蛋白質電泳是一種蛋白質分析技術。蛋白質在緩衝液中帶負電或正電，並在電場中移動到​​陽極，稱為電泳。不同的蛋白質分子有不同的電泳遷移率。蛋白質電泳的一個非常重要的環節是凝膠製備。傳統的凝膠製備往往需要幾個小時的時間，並且還存在液體洩漏、凝膠不均勻以及氣泡等問題。除了配製麻煩之外，原料試劑還會有一定的毒性，對點膠人員的身體造成傷害，而預製膠的出現可以解決這些煩惱。那麼蛋白質電泳的基本原理是什麼，預製膠的作用和原理又是什麼呢？

1.蛋白質電泳的基本原理是什麼？
2.預製膠的作用及原理是什麼？
3. 提供的預製膠介紹 Yeasen
4. 常見問題
5. 產品詳情

1.蛋白質電泳的基本原理是什麼？

大多數生物大分子，如蛋白質和核酸，都具有陽離子和陰離子基團，稱為兩性離子。把粒子分散於溶液中，以澱粉凝膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯醯胺凝膠等為支持介質的區帶電泳法稱為凝膠電泳。聚丙烯醯胺凝膠電泳是以聚丙烯醯胺凝膠為支撐物的電泳方法。人們認為，控制聚丙烯醯胺凝膠的孔徑大小進行聚合，透過類似分子篩的作用來實現蛋白質的分離。

蛋白質電泳包括兩種形式，非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳（Native-PAGE）和十二烷基硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳（SDS-PAGE）。 Native-PAGE 可在電泳過程中保持蛋白質的完整性，並根據其分子量、形狀和伴隨電荷進行梯度分離。另一方面，SDS-PAGE 根據蛋白質亞基的分子量分離蛋白質。 SDS 是一種陰離子清潔劑。作為變性劑和增溶劑，能斷裂分子內和分子間氫鍵，使分子折疊，破壞蛋白質分子的二級和三級結構。巰基乙醇、二硫蘇糖醇作為強還原劑，可以斷裂半胱胺酸殘基之間的二硫鍵。在樣品和凝膠中加入還原劑和SDS後，分子解聚為多肽鏈，解聚的胺基酸側鏈與SDS結合形成蛋白質-SDS膠束。蛋白質-SDS膠束所帶的負電荷超過了蛋白質原有的電荷，消除了不同分子之間的電荷差異和結構差異。蛋白質的遷移率僅取決於蛋白質的分子量，透過與已知分子量的標準進行比較，即可確定蛋白質的分子量。

2.預製膠的作用及原理是什麼？

與傳統手工凝膠相比，預製蛋白凝膠 可避免接觸大量有毒試劑，節省大量時間，有效解決手灌凝膠差異大的問題。

此凝膠由兩層不同的凝膠層組成，上層為濃縮膠，下層為分離膠。濃縮膠又稱濃縮凝膠。凝膠濃度較小，孔徑較大。樣品被添加到濃縮凝膠中，並通過大孔徑凝膠的遷移集中在一個狹窄的區域。分離膠又稱電泳膠，通常孔徑較小，選擇適當的凝膠濃度可以使樣品成分得到良好的分離。

分離膠可分為固定膠和梯度膠。聚丙烯醯胺的濃度有8%、10%、12%、15%、4%～12%、4%～20%。前四種為固定濃度的預製凝膠，後兩種為梯度凝膠。濃度代表分離蛋白質的分子量範圍。凝膠梯度是由梯度混合器形成的。在玻璃板中加入高濃度的丙烯醯胺溶液，然後溶液的濃度呈梯度降低，凝膠的孔徑頂部較大，底部較小。固定膠只能分離其分離範圍內的蛋白質，不能太大，也不能太小。梯度凝膠沒有這種限制，大分子分離在頂部，小分子分離在底部。由於梯度膠的孔徑逐漸變小，對靠近蛋白質無法穿透的孔徑的蛋白質有濃縮作用，所以電泳後會形成一個很窄的區域。分子量差異較小的蛋白質通常無法在固定凝膠上分離，但可以在梯度凝膠上分離。

3. 提供的預製膠介紹 Yeasen

Yeasen 預製蛋白加凝膠 包含 梯度濃度和固定濃度，多種不同濃度可滿足不同蛋白質電泳的需求。採用獨特的凝膠製備工藝製備而成，具有優異的電泳效果。與市面上各類電泳槽相容（Bio-RAD、Tanon、Life等），具有適應性廣、解析度高、穩定性高、條帶清晰均勻等優點。

3.1 Yeasen 預製蛋白加凝膠 升級為塑膠板，品質更好！

易於使用：隨時可用；撕掉塑膠板底部的膠帶

適用範圍廣：相容變性蛋白質和天然蛋白質

清晰頻段： 塑膠板經過特殊處理，大大減少了蛋白質的吸附

節省時間： 實驗最快18分鐘即可完成

品質保證： 嚴格的批次間穩定性保證

保存期限長：可在4℃保存 12個月

3.2 以下參數可協助您選擇合適的凝膠系列

電泳緩衝體系： 變性蛋白電泳緩衝液或天然蛋白質電泳緩衝液

孔數及上樣量：10或15孔，最大上樣量分別為70 μL和40 μL

凝膠濃度：8%、10%、12%、15%、4%-12%、4%-20%

表 1.凝膠濃度和線性分離範圍

3.3 數據顯示

圖1 數據顯示

圖2 數據顯示

4. 常見問題

問題 1：預製件必須 凝膠 放置於4℃？將其在室溫下放置一會兒有關係嗎？

一個： 建議4℃，可保存12個月。請勿在0℃以下保存，可在室溫（25℃）下保存30天。

Q2：梯度濃度與固定濃度如何選擇？預製棒分離的蛋白質的最小分子量是多少 凝膠？

答：蛋白質分離粒徑大小由預製 凝膠 與其濃度有關，對應的分離範圍如上圖所示。

固定濃度預製 凝膠 具有更好的分辨率。梯度濃度預製 凝膠 具有更寬的分離範圍和更廣泛的應用範圍；顧客 應根據自己的需求選擇合適的濃度。

我們的 4%-20% 梯度預製件 凝膠 （Cat#36250、Cat#36256）對低至 3.5kDa 的蛋白質具有很寬的分離範圍。

圖 3. 梯度預製 凝膠數據

問題 3：預製 凝膠 必須配備特殊的緩衝器嗎？你能製作緩衝區嗎？

一個： Yeasen 特殊緩衝液（Cat#36236、Cat#36237）和預製 凝膠適用性較好。不要與其他緩衝液混合。緩衝液可以透過購買試劑來製備，但客戶 需要使用我們的公式，可以在相關的預製件中找到 凝膠說明。

Q4：分離膠如何區分 和濃縮凝膠？分段電壓電泳有必要嗎？

答：兩種成分相同，但濃度不一樣，肉眼無法區分；濃縮膠高度為1.5公分。

不是，建議在150V下進行電泳，完成實驗需要30-40分鐘。

Q5：您的預製件 凝膠適合於市面上各種電泳槽嗎？

答：Yeasen，我們的預製件 凝膠 適用於市面上各種電泳槽，

Bio-rad Mini-Protean（II/3/Tetra System）與 Tanon VE180（注意密封條的反向組裝）；

Life Technology Novex Mini-cell（與特殊擋板搭配使用）；

另設凝膠板寬度在10 cm電泳槽內。

5. 產品詳情

提供的產品 Yeasen 如下：

表 2.商品詳情