描述
希夫传输™ 脂质体转染试剂是一种多功能的脂质体转染试剂,适用于DNA、RNA和寡核苷酸的转染,对大多数真核细胞具有较高的转染效率。其独特的配方使其可以直接加入培养基中,血清的存在不会影响转染效率,减少了因去除血清而对细胞造成的损伤。转染后无需去除核酸-Hieff Trans™复合物或更换新鲜培养基,也可在4-6小时后去除。
希夫传输™ 以无菌液体形式供应。通常,对于24孔板转染,每次约1.5 μL,1 mL Hieff Trans™ 可进行约660次转染;对于6孔板,每次约6 μL,1 mL Hieff Trans™可进行约660次转染。160次转染。
特征
- 卓越的效率:在广泛的细胞系中具有卓越的转染性能,包括瞬时转染和稳定转染
- 适应性广:在多种细胞系中均具有优异的转染效率,且重组蛋白表达水平高
- 低毒性:转染试剂几乎不影响各种细胞的活动
Yeasen - 操作简单:在血清存在下已证实有效——转染后无需更换培养基
- 成本效益:具有竞争力的转染效果,价格更实惠
应用
- 细胞转染
规格
形式 | 液体 |
兼容精华素 | 是的 |
单元格类型 | 已建立细胞系 |
样品类型 | 质粒 DNA、合成 siRNA |
转染技术 | 脂质转染 |
成分
部件编号 | 姓名 | 40802ES02 | 40802ES03 | 40802ES08 |
40802 | 希夫译™ 脂质体转染试剂 | 0.5 毫升 | 1 毫升 | 5×1 毫升 |
运输和储存
产品随附冰袋,可在 2-8ºC 下保存一年。请勿冷冻!
数字
- 转染效果展示
图1. Hieff Trans™脂质体转染试剂的性能优于竞争品牌的转染试剂(图1a中为T*品牌,图1b中为P*品牌)。
每种试剂均以 96 孔板的形式转染目标细胞系(图 1a 中的 Hela 细胞系,图 1b 中的 DF-1 细胞系)。转染后 48 小时分析 GFP 表达。Hieff Trans™ 脂质体转染试剂的 GFP 转染效率高于竞争品牌产品。
- 已验证的细胞系
产品 姓名 | 希夫 透皮脂质体 转染 试剂 | |||||
已验证 细胞 线条 | 293T | 卡卢 1 | HEK293 | HO1980 | N2A | TS |
293F | CHO-K1 | HEK293T | 脐静脉内皮细胞 | NCI-H1975 | U-87 | |
293 英尺 | COS-7 | 希拉 | MCF10A | NIH-3T3 | 维罗 | |
3T3 | 东风-1 | Hep2C | MCF-7 | 神经-2a | 威海 | |
A549 | H1299 | Hep3B | MDA-MB-231 | PC-12 | WRL-68 | |
BV-2 | H520 | 肝素1-6 | MDA-MB-231-LM2-4175 | 镭w264.7 | ||
B50 | 肝细胞癌 | 肝癌 | 糖尿病肾病 | SGC-7901 | ||
C2C12 | HCT116 | HK2 | 中东呼吸联合会 | T47D | … |
图 2. 成功转染 Hieff Trans™ 的细胞系列表 脂质体转染试剂(持续更新中)。
引自“利用工程化光开关 RNA 结合蛋白进行 RNA 功能和代谢的光遗传学控制。Nat Biotechnol。2022 年 1 月 3 日。doi:10.1038/s41587-021-01112-1”
引自“BRCA1-BARD1 复合物募集至受损染色质的结构洞察。Mol Cell。2021 年 7 月 1 日;81(13):2765-2777.e6。doi: 10.1016/j.molcel.2021.05.010。”
引自“UBQLN2-HSP70 轴减少聚-Gly-Ala 聚集体并减轻 C9ORF72 动物模型中的行为缺陷。神经元。2021 年 6 月 16 日;109(12):1949-1962.e6。doi: 10.1016/j.neuron.2021.04.023。”
希夫传输™ 脂质体转染试剂 常问问题
(1)问:制备核酸转染试剂复合物时可以存在血清吗?
A:血清的存在会影响脂质体的形成,建议在制备核酸转染试剂复合物时使用无血清培养基(一般为MEM培养基)。
(2)问:转染试剂可以冷冻吗?
答:不可以。本试剂须保存于2-8℃,且注意避免长时间反复开盖,长期开盖会导致脂质体氧化,影响转染效率。
(3)问:使用Hieff Trans™脂质体核酸转染试剂时应注意什么?
A:1)转染操作时,细胞汇合度达到80%-95%为佳,具体接种密度根据细胞情况决定;
2)使用高纯度的DNA有助于获得更高的转染效率;
3)制备转染复合物时需用无血清培养基稀释DNA和转染试剂;
4)转染时培养基中不能添加抗生素;
5) 首次使用时应优化DNA浓度和阳离子脂质体试剂的用量,以获得最大的转染效率。DNA与转染试剂的比例为 一般建议为1:2-1:3。
(4)转染后需要终止吗?
A:不需要。脂质体复合物的稳定期为6小时。如果转染前没有更换细胞培养基,为了保证细胞正常生长所需的营养,需要在4至6小时后换新培养基。但如果转染前已经换过培养基,脂质体转染后无需换培养基。
(5)问:提高转染效率应该注意什么?
答:a:转染时细胞密度为90%-95%。
b:转染时使用MEM无血清培养基进行核酸和脂质体稀释。
c:转染后4-6小时可换液。
(6)DNA和siRNA可以共转染吗?效果如何?
A:可以共转染,但建议分开转染,且DNA转染应在siRNA转染6小时后进行,若同时操作,siRNA转染效率会较差。
(7)该转染试剂可以用于慢病毒包装转染吗?
A:慢病毒包装是可以的,但是慢病毒包装的效率和转染的效率没有必然联系,还和包装质粒的选择以及质粒之间的配比有关。
(8)问:Hieff Trans™脂质体核酸转染试剂可以用于悬浮细胞的转染吗?
A:Hieff Trans™脂质体核酸转染试剂可用于悬浮细胞转染,具体见Protocol。另外我们还推出了专门针对悬浮细胞的转染试剂(Cat No. 40805,悬浮细胞脂质体核酸转染试剂)。
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