希夫NGS^商标 缅因大学 DNA 筛选珠是根据 SPRI（固相逆固定）原理制备的 适用于下一代测序 (NGS) 文库制备过程中的 DNA 纯化和大小选择。Hieff NGS^商标 缅因大学 DNA Selection Beads 可与多种 DNA 和 RNA 文库制备试剂盒兼容。该产品在超洁净设备中生产，清洁度高，可用于病原体检测过程中的 DNA 纯化步骤。

规格

成分

贮存

本产品应储存在 2~8℃保存18个月。

运输和储存

这些珠子用冰袋运输，可以在 2°C-8°C 下保存一年。

指示

• 1. 准备

使用前，将选择珠在室温下平衡至少 30 分钟。

• 2. DNA 大小选择

尺寸选择的操作流程如图1所示，协议如下。

图 1. DNA 大小选择流程图

2.1 每次使用前，请通过涡旋或上下移液的方式将珠子彻底混合。
2.2 将第一轮筛选珠加入样品中（参见表1）。涡旋或上下移液至少10次以充分混合。
2.3 室温下孵育5分钟。
2.4 短暂离心后置于磁力架上，待溶液澄清（约5分钟）后，将上清转移至新的PCR管中。
2.5 按照表 1 将第二轮选择珠添加到步骤 2.4 的样品中。通过涡旋或上下移液至少 10 次来充分混合。
2.6 室温下孵育 5 分钟。
2.7 短暂离心后，将离心管置于磁力架上，待溶液澄清后（约 5 分钟），弃去上清液。
2.8 将管子放在磁力架上，加入 200 μL 新鲜配制的 80% 乙醇，不要搅动磁珠，室温下孵育 30 秒。吸出乙醇并丢弃。
2.9 重复步骤 2.8 一次，总共清洗两次。
2.10 用10 µL 移液器吸头吸去残留乙醇，将管子放在磁力架上，打开盖子，风干筛选珠直至出现裂纹（约5分钟）。
注意：不要过度干燥选择珠。这可能会导致 DNA 目标的回收率降低。
2.11 从磁力架上取下离心管，加入适量 ddH2O（≥20 µL），旋涡震荡或上下移液至少 10 次，充分混匀。
2.12 室温下孵育 5 分钟。
将管短暂旋转并放置在磁力架上。当溶液澄清时（约 5 分钟），将 20 μL 上清液转移到新管中。

• 3.DNA 大小选择的推荐条件

将小牛胸腺DNA超声破碎，制备100~1,000 bp的片段，按照表1进行两轮大小选择，采用Agilent 2100 Bioanalyzer分析结果（图2）。

表 1. DNA 大小选择的推荐条件

注：表中“×”表示样本DNA体积，例如文库插入片段长度为250 bp，样本DNA体积为100 μL，则第一轮分选所用磁珠体积为0.80×100 μL=80 μL；第二轮分选所用磁珠体积为0.20×100 μL=20 μL。

图2. Agilent 2100高灵敏度DNA芯片电泳图