本试剂盒配备强效裂解缓冲液，可快速裂解样本（如细胞、鼠尾、鼠耳、鼠趾、肌肉等）释放基因组DNA，裂解液无需纯化即可直接加入PCR反应体系，操作方便。另外本试剂盒对样本投入量要求低，5mg小鼠组织或1-5mm鼠尾即可进行实验。

成分

贮存

19697-A （裂解液）应储存在 2~8℃ 1 年。 如果多次使用，请分开包装冷冻以避免交叉污染。 19687-B（停止解决方案） 应存放在 -25~-16℃ 1 年。

指示

小鼠基因组 DNA 释放

1. 将 5-10 毫克动物组织或 1-5 毫米鼠尾夹入 1.5 毫升离心管中*。
2. 将 90 μL 缓冲液 ML 加入上述离心管中，轻轻涡旋以使裂解物完全浸润样品，并短暂离心。
3. 在恒温培养箱中以 95°C 的温度孵育 15 分钟**。
4. 添加 10 μL 缓冲液 MT，轻弹混合，然后终止裂解。
5. 可选步骤：以 12000 rpm 的速度离心 2 分钟。
6. 将上清转移到新的离心管中，4℃或-20℃保存或直接取上清用于后续的PCR扩增。

* 应尽可能切碎组织以使裂解反应更顺利进行。

**95°C 孵育 15 分钟通常足以满足大多数 PCR 需求。如果需要更大量的 DNA 或样本难以裂解，时间可以延长至 30 分钟。组织块无需完全裂解，残留物可以在后续离心步骤中去除。

细胞基因组 DNA 释放

转染细胞在48孔板中培养3天，达到约7万细胞/孔的细胞密度后，尽量吸干培养基，直接每孔加入90ul ML buffer，吹打均匀，全部转入96孔PCR板中，95℃PCR仪处理5-15分钟，冷却后加入10ul MT buffer，吹打均匀，用高保真酶（Cat# 10164）或Taq酶，每50ul PCR反应体系加入0.5-2ul细胞裂解液，进行PCR。

图 1. 直接 PCR 用19697处理的细胞裂解物。

笔记

1. 本产品仅供研究使用。
2. 为了您的安全，请佩戴护目镜、实验服和一次性手套进行操作。
3. 为了避免样品间的交叉污染，每次采样后需将采样器具边缘或与样品直接接触的部分浸入2%次氯酸钠溶液中，冲洗数次，然后用干净的纸巾吸干残液后方可再次使用。为了试验的方便，可准备数个取样装置，使用后统一清洗，保证每个单独样品都用无污染的取样装置取样。
4. 建议使用新鲜取材的动物组织，如遇长期冷冻的组织，应尽量避免反复冻融，否则会导致模板降解，影响PCR效率。

文件：

手册