描述
Hieff Trans™通用转染试剂是基于最新纳米技术研发的一种多用途、便捷高效的脂质体转染试剂，适用于DNA、RNA和寡核苷酸的转染，对包括原代细胞、神经元在内的难转染细胞均具有较高的转染效率。其独特的配方使其可以直接加入培养基中，血清的存在不会影响转染效率，减少了血清去除对细胞的损伤。转染后无需去除核酸-转染试剂复合物或更换新鲜培养基，也可根据细胞的营养状况在4-6小时后更换新鲜培养基。
产品组件
| 部件编号 | 成分 | 猫号/尺寸 | ||
| 40808ES02 | 40808ES03 | 40808ES03 | ||
| 40808-A | 环球-A | 0.5 毫升 | 1 毫升 | 5×1毫升 |
| 40808-B | 通用-B | 0.5 毫升 | 1 毫升 | 5×1毫升 |
运输和储存
产品配送冰袋，2-8℃可保存一年，请勿冷冻！
注意事项
1)转染操作时，细胞汇合度达到70%-90%为佳，具体接种密度根据细胞情况确定。
2)转染复合物的制备需要在无血清培养基中稀释DNA和转染试剂。
3)转染时培养基中不能添加抗生素。
4）使用高纯度的DNA或RNA有助于获得更高的转染效率，质粒中的内毒素是转染的大敌。
5）保存于2-8℃，注意不要长时间反复打开盖子。
6)首次使用时应优化核酸浓度和试剂体积，以获得最大的转染效率。
7）本产品仅供科学研究之用！
指示
DNA 转染
【注】转染试剂使用量受细胞种类及其他实验条件影响，建议首次使用时设置梯度以优化最佳使用量。
1) 将细胞接种，转染时细胞融合度应达到70％-90％。
2) 按照下表用 Opti-MEM 培养基稀释 Universal-B 溶液，并轻轻混匀。
3) 用 Opti-MEM 培养基稀释 DNA 以获得 DNA 预混液，然后添加 Universal-A 溶液并轻轻混合以获得稀释的 DNA。
4) 将稀释的 DNA 加入稀释的 Universal-B 溶液中（比例为 1:1）。
5) 室温下孵育 5 分钟。
6) 将 DNA-脂质体复合物逐滴加入细胞中，轻轻混匀。
7) 在37°C、5％CO2培养箱中孵育48-96小时，直至进行基因表达分析。
siRNA 的转染
siRNA 的转染步骤与 DNA 转染步骤相同，只是稀释 siRNA 时不需要添加 Universal-A 溶液（步骤 3）。
表1 不同细胞培养容器的转染量（仅供参考）
| 细胞培养容器 | 96 孔 | 24 孔 | 6孔 | |
| 贴壁细胞 | 1-4×104 | 0.5-2×105 | 0.25-1×106 | |
| 按照下表用 Opti-MEM 培养基稀释 Universal-B 溶液并轻轻混匀。 | Opti-MEM培养基 | 5 微升 | 25 微升 | 125 微升 |
| 通用-B | 0.2 微升 | 1 微升 | 5 微升 | |
| 用 Opti-MEM 培养基稀释 DNA 以获得 DNA 预混物，然后添加 Universal-A 溶液并轻轻混合以获得稀释的 DNA。 | Opti-MEM培养基 | 5 微升 | 25 微升 | 125 微升 |
| DNA（0.5~5 μg/μL） | 0.1微克 | 0.5微克 | 2.5微克 | |
| 通用-A（2 μL/μg DNA） | 0.2 微升 | 1 微升 | 5 微升 | |
| 将稀释的 DNA 加入稀释的 Universal-B 溶液中（比例为 1:1）。 | 稀释 DNA 溶液 | 5 微升 | 25 微升 | 125 微升 |
| 通用-B | 5 微升 | 25 微升 | 125 微升 | |
| 室温下孵育 5 分钟。 | ||||
| DNA-脂质体复合物 | 部件（每孔） | 96 孔 | 24 孔 | 6孔 |
| 优化MEM | 10 μL | 50 μL | 250 微升 | |
| DNA（0.5～5微克/微升） | 0.1微克 | 0.5微克 | 2.5微克 | |
| 通用-B | 0.2 微升 | 1 微升 | 5 微升 | |
| 环球-A | 0.2 微升 | 1 微升 | 5 微升 | |
| 将 DNA-脂质体复合物逐滴加入细胞中并轻轻混匀。 | DNA-脂质体复合物 | 10 μL | 50 μL | 250 微升 |
【注】表中用量仅供参考，具体DNA与Universal-B溶液用量需根据细胞种类及其他实验条件优化，建议比例保持在1:0.5-1:5之间。
（1）问：制备核酸转染试剂复合物时可以存在血清吗？
A：血清的存在会影响脂质体的形成，建议在制备核酸转染试剂复合物时使用无血清培养基（一般为MEM培养基）。
（2）问：转染试剂可以冷冻吗？
答：本试剂需保存于2-8℃，且应避免反复、长时间开盖，长期开盖会导致脂质体氧化，影响转染效率。
（3）问：使用Hieff Trans™通用转染试剂时应注意什么？
A：1）转染操作时，细胞汇合度达到70%-90%为佳，具体接种密度根据细胞情况决定。
2)转染复合物的制备需要在无血清培养基中稀释DNA和转染试剂。
3)转染时培养基中不能添加抗生素。
4）使用高纯度的DNA或RNA有助于获得更高的转染效率，质粒中的内毒素是转染的大敌。
5）保存于2-8℃，注意不要长时间反复打开盖子。
6)首次使用时应优化核酸浓度和试剂体积，以获得最高的转染效率。
（4）转染后需要终止吗？
A：不需要。转染后无需除去核酸-转染试剂复合物或更换新鲜培养基，也可根据细胞的营养状况在4-6小时后更换新鲜培养基。
（5）转染试剂可以用于病毒载体包装的转染吗？
答：是的。病毒载体包装效率与转染效率并不一定相关，还与包装质粒的选择以及质粒之间的配比有关。
付款和安全
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