增强型ECL化学发光底物试剂盒用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶（HRP）的抗体及相关抗原。增强型ECL化学发光底物试剂盒的原理是，蛋白质或核酸经电泳后转移到印迹膜上，用HRP标记的一抗和二抗结合膜上的目标蛋白质，或用HRP标记的探针直接或间接结合膜上的核酸。洗膜后，用本产品配制的ECL工作液室温孵育膜数分钟。将印迹膜用保鲜膜包好，固定于X光曝光盒上。然后在暗室中将X光胶片压在膜上，曝光数秒至数小时，经显影、定影后，蛋白质或核酸条带即可清晰显示在X光胶片上。

本试剂盒具有独特的发光底物系统，在降低曝光背景的同时，引入了新的氧化剂，大大提高了试剂盒的稳定性，使其在室温下可以稳定保存长达一年。除X-ray外，还可直接用荧光CCD扫描主要用于WB检测和化学发光免疫检测系统。

特征

灵敏度高，信噪比高，可检测中等纯度的抗原。

发光迅速、明亮，在荧光灯下可观察到压印的膜带。

特别适合检测目标丰度较高、常规的蛋白质样本。

新型氧化剂，在室温下可稳定保存长达一年。

应用

化学发光 ELISA

蛋白质印迹法

斑点印迹-DNA/RNA

南方印迹法

RNA印迹

规格

成分

运输和储存

产品为常温发货，可常温保存一年，如长期不使用，建议存放在2℃~8℃ 延长有效期。

注意：36222-A 应避光保存！

说明（以X光片为例）

1.常规电泳，转膜，HRP标记的抗体或HRP标记的核酸探针孵育，洗膜。

注意：ECL发光溶液为HRP的显色底物，因此检测体系必须基于HRP酶标抗体或核酸探针。

2.最后一次洗膜的同时，配制新鲜的发光工作液（100-200μL发光工作液/cm2膜）：取等体积的试剂A与试剂B，混匀备用。

注意事项：取试剂A和试剂B必须使用不同的吸头，工作液建议立即使用，室温下放置数小时后仍可使用，但灵敏度略有降低。

3.用平头镊子取出膜，放在滤纸上吸干洗液，不要使膜完全干燥。将膜完全浸入发光工作液中，与发光工作液充分接触。室温孵育1-2分钟，即可准备进行平板曝光。

4.用镊子夹起膜，放在滤纸上吸干发光工作液，但不要洗掉发光液。

5.在X光胶片暗箱内表面铺上一块大于膜的保鲜膜。将压印膜贴在保鲜膜上，将保鲜膜完全折叠在压印膜周围，并去除气泡和折叠，可以剪掉多余保鲜膜的边缘。用滤纸吸干多余的发光工作液。将覆盖压印膜的保鲜膜用胶带固定在暗箱内，蛋白带面朝上。

6.从暗室取出一张X光胶片，放在包好的膜上，压紧胶片，曝光30秒-2分钟，然后显影、定影。

注意：应根据曝光强度调整曝光时间。如果背景太高，请同时使用两张 X 射线胶片。

其他曝光方法

若采用CCD拍照：可将膜放入工作液中，开机后按照使用说明操作，取出膜，拍照。另外，可根据情况调整机器的测量参数，以提高信噪比。

笔记

1. 转膜、封膜、孵育过程中应尽量避免产生气泡，并戴手套操作，避免在膜上留下指纹，保持膜的清洁。

2. 曝光时间过长或蛋白质含量过高，会使背景加深，使谱带强度的变化失去线性关系。曝光不足会使谱带变得模糊。

3. 有些保鲜膜在包裹印迹膜时可能会使荧光猝灭，应选择质量好的保鲜膜。

4、避免将多片膜放在同一个洗膜盒内，相互吸附或者摩擦可能会造成深背景。

5. 可以使用可见的预染蛋白质标记和荧光放射自显影曝光标签准确确定胶片上条带的位置和大小。

6. 使用生物素-亲和素系统，避免使用牛奶封闭，这可能会导致背景过高。

7. 金属氧化物颗粒可能会在膜上造成颗粒状斑点。避免使用生锈的剪刀和镊子。请使用塑料扁平镊子。

8. 叠氮化钠（NaN3）能抑制HRP活性，若回收HRP标记探针或抗体时应避免使用NaN3，必要时不得超过0.01%。

9、本品无特殊毒性，按常规化学处理即可。

10. 请穿戴必要的个人防护装备，如工作服和手套，以确保您的健康和安全！

11.仅供研究使用！

文件：

安全数据表

36222-A-MSDS-CN20250110

36222-B-MSDS-CN20250110

手册

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