这 磁的 残差 脱氧核糖核酸 样本 准备套件 是 合适的 为了 这 预处理 的 残差 脱氧核糖核酸 在 各种各样的 生物 样品。它利用独特的磁珠和精心的 优化的缓冲系统。

磁性 残留DNA样本制备试剂盒 可以与多种宿主细胞残留DNA一起使用 检测试剂盒，包括 CHO 宿主细胞 DNA 残留检测试剂盒 （Cat#41301ES），HEK293 宿主细胞 DNA 残留检测试剂盒 （Cat#41302ES），Vero 宿主细胞 DNA 残留检测试剂盒 （目录号：41303ES）， 及大肠杆菌宿主细胞DNA残留检测试剂盒 （目录号#41304ES）。

产品组件

运输和储存

1. 第一部分用冰袋运输，4°C 保存 1 年或 长期储存温度为-20°C。

2. 第二部分在室温下运输，并在室温下保存1年。

3. 第三部分用干冰运输并储存在-20°C 为期1年。

4. 收到货后，请检查第一部分、第二部分、第三部分三个组分是否齐全，并立即存放在相应的储存温度内。

注意事项

1. 使用前请仔细阅读说明书，并严格按照说明书进行操作。样本处理建议在超净台或生物安全柜上进行。

2. 常温保存的溶液要注意观察是否有沉淀或浑浊（特别是冬天等室温较低时），可37℃水浴至溶液澄清为止，以免影响使用效果。

3. 洗脱过程中可能会有残留磁珠，因此抽取样品时尽量避免吸走磁珠。

4. 使用本产品时，请经常更换吸头以避免交叉污染。

5. 为了您的安全和健康，操作本产品时，请穿戴个人防护设备（PPE），例如实验室工作服和一次性手套。

6. 本产品仅供研究使用！

前期准备

1. 自备设备：涡旋振荡器、水浴或金属浴、离心机、磁分离架、杭州奥盛Auto-Pure32A全自动核酸提取仪或其他品牌全自动核酸提取仪。

2. 自备耗材：10μL-1000μL 低吸附滤芯吸头、1.5mL低吸附离心管、PCR管或96孔板及相应的管盖或膜。

3. 自制试剂：无水乙醇（分析纯）、1×PBS缓冲液（pH 7.4，不含Mg、Ca离子）、超纯水。

4. 首次使用时，请将标签或说明书中标明量的无水乙醇加入到洗涤液A*和洗涤液B*的瓶中， 使用前充分混匀，并做好标记。使用后请盖紧瓶盖，以保持瓶内乙醇浓度。

手动残留 DNA 提取

1. 样品处理

1.1 若样本中DNA含量较高，例如疫苗，请用1×PBS缓冲液（pH7.4、不含Mg、Ca离子） 然后提取（样本的稀释是为了使检测值在标准曲线的线性范围内，保证检测的准确性，通常可以考虑100倍稀释）。

1.2 如果要测试的样品 是干粉，稀释至 10 mg/mL 或 100 mg/mL，含 超纯水 使用前。

1.3 如果样品基质复杂，应进行标准加入和回收实验，确定合适的稀释度。

2. 将 100 μL 样品加入 1.5 mL 管中， 然后加入 100 μL 裂解缓冲液、10 μL 蛋白酶 K，涡旋并混合 10 秒钟。

【注】：蛋白样品浓度0-100 mg/mL时加入10 μL蛋白酶K，蛋白样品浓度100-200 mg/mL时加入20 μL蛋白酶K。

3. 60°C 孵育 20分钟。

4.然后添加 400 μL 结合溶液、9 μL 糖原和 6 μL 聚 A 钾盐，涡旋并混匀。

5. 加入20 μL磁珠，涡旋混匀，静置10分钟。请涡旋混匀10秒 每 3 分钟

【注意事项】：磁珠使用前需涡旋混合，确保磁珠彻底重悬。一次性加样4-5次后建议再次混匀。

7. 短暂离心使溶液沉淀，将离心管放置于磁力架上1-2分钟，待磁珠完全吸收后，小心吸去液体。

8. 加入500 μL洗涤液A （使用前请检查是否已加入无水乙醇），振摇或涡旋混匀，确保磁珠分散，无磁珠聚集在离心管壁上。

9. 短暂离心，将离心管放在磁力架上静置1-2分钟，待磁珠完全吸收后，小心吸去液体。

10. 加入500 μL洗涤液B （使用前请检查是否已加入无水乙醇）， 摇晃或涡旋混匀，保证磁珠分散，没有磁珠聚集在离心管壁上。

11. 短暂离心，将离心管放在磁力架上静置1-2分钟，待磁珠完全吸收后，小心吸去液体。

12. 为了确保尽可能去除残留液体，将管离心 10 秒钟 迅速置于磁力架上，用10 μL移液器吸去残留液体。

13. 打开管盖，在室温下放置 3 分钟 直至乙醇完全挥发，磁珠表面无反光、无裂纹，表示乙醇已完全挥发。

14. 将离心管从磁力架上取下，加入50-100 μL 预热至65°C 的洗脱液，摇匀。短暂离心后，65°C 孵育 5 分钟，每隔 2-3 分钟摇匀一次。

15. 再次短暂离心，将离心管放在磁力架上静置2分钟，待磁珠完全吸附后，小心将DNA溶液转移到新的离心管中，并保存于-20℃，若需长期保存，则可保存于-80℃。