刀豆球蛋白 A (ConA) 珠是与刀豆球蛋白 A 共价偶联的超顺磁性聚合物微球 （从谷类植物种子中分离出来的植物甘露糖/葡萄糖结合凝集素）在其表面。这些珠子 拥有多个 显著的特征，包括单分散性和强磁反应性。当 Ca²⁺ 和镁²⁺ 离子存在时，ConA磁珠利用ConA球蛋白A与末端α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖基团之间的亲和力，能高效、快速地分离、纯化多糖、糖蛋白、糖脂等各种生物分子。

ConA 磁珠提供了一种分离或固定细胞的便捷方法，可确保在后续清洗步骤中最大限度地减少细胞损失。此外，它们还可用于收集和固定细胞核。此外，这些磁珠还可用于 CUT & Run 和 CUT & Tag 等创新技术，这些技术是 ChIP-seq 实验中使用的革命性方法。

综上所述，ConA磁珠是高效纯化生物分子、方便细胞分离固定、细胞核收集及应用于前沿实验技术的有力工具。

规格

特點

图表

表 1. Yeasen ConA 磁珠捕获率高，已验证按比例使用刀豆球蛋白A（ConA）的微球，在CUT&Tag实验中，可以保证最大的结合量，同时又不至于磁珠在细胞结合后过度聚集，例如使用10 μL ConA包被的磁珠，可以结合相当于E7水平的细胞，结合效率超过98%。

图 1. Yeasen ConA磁珠表现出较高的分散性。在磁珠标记过程中，选择了非生物密封剂，以确保有效封闭，不受批次间差异的影响。这保证了磁珠的良好密封性，在ConA包被磁珠的储存过程中保持其较高的单分散性，这有利于在后续实验中有效结合碳水化合物分子。

图 2. CUT&Tag 染色质信号分布 Yeasen Con A 珠子。

贮存

本品于2~8℃保存，保存期限为2年。

指示

以下操作以糖蛋白纯化或细胞分离为例， 剪切和标记 实验 ， 看 Yeasen 协议的 Cat# 12598ES。

1. 缓冲液的制备

1）客户提供

1. 所需材料不包括：磁力架、Eppendorf 管、PCR 管、磁力架、热循环仪 ETC。
2. 平衡 珠子 在室温下至少 30 分钟。通过涡旋或摇晃瓶子彻底悬浮珠子。

1. 样品处理（ 以哺乳动物细胞为例 ）

1. 准备哺乳动物细胞（1.0×10 ⁴~1。0×10 ⁵ 细胞），离心（4℃，600×g，3~5分钟），并小心 丢弃 上清液。
2. 加入140 μL Binding Buffer，混匀，重悬细胞，离心收集（4℃，600×g，3~5分钟），小心 丢弃 上清液。
3. 加入90 μL结合缓冲液，混匀并重新悬浮细胞。
   注意：紧密贴壁的哺乳动物细胞可以通过使用胰蛋白酶等酶进行部分消化来获得。对于动物组织、植物细胞或真菌细胞，获得分散细胞或原生质体通常需要根据其特定特征进行特殊处理。

1. 准备 ConA 珠

1. 轻轻吹打 ConA 珠子，使其完全悬浮，放置 10 μL 珠子悬浮液置于新的 200 μL 离心管中。
2. 加入40 μL Binding Buffer，混匀，待磁珠吸附于离心管侧壁后，置于磁力架上静置1分钟，弃上清。
3. 加入 10 μL 结合缓冲液，混匀并重新悬浮 ConA 珠。

1. 样品绑定

1. 将制备好的细胞样本加入到预处理的珠子中，轻轻吹打悬浮的珠子，然后在倒置搅拌器上孵育（室温 30 分钟或 4℃ 过夜）。
2. 静置1分钟，待磁珠吸附至离心管侧壁，小心弃去上清。
3. 添加 500 μL 洗脱缓冲液加入细胞-ConA 珠复合物中， 轻轻移液至 重新悬浮珠子，然后 静置1分钟，待磁珠吸附至离心管侧壁，小心弃去上清。
4. 重复步骤3）三至四次。

1. 洗脱

1. 对于糖蛋白，加入50~250 μL Elution buffer，轻轻吹打重悬的珠子，倒置搅拌器孵育（室温10~30分钟），倒置混匀后，置于磁力架上静置1分钟，收集上清至新的1.5 mL管中，进行SDS-PAGE或Western blot。
2. 对于细胞来说，无需洗脱。

笔记

1. 平衡 刀豆素A 室温下的珠子 使用前。
2. 避免冷冻，否则会导致珠子材料降解或失去活性。
3. ConA需要Ca2+和Mn2+离子的存在才能活化，因此实验过程中应避免使用含有EDTA，或其他金属离子螯合剂的试剂。
4. ConA磁珠与细胞孵育时可能会发生聚集，这是正常现象，不会影响磁珠的正常使用。
5. 本产品仅供研究使用。
6. 为了您的安全，请穿着工作服和戴一次性手套进行操作。

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