隨著糖蛋白質體學和抗體藥物研究的快速發展，糖基化修飾也受到廣泛關注。細胞與細胞、細胞與病原體之間的接觸主要透過糖和蛋白質的相互作用來完成，而糖基化決定了糖複合物的黏附性質。在 IgG 中，Fc 區 Asn297 處保守的 N 連接糖基化對其活性也至關重要。此外，部分抗體還具有額外的N-糖鏈，這些糖鏈與Fc區Asn297處的保守位點一起影響抗體的辨識、半衰期和免疫反應。
蛋白質糖基化是一種複雜的翻譯後修飾，涉及蛋白質特定位點的糖鏈連接。依糖鏈類型不同，糖蛋白分為N連接糖蛋白、O連接糖蛋白等；另外，蛋白質糖基化也受到宿主細胞類型和發酵條件（如培養基、pH值、溫度等）的影響。因此，糖蛋白通常具有糖基化模式的異質性，包括糖基化位點、糖基化水平以及糖鏈的具體結構，使糖鏈分析和結構表徵工作極具挑戰性。為了獲得最大量的糖鏈結構訊息，糖鏈分析的主要策略是首先從蛋白質中釋放出糖鏈，然後進行詳細的分析和表徵。在該策略中，高效、準確、穩定的去糖基化方法至關重要。
目前，酵素法被廣泛用於去糖基化。 對於N-連接聚醣，常用的酵素包括PNGase F，Endo H，和Endo S。
產品介紹
PNG酶F 是去除幾乎所有N-連接 糖蛋白中的寡糖，可裂解由天門冬胺酸連接的高甘露糖、混合糖、複合糖蛋白，特別是去除N連接的聚醣。酵素切位點為：最內層的N-乙醯葡萄糖胺（GlcNAc）與天門冬胺酸殘基之間的醯胺鍵，而酵素解後將蛋白質上的天門冬胺酸轉化為天門冬胺酸。
當α1-6岩藻糖位於GlcNAc核心時，PNGase F也能進行切割；只有當α1-3岩藻糖位於GlcNAc核心（常見於植物和昆蟲糖蛋白中）時，PNGase F才無法切割。
我們公司提供 傳統的 PNGase F（目錄號：20407ES），然而常規的PNGase F酶促反應需要數小時才能釋放抗體的N-糖，並且由於對糖釋放的偏好性，去糖基化不完全可能導致結果出現偏差，所得到的糖分佈可能無法代表治療性抗體的正確組成。因此，盡快獲得準確的N-糖譜對於抗體、抗體融合蛋白和其他生物療法藥物生產過程中的糖基化監測至關重要。
快速 PNGase F （編號：20406ES） 是一種優化的重組試劑，可以在幾分鐘內快速、徹底地對抗體、免疫球蛋白、融合蛋白和其他糖蛋白進行去糖基化。此酵素可以快速、無偏好地去除所有N-糖，可直接用於下游色譜或質譜分析。
產品特性：
快速地： 幾分鐘內完成並快速去糖基化。
高純度： 無蛋白酶、糖苷酶污染，純度≥95%。
非選擇性： 快速且無偏好地去除所有 N-聚醣。
良好的兼容性： 直接用於下游色譜或質譜分析。
遠藤 是一種重組糖苷酶，可以裂解N-糖蛋白中的高甘露糖和一些混合寡糖的殼二糖核心結構，去除糖蛋白中的N-連接的高甘露糖。
本公司目前提供酵母重組表現的Endo H(Cat#20414ES)。
Endo S 是一種高度特異性的糖苷酶，可以切割野生型 IgG 重鏈殼二糖核心結構之間的 N 連接糖。糖苷酶S的活性並非嚴格依賴勝肽，因此X可以是蛋白質、勝肽、天門冬胺酸或遊離寡糖。無論底物上是否存在核心 α1-6 岩藻糖或二等分 N-乙醯葡萄糖胺，糖苷酶 S 都具有活性。然而，它對三或四天線唾液酸化和脫唾液酸化的寡糖無活性。
本公司目前提供大腸桿菌重組表現的Endo S(Cat#20413ES)。
購買指南
| 產品編號 | 20406ES | 20407ES | 20414ES | 20413ES |
| 產品名稱 | ||||
| 來源 | 酵母重組表達 | 酵母重組表達 | 酵母重組表達 | E.大腸桿菌 重組表達 |
| 具體活動 | 不適用 | 10萬單位/毫升 | 100萬單位/毫升 | 8000單位/毫克 |
| 切割位點 | 幾乎所有的 N 連接聚醣 | 幾乎所有的 N 連接聚醣 | N-連接高甘露糖聚醣 | 在 IgG 重鏈的核心二糖結構內進行切割 |
| 消化時間 | 10 分鐘 | 1-3小時 | 1-3小時 | 1 小時 |
| 糖基化 | 合適的 | 合適的 | 合適的 | 合適的 |
| 蛋白質結構 | 合適的 | 合適的 | 合適的 | 合適的 |
測試數據
1.快速PNGase F 測試
1：蛋白質標記物Cat#20350ES) 2：競爭物 + 底物或抗體 3：競爭物 + 底物或抗體
4：
2.Endo H 測試
圖 2. Endo H 酵素切效應 （基材）
3.Endo S 測試
產品資訊
| 產品名稱 | 產品編號 | 規格 |
| 20406ES20/50 | 20噸/50噸 | |
| 20407ES01/02 | 15000 單位 /75000 單位 | |
| 20414ES92/97 | 10000單位 /50000單位 | |
| 20413ES80/90 | 1000單位/5×1000單位 |