部件编号 | 姓名 | 10619ES02 | 10619ES25 | 10619ES50 | 10619ES76 |
10619 | S-腺苷甲硫氨酸(SAM) GMP 级(32 mM) | 0.5 毫升 | 25 毫升 | 50 毫升 | 500 毫升 |
运输和储存
产品采用干冰运输,可在-15℃~-25℃保存一年。
数字
- 纯度评估
图 1. SAM 产品的纯度(HPLC)可达 98% 以上(图 1A),(S, S)-SAM 异构体的光学纯度(ee, %)始终在 70% 左右(图 1B)。
- 酶残留检测
图2. 琼脂糖凝胶电泳未检测到酶残留。
将 20 µl 反应体系在含有 500 ng Hind III λDNA 消化产物和 2 µl S-腺苷甲硫氨酸 (SAM) 的缓冲液中于 37ºC 下孵育 4 小时,琼脂糖凝胶电泳结果与对照(反应体系中不含 SAM)相比无差异(图 2A)。将20 µl 反应体系在含有500 ng pUC19 质粒和2 µl S-腺苷甲硫氨酸(SAM)的缓冲液中于37ºC 下孵育4 小时,琼脂糖凝胶电泳结果与对照(反应体系中不含SAM)相比无差异(图2B)。
- 功能测试和验证
图 3 封盖效率
将 20 µl 反应物置于含有 1 µg λDNA、1 单位 M. SssI(CpG 甲基转移酶)和 160 µM S-腺苷甲硫氨酸 (SAM) 的缓冲液中,在 37°C 下孵育 1 小时。经琼脂糖凝胶电泳测定,所得 DNA 不易被 BstUI 消化(图 3A)。将 10 μg RNA 在 65°C 下孵育 5 分钟,使其变性,然后进行加帽。设置 20 μL 转录后加帽反应物,在 PCR 仪中在 37°C 下孵育 2 小时。用磁珠(Cat#12602)纯化转录本。然后通过 LC-MS 检测加帽效率(图 3B)。
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