聚丙烯酰胺凝胶（PAGE胶）常用于蛋白质电泳，实现蛋白质的分离。该类凝胶一般由浓缩胶和分离胶组成，前者起到浓缩蛋白质样品的作用，后者根据凝胶中所用丙烯酰胺单体和N，N-亚甲基双丙烯酰胺（亚甲基丙烯酰胺）交联剂的浓度不同，分离不同大小的蛋白质。

本试剂盒提供了快速制备PAGE凝胶所需的多种试剂，用户只需自备凝胶制备设备即可制备凝胶，大大简化了凝胶制备流程。本试剂盒制备的凝胶只能用于变性PAGE凝胶电泳，此规格可制备约125块微型凝胶（以0.75mm厚度凝胶计算）。

规格

成分

运输和储存

产品随附冰袋，可存放在 2℃~8℃ 为期1年。

指示： 建议一次不要配置过多片凝胶，避免上层溶液加入过晚（最多建议2-3片）

1.根据目标蛋白的分子量选择合适的凝胶浓度（参考表1）

2.制胶过程（以一片0.75/1.0/1.5mm Mini凝胶为例）

2.1 取等体积的分离胶缓冲液与分离胶溶液，混匀，即分别取2.0/2.7/4.0 mL两种溶液。

2.2称取0.1g过硫酸铵，溶于1mL去离子水中，过硫酸铵需客户自行购买。

2.3 在步骤1的混合溶液中加入35/45/70 μL APS（若凝固太快，APS使用量可减少一半），充分混合。

2.4 将步骤2中的溶液注入制胶玻璃板中。注意浓缩胶加入分离胶后2分钟内注入胶模，浓缩胶倒入要慢，防止浓缩胶与分离胶混合。如果个人觉得配置困难，也可以适应用乙醇封胶后再配置浓缩胶。

2.5浓缩凝胶的制备：取等体积的浓缩凝胶缓冲液与浓缩凝胶溶液，即分别取0.5/0.75/1.0 mL两种溶液，然后加入10/13/18 μL APS，混匀。

2.6 注入制胶玻璃板内，插入梳齿（不要用力过猛，要轻轻插入梳齿）。

2.7 浓缩胶静置15分钟凝固后，即可取出梳齿，进行电泳。注意：请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液。

笔记

1、电泳时电压建议在100-120V之间，如需加快电泳速度，可提高至150V。

2、灌注凝胶前务必将凝胶溶液平衡至室温（例如保持几分钟），以有效避免凝胶中产生气泡。

3. 过硫酸铵需客户自行购买，建议使用Sigma公司Cat#A3678的产品。

4、过硫酸铵溶液的用量仅供参考，实际用量可根据个人实验习惯和经验适当增减。过硫酸铵加入量多，凝胶速度加快，反之则慢。PAGE凝胶的凝固速度与温度、过硫酸铵加入量密切相关。

5、本产品已添加适量TEMED替代物，如需进一步加快凝胶速度，可在配制前根据需要添加适量TEMED。

6、凝胶凝固与温度呈明显的正相关关系，在同等条件下，温度越高，凝固速度越快。

7.彩色浓缩胶在储存过程中可能会产生少量沉淀，属正常现象，请放心使用。

8. APS 储存于 -20℃为方便起见，已打开并正在使用的APS可以存放在4℃。

9. 请穿戴必要的个人防护装备，如工作服和手套，以确保您的健康和安全！

10.仅供研究使用！

表 1 不同浓度SDS-PAGE凝胶分离范围参考值

文件：

安全数据表

20327-A-MSDS-CN20250110

20327-乙-MSDS-CN20250110

20327-碳-MSDS-CN20250110

20327-德-MSDS-CN20250110

手册

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