描述
Hieff NGS® RNA Lib Prep 384 CDI Primer for Illumina 是 Illumina 高通量测序平台 RNA 文库构建专用的接头引物试剂盒,分为 2 套,每套包含二代测序文库所用的 PE 接头和 8 套 i5 Index Primer 和 12 套 i7 Index Primer。2 套共包含 16 套 i5 Index Primer 和 24 套 i7 Index Primer,可构建 384 种不同组合的双端索引标记文库。试剂盒中提供的所有试剂均经过严格的质量控制和功能验证,以最大程度地提高文库构建的稳定性和可重复性。
成分
不。 | 姓名 | 体积 |
12414ES02 | PE 适配器 | 320 微升 |
RP 501-508 | 60 μL 每 | |
RP 701-712 | 40 μL 每 | |
12415ES02 | PE 适配器 | 320 微升 |
RP 509-516 | 60 μL 每 | |
RP 713-724 | 40 μL 每 |
运输和储存
所有组件均随附干燥 冰冻条件下可保存于-15℃~ -25℃,保存期为18个月。
笔记:
2)本试剂盒附带的PE Adapter为通用短接头,需要经过PCR扩增才能获得完整文库。Index Primer提供Barcode序列标签,用于高通量测序时区分样本。
3)本试剂盒每套包含8个i5 Index Primers(RP 5xx)和12个i7 Index Primers(RP 7xx),可相互组合构建96种不同组合的双端Index标记文库。2套共提供16个 i5 Index Primers 和 24 个 i7 Index Primers。您可以使用 Cat#12414 中的 i5 Index Primer(或 i7 Index Primer)和 Cat#12415 中的 i7 Index Primer(或 i5 Index Primer)构建多达 384 种不同的双端 Index 标记文库组合。
4)不要加热适配器,让其在室温下慢慢溶解,实验室温度最好设置为20-25℃。 适配器需避免反复冻融,建议分装后在4°C短时间保存。
5)利用Hieff NGS® RNA 384 CDI Primer for Illumina® kit构建的测序文库结构如下:

6)为了您的安全和健康,请穿上工作服并戴上一次性手套。
7)本产品仅供科学研究之用!
指示
1. 接头的使用:按照所用建库手册中不同输入量的推荐用量稀释至适当浓度。
2. Index Primer的使用:按照建库手册中文文库扩增体系(如下表所示)配制反应体系,反应程序按照建库手册中步骤设置。
姓名 | 容量(μL) |
2× 高保真 DNA PCR 混合物 | 二十五 |
RP 5xx | 2.5 |
RP 7xx | 2.5 |
接头连接 DNA | 20 |
电视奥塔尔 | 50 |
序列信息
Illumina PE适配器:
5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T-3´
Illumina i5 Index Primer:
5´-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC[i5 指数]ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-3´
Illumina i7 Index Primer:
5'-卡格CAGAAGACGGCATACGAGAT[i7 指数]GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-3´
[i5 指数]8 bp 的 i5 索引序列,[i7 指数]8 bp 的 i7 索引序列。
每个引物对应的Index名称、引物所含的Index序列以及测序时对应的Index序列信息如下表所示:
I5 我索引 姓名 | I5 我索引 顺序 | 测序过程中的索引序列信息 | |
NovaSeq 6000 v1.0 试剂,MiSeq, HiSeq 2000/2500 | NovaSeq 6000 v1。5 试剂, MiniSeq、NextSeq、 | ||
RP501 | 塔塔格 | 塔塔格 | 骨胶原 |
RP502 | 亚泰加格 | 亚泰加格 | 气相色谱-质谱联用技术 |
RP503 | 中信泰富 | 中信泰富 | 加加塔格 |
RP504 | 加拿大高铁总站 | 加拿大高铁总站 | 泰国化学工业联合会 |
RP505 | 澳大利亚联合企业协会 | 澳大利亚联合企业协会 | 中信泰富 |
RP506 | 台湾大学 | 台湾大学 | 塔加塔 |
RP507 | 卡加格 | 卡加格 | 澳大利亚汽车零部件供应商协会 |
RP508 | GTACTGAC | GTACTGAC | GTCAGTAC |
RP509 | 加气混凝土和混凝土技术协会 | 加气混凝土和混凝土技术协会 | 泰国亚洲化学学会 |
RP510 | 抗逆转录病毒药物 | 抗逆转录病毒药物 | 艾塔卡特 |
RP511 | 加油 | 加油 | 泰国大都会天然气公司 |
RP512 | 卡卡加特 | 卡卡加特 | 澳大利亚交通部 |
RP513 | 泰克CTGCC | 泰克CTGCC | GGCAGCTA |
RP514 | AGCGAATG | AGCGAATG | 计算机辅助训练计算机断层扫描 |
RP515 | 大连化学工业研究院 | 大连化学工业研究院 | 加拿大 |
RP516 | 艾加加特 | 艾加加特 | 澳大利亚旅游局旅游特遣队 |
I7 我索引 姓名 | I7 我索引 顺序 | 测序过程中的索引序列信息 |
RP701 | CGAGTAAT | 攻击CG |
RP702 | 泰国商会联合会 | TCCG嘎嘎 |
RP703 | 特有的亚洲高铁 | CGCTCATT |
RP704 | 加拿大高铁 | 加加特中国 |
RP705 | 特遣队 | 澳大利亚阿特卡加阿 |
RP706 | 加拿大总工会 | GAATTCGT |
RP707 | AGCTTCAG | 慢性胃炎 |
RP708 | 卡塔 | 气相色谱法 |
RP709 | 中亚化学学会 | CGGCTATG |
RP710 | 特立尼达和多巴哥共和国 | 泰国CGCGAA |
RP711 | GCGCGAGA | TCTCGC |
RP712 | 慢性胃炎 | AGCGTAG |
RP713 | 中亚热带农业中心 | CGTGTAGG |
RP714 | 基因转移酶 | 加卡塔克 |
RP715 | 甘油三酸酯 | 塔卡 |
RP716 | 中科院 | 糖基化甘油三酸酯 |
RP717 | 澳大利亚阿格特GCCA | 泰国大湾区企业联合会 |
RP718 | 泰国国际航空运输协会 | 加权平均遗传算法 |
RP719 | 陸陸 | 加塔克 |
RP720 | 中亚化学工业联合会 | TGGAGCTG |
RP721 | 泰国胶粘剂及胶粘剂研究会 | 泰国亚洲化学学会联合会 |
RP722 | 腺苷酸环化酶 | CGTA标签 |
RP723 | AGCGTAGC | 胃癌诊断及治疗 |
RP724 | 加气混凝土 | 加拿大综合癌症中心 |
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