描述
Hieff Trans™ 体外 siRNA/miRNA 转染试剂是一种 PEI 阳离子、两亲性转染试剂,专为将 siRNA 转染到哺乳动物细胞而开发。适用于 siRNA 和 miRNA 的转染。该转染试剂将 siRNA 或 miRNA 包封起来形成阳离子复合物,与细胞表面带负电荷的蛋白聚糖相互作用并吸附在细胞表面,通过内吞作用进入细胞,形成包涵体。转染试剂充当质子海绵,可以吸收 H+ 在溶酶体中,质子的不断流入导致复合物膨胀和破裂,从而将外源的siRNA或miRNA释放到细胞质中。
本产品在广泛的细胞系中均可达到1 nM siRNA 90%以上的表达效率,避免脱靶效应。适合转染多种细胞,包括Hela、MCF-7、HepG2、CHO等贴壁细胞;而对于难转染的悬浮细胞系,如K562或THP-1细胞,可达到80%的沉默效率;包括一些原代细胞、原代人成纤维细胞、原代人肝细胞等,均可达到80%的沉默效率。
特征
- 毒性低:转染后的细胞仍保持良好的活性。
- 适应性广:普通细胞及难转染的原代细胞全覆盖。
应用
- 细胞转染
规格
物理和化学性质 | 信息 |
形式 | 液体 |
兼容精华素 | 是的 |
单元格类型 | 已建立细胞系 |
样品类型 | siRNA/miRNA |
转染技术 | 基于 PEI 的转染 |
成分
部件编号 | 姓名 | 40806ES01 | 40821ES02 | 40821ES03 |
40806 | 希夫传输™ 体外 siRNA/miRNA 转染试剂 | 0.1 毫升 | 0.5 毫升 | 1 毫升 |
贮存
产品应在 2-8ºC 下保存一年。切勿冷冻!
数字
- 转染效果展示
图1. Hieff Trans™体外siRNA/miRNA转染试剂的转染效率如上图所示。
(1)问:DNA转染和siRNA转染有什么区别?
答:1.由于siRNA只有20个碱基对,因此比具有数千个甚至超过10,000个碱基对的DNA小得多。
2. 用于转染DNA的转染试剂和方法不适合转染siRNA。
3. siRNA转染对转染试剂的细胞毒性要求比DNA转染更为严格。
(2)转染后需要更换转染试剂吗?
答:对于介质变化,可分两种情况:
1.若转染前没有换液,则转染后6小时左右应换液,以保证细胞生长所需的营养;
2. 转染前若有变化 当培养基营养缺乏时可照常更换培养基。
(3)问:PEI转染试剂对siRNA和质粒的转染效率如何?
答:此PEI转染试剂是专门针对siRNA开发的,不建议用于质粒转染。
(4)问:转染试剂可以冷冻吗?
A:不可冷冻,因为转染试剂是PEI阳离子转染试剂,低温冷冻会破坏PEI转染试剂的活性,所以最好保存在4度,才能保持最佳的转染效率。
(5)如何提高转染效率?
A:a:转染时的细胞密度,30%-50%。
b:转染过程中应使用Opti-MEM无血清培养基进行siRNA和脂质体稀释。
c:转染后4-6小时可换液。
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