描述
CRISPR/Cas9 是一种利用 RNA 引导的 Cas 核酸酶对靶基因进行特异性 DNA 修饰的技术，是细菌和古细菌为应对噬菌体和外来质粒的攻击而进化出的一种获得性免疫防御机制。在该系统中，Cas9 核酸酶在人工优化的单向导 RNA (sgRNA) 的引导下，在靶位点切割双链 DNA (dsDNA)，导致 DNA 断裂。DNA 在体内通过非同源末端连接或同源定向修复机制进行修复，导致基因的移码突变、替换或缺失。
HifairTM 精准 sgRNA 合成试剂盒采用 T7 RNA 聚合酶混合物高效转录 spCas9 sgRNA。试剂盒含有 Cas9 蛋白识别的特定序列，可作为支架。部分序列可与用户设计的目标特定序列部分重叠。互补链由 DNA 聚合酶填充，生成用于转录的 dsDNA 模板。使用其提供的试剂和用户设计的特定 DNA 序列，该试剂盒可获得 20-100 μ单管反应 4 小时内可生成 1 g 功能性 sgRNA。
特征
合成产量高：单管反应4小时，sgRNA产量可达20 - 100 μg。
应用范围广泛：不同类型的 sgRNA 均可获得高产量。
高纯度：合成的sgRNA为单一条带。
高活性：合成的sgRNA可以有效引导Cas9切割目标DNA。
应用
CRISPR/Cas 基因编辑
成分
| 部件编号 | 姓名 | 11355ES05 | 11355ES25 | 11355ES50 | 11355ES60 |
| 11355-A | 10×sgRNA 酶混合物 | 10 μL | 50 μL | 100 μL | 200 μL |
| 11355-B | 10×sgRNA反应缓冲液 | 10 μL | 50 μL | 100 μL | 200 μL |
| 11355-C | 2×Canace 酶混合物 | 62.5 微升 | 312.5 微升 | 625 微升 | 1.25 毫升 |
| 11355-D | 脚手架模板 | 6.25 微升 | 31.25 微升 | 62.5 微升 | 125 微升 |
| 11355-E | NTP（各 25 mM） | 40 微升 | 200 μL | 400 μL | 800 μL |
| 11355-F | 对照 sgRNA 寡核苷酸 （10 μ米） | 2 微升 | 10 μL | 20 μL | 40 微升 |
运输和储存
本产品应储存在-25～-15o碳 为了 2 年。
数字
数字 1.不同时间点sgRNA合成量
数字 2。不同序列sgRNA的合成产量
数字 3。合成的sgRNA的纯度（由Agilent 2100测定）
数字 4。sgRNA切割效率图
文件：
安全数据表
11355_材料安全数据表_版本EN20250120.pdf
手册
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