描述
Tth DNA 聚合酶是一种从嗜热细菌中发现的耐热 DNA 聚合酶 嗜热菌HB8。在Mg²⁺存在下，该酶具有5′-3′ DNA聚合酶活性和5′-3′核酸外切酶活性，但缺乏3′-5′核酸外切酶活性，使其可广泛应用于PCR扩增反应。在Mn²⁺存在下，该酶在55-70°C温度下表现出较强的逆转录酶活性，使其适用于一步法RT-PCR反应。
规格
单位定义： 一个活性单位（U）定义为以活化的鲑鱼精子 DNA 作为模板/引物，在 74°C 下 30 分钟内将 10 nmol 总核苷酸整合成酸不溶性产物的酶量。
成分
| 不。 | 姓名 | 尺寸 | |
| 14607ES72 （250单位） | 14607ES80 (1250 （U） | ||
| 14607-A | Tth DNA 聚合酶（5 U/μL） | 50 微升 | 250 微升 |
| 14607-B | 5×Tth逆转录聚合酶链反应 缓冲 | 1 毫升 | 4×1.25 毫升 |
| 14607-C | 10×T次PCR 缓冲 （含 Mg2+） | 500 微升 | 2×1.25 毫升 |
| 14607-D | 50mM 醋酸镁 | 250 微升 | 1.25 毫升 |
| 14607-E | dNTP 混合物（各 10 mM） | 150 微升 | 750 微升 |
船运 和存储
船运用干冰储存。 在 -20°C，保质期2年。
防范措施
1）解冻后缓冲液中若出现少量沉淀，属正常现象，使用前请颠倒混匀。
2）为了您的安全和健康，操作时请穿戴工作服和一次性手套。
3）本产品仅供研究使用！
指示
推荐的 PCR 反应步骤：
1.反应体系的制备
| 姓名 | 体积 （微升） |
| 10×T次PCR 缓冲 （含 Mg2+） | 5 |
| Tth DNA 聚合酶（5 U/μL） | 0.5 |
| dNTP 混合物（各 10 mM） | 1 |
| 上游 底漆 10μM | 2 |
| 下游 底漆 10μM | 2 |
| 模板DNA | 50 pg- 1微克 |
| 氢键2哦 | 到 50 |
[注]：Tth DNA Polymerase、上下游引物、dNTP Mixture的用量可根据具体实验需要进行调整。
2. 循环设置
| 步骤 | 温度(摄氏度） | 时间 | 周期 |
| 预变性 | 94 | 30秒至5分钟 | 1 |
| 变性 | 94 | 30 秒 |
三十五
|
| 退火 | 50-70 | 30 秒 | |
| 扩大 | 72 | 60秒/kb | |
| 最终延伸 | 72 | 10 分钟 | 1 |
[注]：反应条件可根据具体实验要求进行调整。
建议的 RT-PCR 反应程序：
1. 反应体系的制备
| 姓名 | 体积 （微升） |
| 5×T反应 缓冲 | 10 |
| Tth DNA 聚合酶（5 U/μL） | 1.5 |
| 50mM 醋酸镁 | 2.5 |
| dNTP 混合物（各 10 mM） | 1.5 |
| 上游 底漆 10μM | 2 |
| 下游 底漆 10μM | 2 |
| 模板 核糖核酸 | 50 pg- 1微克 |
| 水 | 到 50 |
[注]：Tth DNA Polymerase、上下游引物、dNTP Mixture的用量可根据具体实验需要进行调整。
2.循环设置
| 步骤 | 温度（摄氏度） | 时间 | 周期 |
| 逆转录 | 55-70 | 30分钟 | 1 |
| 预变性 | 94 | 30秒至5分钟 | 1 |
| 变性 | 94 | 30 秒 |
三十五
|
| 退火 | 50-70 | 30 秒 | |
| 扩大 | 72 | 60秒/kb | |
| 最终延伸 | 72 | 10 分钟 | 1 |
[注]：反应条件可根据具体实验要求进行调整。
付款和安全
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