—無血清培養基補充劑
1.背景
人類血清白蛋白(HSA)是人體血漿中最豐富的蛋白質,是荷爾蒙、脂質和其他物質的轉運體。其主要生理功能為調節血漿pH值、維持血漿滲透壓。人類血清白蛋白是由585個胺基酸組成的單股蛋白,分子量為66.5kDa。白蛋白可以提供對細胞生長很重要的氮和必需胺基酸,並有助於維持細胞培養環境中的滲透壓平衡。此外,白蛋白還可以作為細胞附著的底物,有助於穩定pH值,甚至保護細胞免受壓力和損傷。白蛋白通常以不同的濃度添加到細胞培養基中 - 取決於細胞類型和培養應用。它也可以作為激素、維生素和其他生長因子的載體蛋白。此外,HSA 也可用作疫苗中的穩定劑和/或佐劑。
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圖 1. 人類血清白蛋白的結構 [1]
2.血清白蛋白的來源
重組人血清白蛋白 與胎牛血清(FBS)、血漿衍生白蛋白(pHSA)和牛血清白蛋白(BSA)相比,具有更高的純度和更好的批次穩定性。高品質的重組人類白蛋白不含其他雜質和非天然修飾,無任何血液傳染病毒感染風險,是細胞和組織培養領域的完美選擇。
物理化學性質 | R重組 | 電漿 |
胺基酸序列 | 相同的 | |
糖苷修飾 | 沒有任何 | |
分子量 | 66.554 (千道爾頓) | 66.550 (千道爾頓) |
等電點 | 4.8 | |
藥物結合活性 | 相似的 | |
熱穩定性 | 熔點65℃ | |
酯酶活性 | 相同的 | |
晶體結構 | 相同的 |
3.應用 R重組 年代埃魯姆 一個白蛋白
3.1.白蛋白是無血清培養基補充劑
白蛋白是許多無血清細胞培養系統的重要組成部分,例如雜交瘤細胞和中國倉鼠卵巢 (CHO) 細胞的培養系統。白蛋白可以加入細胞支架中,為細胞提供必需的營養物質和生長因子來源,促進細胞存活和增殖。人類血清白蛋白作為細胞培養基補充劑,維持用於生產單株抗體、重組蛋白和其他生物製品的細胞的生長和健康。白蛋白還可以使細胞培養環境更加穩定和可控,降低與動物源血清相關的批次間差異和污染風險。
3.2.哺乳動物細胞培養
白蛋白能結合多種生物活性物質,使其成為關鍵的運輸分子。白蛋白還能清除對細胞存活有害的活性氧。這些特性使白蛋白成為促進細胞生長和體外維持多種真核細胞的絕佳選擇。重組人類白蛋白適用於各種不同的幹細胞、原代細胞和生產細胞類型,包括免疫細胞、VERO、間質幹細胞、HEK293、二倍體細胞、CHO 和其他細胞類型。
3.3.疫苗生產和製備
HSA 是穩定疫苗的重要組成部分,為多種疫苗類型提供多種益處,包括減毒活病毒、滅活或殺死的病毒、病毒樣顆粒和次單位疫苗。 HSA 的顯著特性之一是它能夠覆蓋疏水和親水錶面,從而防止疫苗在從生產到配製再到儲存的整個生命週期中發生不良的非特異性吸附。 HSA 具有離子和疏水相互作用的結合能力,可以保護暴露的疫苗表面免受不必要的聚集和顆粒形成,否則可能會損害疫苗的功效。
3.4.體外/體內疾病診斷
HSA 是多種疾病的生物標記物,包括癌症、類風濕性關節炎、缺血、肝病、肥胖症和糖尿病。
3.5 人類血清白蛋白在幹細胞治療的應用
白蛋白長期以來一直是細胞培養基的重要組成部分。它促進多種細胞類型生長的能力已得到充分證實,包括間質幹細胞 (MSC)、胚胎幹細胞 (ESC)、誘導多能幹細胞 (iPSC) 和免疫細胞。在細胞培養中,白蛋白不僅僅是一種營養來源。它充當多功能儲存器,保護必需的金屬和其他分子實體,從而為細胞的持續生長和生存創造最佳環境。
白蛋白除了用於細胞培養外,還可用於幹細胞冷凍保存。白蛋白的表面塗層能力保證了細胞在冷凍過程中的安全。此外,白蛋白的緩衝能力可維持細胞完整性所必需的 pH 平衡,而其穩定能力可使細胞保持懸浮狀態,從而延長其在冷凍保存期間的活力。
此外,白蛋白還可作為藥物載體,延長藥物在體內的循環時間,增強藥物療效。
4.白蛋白在培養基中的作用機制
4.1 結合脂肪酸
白蛋白是血漿中99%非酯化脂肪酸(FA)的載體。白蛋白具有7個高親和力FA結合位點和20多個低親和力FA結合位點。亞麻油酸、亞麻油酸、油酸等脂肪酸不溶於水溶液,必須經由載體分子輸送到細胞。循環白蛋白通常可以攜帶1或2個遊離脂肪酸。脂肪酸的結合也有助於穩定白蛋白。作為細胞培養添加劑,白蛋白的活性部分取決於它結合並輸送給細胞的特定脂肪酸。
4.2 金屬離子的結合
金屬離子是細胞培養的必要成分。 HSA 是關鍵金屬離子 Cu 2+ 和 Zn 2+ 的關鍵轉運蛋白。此外,銅原子可以發生單價氧化還原反應,催化自由基的產生,使得銅具有細胞毒性。在體內,細胞外的銅離子與白蛋白結合,削弱了銅的潛在毒性。每個白蛋白分子都有一個高親和力的銅結合位點,當銅與該位點結合時,它不會參與自由基相關的氧化還原反應。白蛋白還可以結合其他二價陽離子,如Ca、Mg、Mn、Cd、Co和Ni。
4.3 HSA 的抗氧化特性
HSA的抗氧化活性主要歸因於四種主要金屬結合位點的氧化還原特性。遊離銅 2+,鐵 2+及其他金屬離子與氧反應生成ROS ,它還可以與H2O2相互作用產生有害的羥基自由基。另一方面,白蛋白與金屬離子的結合限制了這些離子參與 ROS 生成的能力。
在生物反應器中進行的工業規模真核細胞培養含有溶氧和遊離金屬,如鐵、銅、鈷和鎳,這些金屬會產生降解細胞膜的 ROS。添加 BSA 或 HSA 可降低 ROS 壓力,從而實現健康的細胞培養。另一方面,白蛋白與這些金屬,特別是銅、鋅、釩和硒的結合,促進細胞對這些金屬的吸收,刺激培養物生長,顯著提高真核細胞重組蛋白的產量。
4.4 結合吡哆醛
胺基酸是細胞培養基的關鍵成分。吡哆醛及其衍生物5'磷酸吡哆醛(PLP)可與胺基酸發生非酵素反應,形成席夫鹼。這些席夫鹼非常不穩定,當與金屬離子接觸時,會導致胺基酸降解和細胞生長抑制。遊離吡哆醛部分透過與白蛋白結合而被隔離,從而防止吡哆醛在體外與氨基酸反應並破壞它們。
4.5 結合核黃素
核黃素是另一種與遊離氨基酸發生反應並降解它們的因素。在水溶液中,核黃素可以與色氨酸結合形成複合物。在光照條件下,這種複合物會分解成有毒產物。白蛋白可以與核黃素及其磷酸鹽(黃素單磷酸鹽)結合併保護它們免於降解。白蛋白有一個色氨酸結合位點。
5.產品特點
無動物來源:不含動物源成分,不存在任何血液傳染病毒感染的風險。
批次均勻度高、穩定性高
應用廣泛: 可應用於不同類型細胞的培養。
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6.訂購信息
產品名稱 | 貓# | 規格 |
(植物表達,細胞培養級,凍乾粉) | 20901ES | 1克/5克/10克 |
(液體,細胞培養級) | 92618ES | 1克/5克/10克 |
重組鼠血清白蛋白,His標籤 | 92628ES | 25微克/100微克/500微克 |
重組獼猴血清白蛋白,His標籤 | 92627ES | 25微克/100微克/500微克 |
重組大鼠血清白蛋白,His標籤 | 92625ES | 25微克/100微克/500微克 |