描述
双链 RNA (dsRNA) 是 mRNA 体外转录过程中产生的副产物。这种副产物在人体内具有免疫原性,能够激发免疫反应,从而降低 mRNA 水平。这使得 dsRNA 成为一种麻烦的工艺杂质,需要彻底清除并严格控制其残留量。
为了解决这一问题,双链 RNA(dsRNA)ELISA 检测试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)的实验原理来量化残留的 dsRNA。 该试剂盒不仅可用于常规dsRNA的检测,还可用于假UTP、N1-Me-假UTP 以及 5-OMe-UTP 修饰的 dsRNA。
该程序包括将标准品和测试样品加入到预先涂有抗 dsRNA 抗体的酶标板(指定为 36717-A)上。随后,以稀释形式添加生物素标记的 dsRNA 检测抗体(36717-F)。最后,加入链霉亲和素-HRP(SA-HRP)(36717-G)以形成由抗体、抗原、生物素和 SA-HRP 组成的复合物。
洗板后,加入 TMB 显色液 (36717-K) 开始显色。在 HRP 酶催化作用下,TMB 从无色变为蓝色,然后通过加入终止液 (36717-L) 停止显色。最终,这种转变会变成黄色,其强度与样本中识别出的 dsRNA 数量呈正相关。
该试剂盒用途广泛,可优化生物制品纯化过程、中间阶段的杂质控制以及最终产品评估的放行测试。
磷产品 五化合 报告
成分
不。 | 姓名 | 36717ES48 | 36717ES96 |
36717-A | 抗 dsRNA 涂层微量滴定条 | 四十八 电视 | 96吨 |
36717-B | STD 1:未修改,5 ng/μL | 7.5 微升 | 15 微升 |
36717-C | STD 2:修饰的 pUTP,5 ng/μL | 7.5 微升 | 15 微升 |
36717-D | STD 3:N1-Me-pUTP 修饰,5 ng/μL | 7.5 微升 | 15 微升 |
36717-E | STD 4:5-OMe-UTP 修饰,5 ng/μL | 7.5 微升 | 15 微升 |
36717-F | 检测 抗体:生物素偶联 抗体(100x) | 60 微升 | 120 微升 |
36717-G | 链霉亲和素-HRP (100x) | 60 微升 | 120 微升 |
36717-H | 稀释缓冲液 1 | 二十五 毫升 | 50 毫升 |
36717-I | 稀释缓冲液 2 | 15 毫升 | 三十 毫升 |
36717-J | 浓缩洗涤缓冲液(20×) | 20 毫升 | 40 毫升 |
36717-K | TMB 底物 | 6 毫升 | 12 毫升 |
36717-L | 停止解决方案 | 3 毫升 | 6 毫升 |
36717-M | 封板机 | 2 | 4 |
运输和储存
试剂盒随附冰袋,可在 2°C ~8°C 下保存。未开封产品有效期为一年。试剂一旦开封,有效期为半年。切勿冷冻本产品。
指示
1. 实验前准备
1)本试剂盒中未提供,但实验必需的实验材料:
a. 无RNase吸头;
b.无RNase离心管;
c.无尘纸;
d.无RNase样本预处理板;
e.去离子水或双蒸馏水。
2)需自备但未提供的仪器设备:
a.多功能酶标仪(含双波长检测模式,涵盖450nm和650nm;可以以450nm为检测波长,以650nm为参比波长);
b.全自动洗板机、涡旋搅拌器、恒温搅拌器、离心机;
c.不同规格的精密微量移液器、多道微量移液器;
d.定时器、4℃冰箱;
e. 微孔板振荡器。
2. 结果分析
a.若待测样本的OD值超过标准曲线最高点的OD值,则需要将样本稀释后重新测定。
b. 曲线绘制程序:通过在 x 轴上绘制标准浓度并在 y 轴上绘制相应的校准标准吸光度值来创建标准曲线。各种绘图和统计软件工具可以帮助生成标准曲线和确定未知样品浓度。建议在本实验中采用四参数或五参数拟合方法。最后根据标准曲线,结合样品的稀释倍数,计算出样品中dsRNA的残留量。
c. 提供的标准曲线为示例(仅供参考),实际样品含量应以针对同一实验标准专门生成的标准曲线为准。
3.实验流程图
图5 实验流程图
4. 产品性能
本套件的性能已经经过充分评估,具体请联系技术人员获取相应的性能验证报告。
5. 笔记
- 在使用该套件之前,请仔细阅读本使用说明书。
- 请在有效期内使用本产品,禁止不同批次相关试剂混合。
- 所有试剂在使用前均需恢复至室温。
- 为了您的安全和健康,请穿上实验服和戴上一次性手套。
- 本产品仅供科学研究之用。
付款和安全
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常问问题
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