描述
MicroRNA是一类长度约为22nt的非编码RNA，在植物和动物的基因表达调控中起着重要作用。本试剂盒采用Poly(A)加尾法，将miRNA第一链逆转录为cDNA。产品中的2×Hifair™ miRNA RT buffer含有miRNA Poly(A)加尾反应和逆转录反应所需的全部原料和引物，经过精心优化，确保Poly(A)修饰过程和逆转录过程可在miRNA 3’端同时高效进行。
本产品建议与我公司的Hieff™ miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix（Cat#11171）配合使用，可获得最佳实验效果。
特征
- 高灵敏度检测率：可检测10 pg RNA
- 产品稳定性高：37℃保存7天不受影响
应用
- 合成第一链 cDNA，可作为模板r RT-PCR 和实时 RT-qPCR。
规格
| 最终的 产品 类型 | cDNA（第一链） |
| PCR 方法 | 逆转录聚合酶链反应 |
| 反应格式 | 分离部分 |
| 样品类型 | miRNA |
| 最佳反应温度 | 37℃ |
| 撤销 转录酶 | 微机电压 |
成分
| 部件编号 | 姓名 | 11148ES50 (50T) |
| 11148-A | 希菲尔™ miRNA RT 酶混合物 | 87.5 微升 |
| 11148-B | 2×Hifair™ miRNA RT 缓冲液 | 250 微升 |
| 11148-C | 无 RNase 的 H2哦 | 10 毫升 |
| 11148-D | 通用反向引物（10 μmol/L） | 4 毫升 |
| 11148-E | U6正向引物（10 μmol/L） | 500 μL |
| 11148-F | U6 反向引物 (10 μmol/L) | 500 μL |
贮存
产品储存于-25℃~-15℃，保存期限为1年。
数字
图1. 高灵敏度检测率：可检测到10 pg RNA。
以合成的hsa-miR-let-7e-5p(a)和293T细胞总RNA(b)为模板，分别稀释成60拷贝～606拷贝(6个梯度)和10pg～100ng(5个梯度)，检测所有梯度的cDNA。
[1] Huang G, Chen J, Liu J, Zhang X, Duan H, Fang Q. MiR-935/HIF1α 反馈回路抑制胶质瘤的增殖和侵袭性。Onco Targets Ther. 2020；13：10817-10828。2020 年 10 月 23 日发布。doi：10.2147/OTT.S244409（影响因子：4.147）
[2] 李辉，潘瑞，卢庆，等。 MicroRNA-145-5p 抑制骨肉瘤细胞 通过靶向 E2F 转录因子 3 来抑制细胞增殖。Int J Mol Med。2020；45(5):1317-1326。doi:10.3892/ijmm.2020.4504（影响因子：4.101）
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