近年來隨著分子生物學技術的快速發展, 基於核酸的診斷方法已被廣泛建立並廣泛應用於人類疾病的實驗室檢測。與其他核酸擴增技術相比,等溫擴增具有快速、高效、特異性的優點,且不需要專門的設備。因此,自其出現以來,就被許多學者視為一種可能與PCR相媲美的檢測方法。

因此,相信基於等溫擴增技術的診斷儀器和試劑盒的開發和應用將會為分子診斷中的即時診斷(POCT)帶來新的方向。

主流等溫擴增技術原理介紹

1.環介導等溫擴增

(LAMP)技術

原則:環介導等溫擴增 (LAMP) 利用具有鏈置換活性的 Bst DNA 聚合酶。針對目標基因的6個區域設計4種特異性引子,可在等溫條件下對目標序列進行高效率、快速、特異的擴增。擴增可在60-65℃恆溫條件下進行,15-60分鐘內可達到10個核酸擴增9 至 1010 次即可實現。

優點及應用:由於 反應迅速、特異性強、設備簡單易操作、結果易於解釋等溫擴增技術已用於檢測 致病細菌、寄生蟲、病毒、疾病和基因改造產品。預計其也將廣泛應用於臨床傳染病診斷、環境監測、食品安全等領域。它已成為分子即時診斷檢測的理想方法(即時檢驗) 平台。

分類:LAMP檢測方法分為幾種類型,包括比濁法、pH指示劑法、螢光染料法(如NHB、鈣黃綠素、SYBR Green、Syto等)和螢光探針法。

2、重組酶聚合酶擴增(RPA)技術

原則:重組酶與引子結合時會形成蛋白質-DNA複合物,可在雙股DNA內尋找同源序列。一旦引子找到同源序列,就會發生鏈交換反應,導致 DNA 合成的形成和啟動,從而呈指數級擴增模板上的目標區域。移位的 DNA 鏈與單股結合 (SSB) 蛋白結合,以防止進一步移位。在這個系統中,合成事件由兩個相反的引子啟動,主要依賴重組酶、Bsu 酶和 SSB 蛋白的活性。該技術可在37至42°C的溫度範圍內,在10至30分鐘內實現目標目標的快速檢測。

優點及應用:RPA 擁有 靈敏度高,特異性強,對專業設備的依賴性低,以及整合各種檢測格式的能力。它特別適合基層和現場環境下的即時檢驗。 RPA可廣泛應用於體外診斷、動物疾病、食品安全、生物安全、農業等領域。

分類:RPA 檢測方法分為幾種類型,包括凝膠電泳法、EXO 探針法、Fpg 探針法、側流試紙 (LF-RPA)、絮凝分析等。

產品性能展示

01 pH敏感染料RT-LAMP試劑

pH敏感染料RT-LAMP採用視覺染料作為敏感指示劑,在60-65℃等溫條件下,利用恆溫水浴或標準PCR儀完成一步法RNA核酸擴增。只需30分鐘,透過反應後的顏色變化即可判斷是否有病原體感染,結果更直觀(陽性為橙黃色,陰性為洋紅色)。此方法適合對大量人群進行快速檢測。

推薦產品:

RT-LAMP pH敏感染料試劑盒(13906ES)
RT-LAMP pH敏感染料顯色版凍乾試劑盒(13920ES)

業績展示:

02 螢光染料 RT-LAMP 試劑

螢光染料法RT-LAMP使用螢光染料(如SYBR Green、Syto等)作為螢光標記物。在擴增反應中與雙股DNA結合後,螢光訊號增強800-1000倍。使用螢光定量PCR儀,在60-65℃的恆溫條件下進行檢測,約30分鐘後可依擴增結果判斷是否有病原體感染。此方法還可與微流控晶片或可攜式檢測儀結合進行快速檢測。

推薦產品:

RT-LAMP染料測定試劑盒(UDGplus)(13762ES)

業績展示:

1.RT-LAMP/RPA 混合物選擇指南

    產品分類

    RT-LAMP 混合

    RPA 組合

    產品名稱

    RT-LAMP 染料測定試劑盒(UDG plus)

    RT-LAMP pH 敏感染料試劑盒

    RT-LAMP pH敏感染料顯色版可冷凍乾燥套件

    快速保險絲擴大機

    產品編號

    13762ES

    13906ES

    13920ES

    16702ES

    產品類別

    螢光染料

    pH敏感染料

    pH敏感染料

    探測

    產品組件

    2 個組件

    緩衝液、酵素混合物

    3 個組件

    緩衝液、RT酶、Bst酶

    4 個組件

    緩衝液、RT酶、Bst酶、冷凍乾燥保護劑

    4 個組件

    緩衝液、酵素混合物、醋酸鎂

    支持冷凍乾燥

    是的,不含凍乾保護劑

    是的,含有凍乾保護劑

    2.LAMP/RT-LAMP 酵素選擇指南

    產品分類

    Bst 酶

    逆轉錄酶

    UDG 酶

    產品名稱

    必勝客

    凍乾 Bst Plus

    Ⅲ 逆轉錄酶

    III 逆轉錄酶,

    不含甘油

    聯合發展集團

    UDG,不含甘油

    產品編號

    14402ES

    14405ES

    11111ES

    11297ES

    14455ES

    14001ES

    酵素活性

    40單位/微升

    60單位/微升

    200單位/微升

    600單位/微升

    1單位/微升

    1單位/微升

    產品組件

    3 個組件

    2 個組件

    2 個組件

    單組分

    單身的-

    成分

    單組分

    支持冷凍乾燥

    是的

    是的

    是的

    3、RPA酶選擇指南

    產品分類

    北蘇

    T4X

    T4是

    單邊帶

    CK

    EXO

    產品名稱

    北蘇

    T4 紫外線

    T4 紫外線

    GP32

    肌酸激酶

    外切酶III

    產品編號

    11078ES

    11079ES

    11080ES

    11081ES

    14502ES

    14525ES

    酵素活性

    5單位/微升

    2微克/微升

    2微克/微升

    5微克/微升

    2微克/微升

    100單位/微升

    產品組件

    單組分

    單組分

    單組分

    單組分

    單組分

    2 個組件

    支持冷凍乾燥

    詢問