描述
T4 RNA Ligase 1,又称T4 RNA连接酶,是一种ATP依赖性酶,可催化单链RNA(ssRNA)、单链DNA(ssDNA)或单核苷酸分子的5'-P末端和3'-OH末端之间形成磷酸二酯键。T4 RNA Ligase 1可以进行ssRNA分子之间的连接(效率最高),ssDNA与ssRNA之间的连接(效率较低),也可用于ssDNA分子之间的连接(效率非常低)。它适用于ssRNA分子的连接以及NGS miRNA文库构建中5'接头的连接。
图1. T4 RNA连接酶1的作用机制
特征
催化单链 RNA (ssRNA)、单链 DNA (ssDNA) 或单核苷酸分子的 5'-P 末端和 3'-OH 末端之间形成磷酸二酯键。
应用
RNA克隆
用于 NGS 的 miRNA 文库构建的 5' 接头
环状 RNA 制备
规格
单位定义 | 一个单位定义为在 37 ℃ 30 分钟内将 1 纳摩尔 5-[32P] rA16 转化为抗磷酸酶形式所需的酶量o碳 |
来源 | 重组蛋白表达 大肠杆菌 来源于T4噬菌体 |
反应条件 | 10×T4 RL1 反应缓冲液:500 mM Tris-HCl(pH 7.5,25o碳), 100 毫摩尔/升氯化镁2, 20 mM DTT; 最佳孵育温度为 37o碳 |
灭活条件 | 加热至 65o碳 15 分钟或煮沸 2 分钟可灭活 T4 RNA Ligase 1。或者,添加终浓度为 50 mM EDTA pH 8.0 的溶液可终止 T4 RNA Ligase 1 的反应 |
成分
成分 不。 | 姓名 | 14651ES80 | 14651ES90 |
14651-A | T4 RNA连接酶1 (10单位/μL) | 500 微升 | |
14651-B | 10×T4 RL1 反应缓冲液 | 200 微升 | 1 毫升 |
运输和储存
本产品应储存在-25~-15o碳 两年。
文件:
安全数据表
14651_材料安全数据表_版本EN20241209.pdf
手册
付款和安全
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