描述
希菲尔™ 卓越通用多重一步法RT-qPCR探针试剂盒（UDG Plus）是一款以RNA为模板的多重定量PCR试剂盒，实验过程中逆转录和定量PCR在同一管内进行，简化了实验操作，降低了污染风险。
本试剂盒采用耐热Hifair™高效合成第一链cDNA 逆转录酶和 UNICON™ 定量扩增 HotStart Taq DNA 聚合酶。该试剂盒主要含有优化的 MP 缓冲液、酶混合物。缓冲液中已含有 Mg2+ 及dNTP Mix。另外添加了能有效抑制非特异性PCR扩增、提高多重qPCR反应扩增效率的因子，在保证扩增效率的同时，可进行多达多重的扩增反应；添加了dUTP/UDG系统，有效防止气溶胶污染风险。
特征
特征
1. 格多功能性： 适用于病原微生物、人类基因组、植物等物种的核酸qPCR扩增与检测。
2. 高灵敏度： 精心优化的缓冲系统将低浓度模板的检测灵敏度提高至250拷贝/毫升。
3. dUP/UDG 系统： 引入dUTP/不耐热UDG防污染体系，高效降解产品气溶胶污染，降低假阳性，确保结果真实。
4. 支持英 快速程序： 兼容40分钟快速程序。
5. 超强稳定性： 稳定埃 37℃保存14天，反复冻融10次。
规格
| 部件编号 | 16901ES60 / 16901ES80 / 16901ES92 |
| 尺寸 | 100 温度 / 1000 电视 / 万吨 |
成分
| 姓名 | 16901ES60 （100吨） | 16901ES80 (1,000吨) | 16901ES92 (万吨) | |
| 16901-一个 | 500 μL | 5 毫升 | 50 毫升 | |
| 16901-B | 希菲尔™ 酵素混合物 | 100 μL | 1 毫升 | 10 毫升 |
笔记： 1）5×Hifair™ MP Buffer 是 Hifair™ 的缩写 优质多重一步法 RT-qPCR 探针缓冲液，包括 dNTP、dUTP、Mg2+、稳定器等等。
2）Hifair™ 酵素混合物 主要包含 希菲尔™ 逆转录酶，UNICON™ HotStart Taq DNA 聚合酶, RNase抑制剂, 和 UDGase等等。
贮存
产品应在-25℃~-15℃保存，保存期为1年，应避免反复冻融。
指示
| 体积 （μL) | 最终浓度 | |
| 5×Hifair™ MP 缓冲器 | 5 | 1× |
| 希菲尔™ 酵素混合物 | 1 | - |
| 引物混合物（10 μM） | 各 0.4 | 0.16 μM |
| 探针混合物（10 μM） | 各 0.2 | 0.08μM |
| 1-5 | - | |
| RNase 自由 H2哦 | 至 25 | - |
1. 反应组成：
笔记：使用前务必摇匀，避免剧烈震动造成过多气泡。
一个)引物浓度： 底漆 混合物包括多重引物， 根据情况，最佳引物浓度可能在0.1至1.0μM之间。
b)探针浓度：探针混合物包括标记不同荧光基团的多重探针，根据情况最佳探针浓度可能在0.05和0之间。5 μM。
丙）模板稀释：qPCR敏感性较高，建议稀释模板，对照Ct值在20~35之间比较合适。
d) 系统准备：卸下带滤芯的滤头。避免交叉污染和气溶胶污染。
2. 优化循环方案
（1） 标准扩增程序
| 反应阶段 | 温度 | 时间 | 循环 | |
| 1 | 逆转录 | 50 摄氏度一个 | 1 | |
| 2 | 初始变性 | 95°C | 5 分钟 | 1 |
| 3 | 扩增反应 | 95°C | 15 秒 | 45 个循环 |
| 60°Cb | 三十 秒丙 |
笔记：
a) 逆转录：温度可选择 50°C 或 55摄氏度 10-15分钟。
b) 扩增反应：根据设计引物的Tm值调节温度。
c) 荧光信号采集：请根据实验要求设定实验步骤 乐器 手动的。
（2） 快速扩增程序
|
| 反应阶段 | 温度 | 时间 | 循环 |
| 1 | 逆转录 | 50 摄氏度 | 5 分钟 | 1 |
| 2 | 初始变性 | 95°C | 三十 秒 | 1 |
| 3 | 扩增反应 | 95°C | 5 秒 | 45 个循环 |
| 60°C | 20 秒 |
笔记：如果实际的qPCR检测器支持快速扩增，请进行预测试来确认。
3.应用设备
澳大利亚商业信息局 5700、7000、7300、7700、7900HT Fast、StepOne™、StepOne Plus™，ABI 7500、7500 Fast、ViiA™7、QuantStudio™ 3 和 5、QuantStudio™ 6、7、12k Flex；
斯特拉塔金 MX3000P™、MX3005P™、MX4000P™；
伯乐 CFX96™、CFX384™、iCycler iQ™、iQ™5、MyiQ™、MiniOpticon™、Opticon®、Opticon® 2、Chromo4™；
艾本德 Mastercycler® ep realplex、realplex 2 s；
Qigen Corbett Rotor-Gene® Q、Rotor-Gene® 3000、Rotor-Gene® 6000；
罗氏 应用科学 LightCycler® 480、LightCycler® 2.0；Lightcycler® 96；
热 科学的 PikoReal 循环仪； 造父变星 SmartCycler®； 伊路明纳 生态 qPCR； 斯兰 96S、96P。
笔记
请穿戴必要的个人防护装备，例如实验服和手套，以确保您的健康和安全！
请使用不含RNase的耗材 为了 实验。
本产品适用于 研究 仅使用！
付款和安全
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