細胞培養是許多研究應用的基石,從藥物開發到基因治療。然而,如果沒有正確的方法和工具,維持健康、增殖的文化可能會很困難。無論您是經驗豐富的科學家還是細胞培養的新手,優化流程的每個步驟都會產生很大的不同。在本指南中,我們將向您介紹五個重要技巧,以確保您的細胞培養蓬勃發展,從消化到預防污染。
1. 完善細胞消化
細胞消化是細胞培養實驗中的關鍵步驟,有助於細胞從培養表面脫落並分離成單細胞懸浮液,以便進行傳代培養和後續分析。選擇合適的消化酵素可以提高細胞分離效率,減少細胞損傷,確保實驗順利進行。為了幫助您選擇最適合您需求的消化酶,我們編制了幾種常用酶產品及其特性的指南。您可以根據細胞類型、實驗要求和下游應用選擇最合適的產品。
常見的消化酶
- 胰蛋白酶(用於水解細胞間蛋白質)
- 重組胰蛋白酶(不含動物源污染,適用於生物製藥應用)
- 膠原蛋白酶(用於降解膠原纖維,適合組織消化)
- 複合胰蛋白酶(如 Accutase,可以更好地保存細胞表面抗原)
- 胰蛋白酶替代品(如 TrypLE™,非常適合無血清細胞培養)
- Dispase II(用於分離各種組織和細胞)。
每種酵素都有其獨特的應用和優勢,選擇正確的酵素可以顯著提高實驗效率和結果品質。
產品名稱 | 貓號 | 規格 |
效能™l 胰蛋白酶-EDTA (0.25%), 不 酚紅 | 40123ES60 | 100 毫升 |
性能單元™ 胰蛋白酶-無EDTA(0.25%),無酚紅 | 40124ES60 | 100 毫升 |
性能單元™ 胰蛋白酶 (0.25%)、酚紅 | 40126ES60 | 100 毫升 |
性能單元™ 胰蛋白酶-EDTA (0。25%)、酚紅 | 40127ES60 | 100 毫升 |
胰蛋白酶1:250(粉末) | 40101ES25 | 25 克 |
性能單元™ 重組胰蛋白酶(粉末) | 40512ES10/60 | 10 毫克/100 毫克 |
20416ES60 | 100 μ克 | |
PerfCel Tryzyme™ Express 酵素 (1X),酚紅 | 40134ES60 | 100 毫升 |
PerfCel Tryzyme™ 快速酵素 (1X), 不 酚紅 | 40135ES60 | 100 毫升 |
ACCUTASE 細胞解離溶液 | 40506ES60 | 100 毫升 |
分散酵素Ⅱ | 40104ES60/80 | 100毫克/1克 |
2. 創造理想的培養環境
健康的文化始於適當的環境。這包括適合您的細胞類型的溫度、pH 值和最佳培養基。
無血清細胞培養 已成為生物研究中的關鍵技術,確保可重複性、一致性和道德標準。 傳統細胞培養依賴胎牛血清(FBS),這帶來了實驗結果的多變性和動物來源的倫理風險。為了應對這些挑戰,越來越多的研究人員選擇無血清培養基。
在免疫學研究中, 淋巴球培養 發揮著至關重要的作用,尤其是在免疫反應、疫苗開發和癌症免疫治療領域。作為免疫系統的核心組成部分,淋巴細胞需要特定的培養條件才能在體外增殖和活化。
此外, 類器官培養 代表了細胞培養技術的另一個重要進步。類器官是能夠在體外模擬人體組織和器官功能的三維細胞結構,為疾病建模、藥物篩選和再生醫學提供了新的研究平台。類器官的三維結構更能複製了人體器官的複雜性和生理功能,成為研究器官發育、疾病機制和治療反應的重要工具。
產品名稱 | 貓號 | 規格 |
CelCulSF™ 昆蟲細胞培養基(無血清) | 40140ES | 1000 毫升 |
CelCulSF™ 293 細胞培養基(無血清) | 40141ES | 1000 毫升 |
CelCulSF™淋巴球培養基(無血清) | 40142ES | 1000 毫升 |
CelCulSF™雜交瘤細胞培養基(無血清) | 40143ES | 1000 毫升 |
CelCulSF 間質幹細胞(碩士)培養基(無血清) | 40144ES | 500 毫升 |
CelCulSF™ 貼壁細胞培養基(血清還原) | 40145ES | 1000 毫升 |
思博瑞® 腸道類器官生長培養基(小鼠) | 41426ES60/76 | 100/500毫升 |
思博瑞® 腸癌類器官生長培養基(人類) | 41427ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
思博瑞® 胃癌類器官生長培養基(人類) | 41428ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
思博瑞® 肝癌類器官生長培養基(人類) | 41429ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
思博瑞® 乳癌類器官生長培養基(人類) | 41430ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
思博瑞® 肺癌類器官生長培養基(人) | 41431ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
思博瑞® 食道 癌症類器官生長培養基(人類) | 41432ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
思博瑞® 卵巢癌類器官生長培養基(人類) | 41433ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
Cebrary® 胰臟癌類器官生長培養基(人類) | 41434ES50/60/76 | 50/100/500 毫升 |
3.高效轉染,實現高品質基因表達
細胞轉染是生物醫學研究中的關鍵技術,可將外源核酸(如 DNA、mRNA、siRNA 和 miRNA)引入細胞進行基因表現、沉默或功能研究。由於細胞類型和核酸多種多樣,選擇正確的轉染試劑對於實驗的成功至關重要。
化學轉染試劑,包括 脂質體、聚乙烯亞胺和磷酸鈣基配方,各有其獨特的優勢。
貓號 | 產品名稱 | 核酸 | 應用 |
40802ES | 脫氧核糖核酸 | 高效脂質體轉染試劑 | |
40804ES | 路威酩軒 | 增強慢病毒感染能力。 | |
40806ES | siRNA、miRNA、反義寡核苷酸 | 具有高敲低效率的 siRNA 和 miRNA 特異性轉染試劑。 | |
40808ES | DNA、siRNA、miRNA | 升級版的脂質體轉染試劑,可對多種細胞類型進行DNA和RNA轉染,對難以轉染的細胞仍能表現出良好的效果。 | |
40809ES | 信差核糖核酸 | mRNA特異性轉染試劑,在多種細胞類型中具有高轉染效率。 | |
40815ES | 脫氧核糖核酸 | 廣泛適用於蛋白質表現和病毒包裝(粉末形式)。 | |
40816ES | 脫氧核糖核酸 | ||
40820ES | 脫氧核糖核酸 | 專用於病毒包裝的轉染試劑,能夠實現更高的 AAV 和 LV 病毒包裝產量 | |
40821ES | 脫氧核糖核酸 | ||
40823ES | 脫氧核糖核酸 | 最高的轉染效率。特別適合懸浮培養生產AAV,產量較高。 |
4. 冷凍保存細胞以供長期使用
細胞冷凍是長期保存細胞的關鍵技術,具有防止污染、維持實驗一致性、方便運輸、建立細胞庫等作用。冷凍期間的主要風險包括 冰晶形成和溶液損害。為了降低這些風險,採用慢速冷凍和快速解凍方案至關重要。甘油或二甲基亞砜(DMSO)等冷凍保護劑通常用於減少冰晶形成和滲透壓。
產品名稱 | 貓號 | 規格 |
哺乳動物細胞儲存冷凍 | 40128ES50 | 5×10毫升 |
哺乳動物細胞儲存冷凍 | 40128ES60 | 100 毫升 |
昆蟲細胞冷凍保存 | 40129ES50 | 5×10毫升 |
昆蟲細胞冷凍保存 | 40129ES60 | 100 毫升 |
無血清細胞冷凍培養基 | 40151ES | 50 毫升/100 毫升 |
無血清細胞冷凍培養基(不含DMSO) | 40152ES | 100 毫升 |
無血清細胞冷凍培養基(用於幹細胞) | 40153ES | 100 毫升 |
無血清細胞冷凍培養基(適用於幹細胞,不含 DMSO) | 40154ES | 100 毫升 |
5. 預防污染,確保培養物健康
污染是細胞培養中常見的問題,常常導致結果受損並浪費研究時間。認識各種類型的污染對於有效預防和補救至關重要。
普通單元 污染物
- 細菌
- 真菌
- 支原體
- 原生動物
- 黑色斑點
- 病毒
- 跨物種
預防措施包括使用抗生素、定期消毒設備、遵守無菌技術和保持工作區域清潔。一旦檢測到污染,通常建議丟棄受影響的培養物,除非它們稀有或有價值;在這種情況下,應採取措施消除污染物。建議建立備用細胞系或取得新的培養物。在某些情況下,針對特定污染物的專門處理可能有助於恢復細胞培養。維持適當的衛生、確保設備嚴格分離以及維持無菌環境對於防止污染和確保細胞培養實驗成功至關重要。
類型 | 產品名稱 | 貓號 | 規格 |
抗菌 | 青黴素-鏈黴素 (100×), 適用於細胞培養 | 60162ES76 | 100 毫升 |
60230ES07/60 | 3.2/100克 | ||
慶大霉素硫酸鹽 | 60214ES03/08/25 | 1/5/25 克 | |
甲硝唑 | 60223ES25/60 | 25/100毫克 | |
抗真菌 | 兩性黴素B | 60238ES01/03 | 100毫克/1克 |
制黴菌素 | 60219ES08 | 5 克 | |
60231ES03/08 | 1/5毫克 | ||
支原體檢測 | 40601ES10/20 | 10 /20 次檢測 | |
40612ES25/60 | 25/100噸 | ||
支原體移除 | 麥克拉威™ 噴霧(即用型) | 40605ES02/03/08 | 1/2/10×500 毫升 |
40607ES03/08 | 1/5 毫升 | ||
40608ES03/08 | 1/5 毫升 | ||
40609ES60 | 100 毫升 | ||
40610ES60 | 100 毫升 |
結論
優化細胞培養過程對於產生可靠、可重複的結果至關重要。從選擇正確的消化酵素到防止污染,工作流程中的每一步都很重要。透過採用來自
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