描述
microRNA是一类长度约为22nt的非编码RNA，受到广泛关注，在调控动植物基因表达方面发挥着非常重要的作用。本试剂盒采用SYBR Green I嵌合荧光法，用于miRNA荧光的定量检测。2×Hieff™ miRNA Universal qPCR Master Mix是专门针对miRNA的定量检测而研制的新一代预混型荧光定量PCR检测试剂，含有特制的ROX Passive Reference Dye。适用于大多数qPCR仪器，在不同仪器上无需调整ROX浓度，只需在制备反应体系时添加引物和模板即可进行扩增。DNA Polymerase采用化学修饰的热激活Polymerase，结合特殊的Buffer体系，使反应特异性更强，灵敏度更高，可在更宽的范围内准确定量。
建议将本产品与我们的 Hifair™ miRNA 1st Strand cDNA 合成试剂盒（Tailing）（Cat# 11148）一起使用，以获得最佳实验结果。
特征
- 平台范围：无需使用预混颜色改变 ROX 浓度
- 高灵敏度检测率：可检测10 pg DNA
- 扩增性能好：优异的扩增效率
- 特异性高：能够区分同一家族中miRNA之间的单碱基差异
应用
- 基因表达
规格
| 热的 开始 | 内置 热的 开始 |
| 检测 方法 | 同步辐射光源 |
| PCR 方法 | 定量PCR |
| 聚合酶 | 塔克 DNA聚合酶 |
| 类型 的 样本 | 脱氧核糖核酸 |
| 应用设备 | 最多 qPCR 仪器 |
| 产品 类型 | SYBR 预混液，用于实时荧光定量 PCR |
| 申请 到 （应用） | 基因表达 |
成分
| 部件编号 | 姓名 | 11171ES03 | 11171ES08 |
| 11171-A | 2×Hieff™ miRNA 通用 qPCR 预混液 | 1 毫升 | 5×1毫升 |
| 11171-B | 无 RNase 的 H2O | 2×1毫升 | 5×1毫升 |
贮存
产品储存温度为-25℃~-15℃，保存期限为1年。
数字
图1. 扩增性能良好：扩增效率优异。
以人293T细胞和小鼠肝脏总RNA为模板，扩增miR-let-7b-5p、miR-let-7c-5p、miR-let-7e-5p、miR-let-7f-5p基因。结果显示，与同类产品相比，Hifair™ miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit（Cat# 11148ES）与Hieff™ miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix（Cat# 11171ES）反应体系匹配性优异。
图2. 特异性高：能够区分同一家族中miRNA之间的单碱基差异。
人类hsa-let-7家族有多个miRNA，彼此之间几乎没有碱基差异，甚至仅有单个碱基差异，用不同的引物扩增这些miRNA，利用公式2-ΔCTx100%计算匹配率，结果显示可以有效区分亲缘关系较近的亚型家族成员。
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