描述
天然蛋白 A 是金黄色葡萄球菌中发现的一种细胞壁表面蛋白,它类似于从 属 格 或者 碳 链球菌,结合 最多 哺乳類 免疫球蛋白G 经过 互动 主要 和 这 抗体 地区 免疫球蛋白(Ig)的种类繁多,但结合特异性不同,可用于多种抗体(单克隆抗体和多克隆抗体)的分离纯化。Protein A和Protein G对不同免疫球蛋白亚类的结合特性不同(详见附录1)。
本产品采用基因改造的蛋白A,既保留了其免疫球蛋白亲和特性,又去除了天然蛋白本身的非主要结合结构域,以减少非特异性结合。以高交联琼脂糖凝胶为基质,以改性耐碱重组蛋白A为配体的SuRi rProtein A琼脂糖树脂具有很高的理化稳定性。用本产品通过一步亲和层析可以从腹水、血清和培养基样品中获得高纯度的抗体,使用方便,应用广泛。
成分
部件编号 | 姓名 | 36401ES08 | 36401ES25 | 36401ES60 |
36401 | 苏里尔蛋白 琼脂糖 树脂 | 5 毫升 | 二十五 毫升 | 100 毫升 |
规格
矩阵 | 4% 高度交联琼脂糖凝胶 |
配体 | 耐碱性重组蛋白 一个 |
珠子 尺寸 | 90 微米 |
最大工作压力 | 0.3兆帕 |
存储缓冲区 | 1×PBS,含20%乙醇 |
结合容量 | 50 毫克/毫升 |
耐碱性 | 0.1-0.5米 氢氧化钠 |
船运 和 贮存
产品随附冰袋。 2~8℃可稳定保存 五年。
指示
- 缓冲液制备
建议采取以下措施 缓冲液使用前需用0.22 μm或0.45 μm滤膜过滤。 平衡/结合/洗涤缓冲液:0.15 M NaCl,20 mM 钠 磷酸氢钙,pH 值 7.0
洗脱缓冲液:0.1 M 甘氨酸,pH 3.0
中和缓冲液:1 MTris-HCl,pH 8。5
- 样品制备
确保 那 这 样本 解决方案 有 这 合适的 离子的 力量 和 pH 前 加载中 这 柱子, 任何一个 经过 用结合/洗涤缓冲液稀释血清样本、腹水或细胞培养液,或用透析剂透析样本 结合/洗涤缓冲液。
- 塔填料
加载 SuRi rProtein 一个 将琼脂糖树脂放入合适的色谱柱中,注意避免产生气泡。
- 样品净化
1) 天平:色谱柱 是 平衡 绑定 缓冲 共 5 次 这 柱子 体积, 所以 那 包装与同一缓冲系统 目的蛋白,并起到保护蛋白质的作用。
2) 样本 加载中: 这 样本 曾是 已加载 到 这 均衡 重组蛋白 一个 琼脂糖 树脂 到 确保 满的 接触 目标蛋白和树脂之间,提高回收率 目标蛋白的速率,并收集流出物至 接受考验。
3) 洗涤:用 10-15倍 柱子 体积 的 洗涤 缓冲, 消除 这 杂质 蛋白质 除非 特异性吸附,收集洗涤液。
4) 洗脱: 洗脱 和 5-10次 柱子 体积 的 洗脱 缓冲, 收集 洗脱液, 那 是, 这 目标 蛋白质 成分。
5) CIP清洗 和 保存: 一般来说 使用 0.1-0.5 米 氢氧化钠 大于 3CV,并且 这 接触 时间 是 15 分钟; 然后 用5CV平衡液冲洗直至呈中性。 最后, 平衡 20% 乙醇 5 倍的列 体积, 和 然后 存储 在 20% 乙醇 的 这 相同的 体积 在 4°C 到 防止 这 包装 从 存在 受到细菌污染。
- SDS-PAGE检测
这 样品 获得 在 这 纯化 过程 (包括 原来的 样品, 流出物 成分, 洗涤 和 通过SDS-PAGE检测洗脱组分(如洗脱液成分等)来判断纯化效果。
笔记
- 请勿冷藏该产品。
- rProteinAAgarose Resin使用前必须充分颠倒几次,使琼脂糖树脂混合均匀。
- 所有操作过程中,样品需在4°C或冰上操作。
- 为了您的安全和健康,操作时请穿着工作服和戴一次性手套。
- 仅供研究使用。
附表1:结合能力总结f 蛋白质 A 和 G 转化为不同 物种
免疫球蛋白亚型 | 蛋白质 一个 | 蛋白G | 免疫球蛋白亚型 | 蛋白质 一个 | 蛋白G |
人类 IgG | ++++ | ++++ | 老鼠 免疫球蛋白G | ++++ | ++++ |
人类 IgG1 | ++++ | ++++ | 老鼠 免疫球蛋白G1 | + | ++++ |
人类 IgG2 | ++++ | ++++ | 小鼠 IgG2a | ++++ | ++++ |
人类 IgG3 | + | ++++ | 小鼠 IgG2b | +++ | +++ |
人类 IgG4 | ++++ | ++++ | 老鼠 免疫球蛋白G3 | ++ | +++ |
苏里尔蛋白 琼脂糖 树脂
人类免疫球蛋白M | 使用抗人 IgM | 老鼠 免疫球蛋白M | 使用抗鼠 IgM | ||
人类免疫球蛋白E | 天然橡胶 | 天然橡胶 | 鸡 IgG (卵黄抗体) | 天然橡胶 | 天然橡胶 |
人类免疫球蛋白A | + | 天然橡胶 | 奶牛 免疫球蛋白G | ++ | ++++ |
人类 IgA1 | + | 天然橡胶 | 山羊 免疫球蛋白G | + | ++ |
人类 IgA2 | + | 天然橡胶 | 山羊 免疫球蛋白G1 | + | ++++ |
人类免疫球蛋白D | 使用抗人 IgD | 山羊 免疫球蛋白G2 | ++++ | ++++ | |
鼠 免疫球蛋白G | + | ++ | 山羊 免疫球蛋白M | 天然橡胶 | 天然橡胶 |
鼠 免疫球蛋白G1 | 天然橡胶 | + | 豚鼠 免疫球蛋白G | ++++ | ++ |
鼠 免疫球蛋白G2a | 天然橡胶 | 天然橡胶 | 豚鼠 免疫球蛋白G1 | ++++ | ++ |
鼠 免疫球蛋白G2b | 天然橡胶 | + | 豚鼠 免疫球蛋白G2 | ++++ | ++ |
鼠 免疫球蛋白G3 | + | ++ | 仓鼠 IgG | + | ++ |
绵羊 IgG | + | ++ | 马 免疫球蛋白G | ++ | ++++ |
绵羊 IgG1 | + | ++ | 兔子 免疫球蛋白G | ++++ | +++ |
绵羊 IgG2 | + | ++ | 兔子 免疫球蛋白M | 天然橡胶 | 天然橡胶 |
绵羊免疫球蛋白M | 天然橡胶 | 天然橡胶 | 兔 所有同种型 | +++ | ++ |
猪 免疫球蛋白G | +++ | +++ | 猴免疫球蛋白G | ++++ | ++++ |
猫 免疫球蛋白G | ++++ | + | 驴 IgG | ++ | ++++ |
狗 免疫球蛋白G | ++ | + | | | |
(+)= 弱结合;(++)= 中等结合;(++++)= 强结合; 天然产物储备量= 不是 受到推崇的; (-)= 未测试; |
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