UltraNuclease又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶，是一种来源于粘质沙雷氏菌的非特异性核酸内切酶，能水解核酸中任意核苷酸间的内部磷酸二酯键，生成2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸，能在极宽的条件下（6 M尿素、0.1 M盐酸胍、0.4%Triton X-100、0.1%SDS、1 mM EDTA、1 mM PMSF）降解各种形式的DNA和RNA（双链、单链、线性、环状、天然或变性），广泛应用于生物制品中核酸的去除，后续也可采用相应的方法去除UltraNuclease。

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（sandwich ELISA）的原理来检测变性和非变性的UltraNuclease的残留。首先用抗UltraNuclease兔多克隆抗体包被于微孔板，形成固相抗体。然后，将UltraNuclease标准品和检测样品加入固相抗体微孔板中，再加入生物素标记的抗-UltraNuclease多克隆抗体，最后加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素（SA-HRP），形成抗体+抗原+抗体-Biotin+SA-HRP复合物。随后向复合物中加入TMB底物，洗涤复合物后观察显色反应。TMB在HRP酶的催化下转变为蓝色，最后在酸的作用下转变为黄色，且颜色的深浅与样品中UltraNuclease的量呈正相关。

该试剂盒检测定量范围为0.047～3 ng/mL；检测下限为23.5 pg/mL。

特征

• 高度灵敏度：检测过程中和最终生物样本中少至 23 pg/ml 的 UltraNuclease 残留量。
• 确保准确性：可以准确检测出UltraNuclease残留量，回收率为80%-110%。
• 特异性：配合使用 Yeasen UltraNuclease可以准确检测出残留物。
• 稳定：批间差异小，37℃放置6天，试剂盒性质不受影响。
• 信号采集方便：采用Biotin-Streptavidin系统，可稳定地放大信号。
• 完整的套件：套件中提供所有关键组件，使用起来具有成本效益。

应用

• 生物制品中残留超核酸酶检测

规格

成分

运输和储存

UltraNuclease ELISA 试剂盒附带冰袋，可于 2°C ~8°C 保存。未开封产品有效期为一年。试剂一旦开封，有效期为半年。切勿冷冻本产品。

配制试剂的贮存：

1. 稀释后的洗涤缓冲液和稀释缓冲液可在2°C~8°C保存1周

2. 标准品36701-C为液态，2°C~8°C保存期为1年

3. 配制好的检测抗体及终止液可在2°C~8°C保存1个月

数字

• 特异性演示

图1. UltraNuclease ELISA试剂盒的特异性如上图所示。

8个模拟样本与试剂盒中的抗体发生非特异性反应，8个样本与阴性样本无显著差异。（*：与阴性样本有显著差异；NS：与阴性样本无显著差异）

• 精密显示

一个）

B）

图 2. UCF.ME™ UltraNuclease ELISA 的精密度测定方法如上所述 方案。

标准曲线上每个浓度进行了6次重复检测，CV%均低于5%（图2A）。3名分析人员进行了UCF.ME™ UltraNuclease ELISA实验，CV%均低于15%（图2B）。

• 准确性验证

一个）

B）

图 3. UCF.ME™ 的准确性 UltraNuclease ELISA 是 按照以下方案进行测定。

UltraNuclease 分别加入 5 μg/mL 细胞裂解液（HEK293、E.coli、CHO、Vero），最终加标浓度为 1.5 ng/mL。在不同细胞样本中的准确度优于其他供应商（图 3A）。UltraNuclease 加入实际样本（客户提供），从 3ng/mL 连续 2 倍稀释至 0.093ng/mL。加标回收率均在 80%~110% 之间（图 3B）。