描述
核糖核酸酶 R (RNase R) 来自 大肠杆菌,是一种镁依赖性 3′→5′ 外切核糖核酸酶, 能 消化所有线性RNA,但不消化套索或环状RNA结构。大多数细胞RNA将被RNase R完全消化,但tRNA,5S RNA和内含子套索除外。RNase R用于富集生物样本中的环状RNA,识别内含子套索序列,识别外显子环状RNA,研究可变剪接。
特征
通过 ISO 13485 认证,保证功效和质量。
可批量购买或定制配置。
有效分解线性 RNA,同时保留套索环和环状 RNA。
线性 RNA 的选择性消化增强了环状 RNA 的分离,用于蛋白质生产或内含子 cDNA 文库构建。
提供GMP级RNAse R
规格
来源 | 重组 大肠杆菌 携带 RNAse R 基因的菌株 大肠杆菌 |
最佳温度 | 37℃ |
存储缓冲区 | 50 mM Tris-HCl、100 mM NaCl、 0.1 mM EDTA, 0.1% Triton® X-100, 1 毫米 DTT, 50%甘油,pH7.5 25℃ |
单位定义 | 一个单位在 37°C 下 10 分钟内将 1 μg poly-r(A) 在 20 mM Tris-HCl (pH 8.0)、100 mM KCl 和 0.1 mM MgCl 中转化为酸溶性核苷酸2。 |
应用
RNase R 是环状 RNA 合成 (circRNA) 的基本成分。circRNA 有望提高药物稳定性和生物稳定性。circRNA 具有共价闭合结构,可抵抗 RNA 核酸外切酶。[1,2] RNase R 广泛应用于各种研究,包括可变剪接、内含子 cDNA 生成以及剪接中间体和套索的分离。
成分
部件编号 | 姓名 | 14615ES25 | 14615ES72 | 14606ES80 |
14615 | RNase R(GMP 级,20 U/μL) | 25 微升 | 250 微升 | 1 毫升 |
贮存
本产品储存于-25~-15℃,保存期限为2年。
指示
在无菌微量离心管中制备以下反应体系
成分 | 体积 |
10×RNase R反应缓冲液 | 2 微升 |
RNA样本 | 1 微克 |
RNase R(20 单位/μL) | 2-4U |
无 RNase ddH2哦 | 最多 20 微升 |
37℃孵育10- 30分钟。
数字
图 1:线性 RNA 分子可被
图 2: CircRNA 不能被
笔记
- RNase R 的活性需要 0.1-1.0 mM Mg2+;
- 随着RNA的增加,可以适当延长反应时间及增加酶用量;
- RNA样本中的EDTA含量可能会影响RNase R的活性。
- 70℃孵育10分钟可使酶失活。
参考
- 曲丽,易Z,沉Y,等。针对 SARS-CoV-2 和新出现变种的环状 RNA 疫苗。 Cell. 2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
- Chen L, Wang C, Sun H, et al. 用于发现和分析 circRNA 的生物信息学工具箱。 简报生物信息。2021;22(2):1706-1728。doi:10.1093/bib/bbaa001
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