----背景清晰,條帶形態穩定,尺寸精確

DNA 標記是不同分子量的 DNA 片段的組合。它們的主要用途是在瓊脂糖凝膠電泳中與樣本 DNA 一起遷移以分離 DNA 分子。透過比較樣品條帶的大小和亮度與 DNA Marker 的條帶,可以粗略地估計溶液中樣品 DNA 的分子量和濃度。 Yeasen DNA Marker的分子量範圍從100 bp到15 kb,可以滿足大多數實驗的需求。

產品特性

  1. 穩定性強,常溫下可保存3-6個月;
  2. 背景清晰、條帶形態穩定、尺寸精確;
  3. 含有已知濃度的參考帶,方便定位和半定量分析;
  4. 含上樣緩衝液,可直接電泳,方便快速;
  5. 附5×上樣緩衝液,用於上樣。

電泳圖

注意事項

  1. 儲藏方式:常溫穩定保存3~6個月;如需長期保存,請儲存在 4°C 或 -20°C 下。
  2. DNA Marker 適用於分析瓊脂糖凝膠電泳中的 DNA 帶,不建議用於聚丙烯醯胺凝膠電泳。
  3. 凝膠濃度及緩衝溶液的選擇:

瓊脂糖濃度

有效分離範圍 (bp)

推薦緩衝液

0.5%

2,000-50,000

1×TAE

0.8%

800-10,000

1×TAE

1.0%

400-8,000

1×TAE

1.2%

300-7,000

1×TAE

1.5%

200-3,000

1×TAE/0.5×TBE

2.0%

100-2,000

1×TAE/0.5×TBE

3.0%

25-1,000

0.5×TBE

【注意】:對於大片段,請選擇低濃度凝膠並使用TAE緩衝體系進行電泳;對於小片段,選擇高濃度凝膠並使用TBE緩衝系統進行電泳。

  1. 核酸染料的選擇:

EB(溴化乙錠)是一種高靈敏度的螢光染料,最大激發波長為302nm,可用於觀察瓊脂糖和聚丙烯醯胺凝膠中的核酸。 EB 會插入核酸中的鹼基中,並且具有毒性。

YeaRed(Cat#10202ES76)和YeaGreen(Cat#10204ES76)是新型無毒核酸染料,具有獨特的油性分子結構,無法穿透細胞膜進入細胞,不易揮發和昇華,因而不會被人體吸入,保證了實驗者的安全。Ames試驗結果也表明,YeaRed和YeaGreen在凝膠染色濃度下不具有致突變性,是高致癌性EB的安全無毒替代品。此外,YeaRed具有與EB相同的光譜特性,因此可以在不改變現有成像系統的情況下完美取代EB。

問答

Q1: 為什麼DNA Marker的高分子量條帶會拖沓,分離不好?

A1:核酸染料與 DNA Marker 結合不夠。由於高分子量條帶需要更多的核酸染料,如果染料未飽和,高分子量條帶更容易受到遷移效應的影響,導致拖曳和分離不良。建議減少DNA Marker的使用量(可用水稀釋5倍後再上樣8-10μL)或提高核酸染料的濃度。

Q2:為什麼 DNA 沒有條帶或條帶很弱?

答案2:

  1. DNA上樣量不足,增加上樣量;
  2. DNA 帶已從凝膠中流出;
  3. DNA 帶被示蹤染料遮蔽;
  4. 凝膠中未添加核酸染料;
  5. 瓊脂糖凝膠放置時間過長,建議立即準備使用。

Q3: 為什麼DNA Marker帶是彌散的?

答案3:

  1. DNA部分降解,檢查儲存條件是否過熱;
  2. 電泳時電壓太低,造成DNA條帶擴散。建議在 110V-130 下運行凝膠 五 超過45分鐘;
  3. 瓊脂糖凝膠濃度不合適,依說明書建議凝膠濃度製備;
  4. 瓊脂糖凝膠品質差,建議重新製備瓊脂糖凝膠。

問題 4:為什麼樣本條帶與 DNA Marker 條帶相比大小不同?

A4:

  1. DNA的遷移不僅與實際尺寸有關,也與是否與蛋白質、離子狀態、DNA結構、凝膠等因素結合有關。核酸的電泳遷移率與DNA/染料的配比有關,當核酸染料的量不足時,會導致較大的遷移率誤差;
  2. 如果樣品中含有較高濃度的鹽離子,也會造成明顯的遷移誤差;
  3. 如果上樣樣本的量與 DNA Marker 帶的數量有顯著差異或體積有顯著差異,也會導致更大的遷移誤差。

訂購資訊

產品定位

產品名稱

產品編號

規格

DNA 標記

GoldBand DL2000 DNA 標記

10501ES60/80

100 噸/10×100噸

GoldBand DL5000 DNA 標記

10504ES60/80

100 噸/10×100噸

GoldBand 100bp DNA 梯狀圖

10507ES60/80

100 噸/10×100噸

GoldBand 1 kb DNA 梯狀圖

10510ES60/80

100 噸/10×100噸

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