背景
轉鐵蛋白又稱轉鐵蛋白(TRF、Tf),負責攜帶消化道吸收的鐵和紅血球降解釋放的鐵。它以三價鐵複合物(Tf-Fe3+)的形式進入骨髓,用於成熟紅血球的生成。轉鐵蛋白主要存在於血漿中。血漿中的轉鐵蛋白為身體大部分組織提供鐵,而在它無法到達的部位,則由這些組織自己合成的轉鐵蛋白在局部產生鐵的轉移。
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圖 1. 轉鐵蛋白的結構
人類的轉鐵蛋白主要在肝臟合成。它是一種單鏈糖蛋白,由位於同源的N端和C端的兩個葉組成。人類轉鐵蛋白含678個胺基酸殘基,等電點為5.9,分子量為76kD。每個轉鐵蛋白分子可以攜帶2個三價鐵離子(Fe3+)。轉鐵蛋白與鐵的相互作用3+ 取決於 pH 值。在 pH 7.4 時,轉鐵蛋白和 Fe3+ 有效結合,而在酸性 pH 下,兩者分離。
存在
全轉鐵蛋白、部分飽和轉鐵蛋白、載脂蛋白轉鐵蛋白
功能機制
轉鐵蛋白 (Tf) 透過與其受體轉鐵蛋白受體 1 (TfR1) 相互作用來結合鐵。 TfR1是一種在細胞表面表現的醣蛋白,由兩個以二硫鍵連接的同型二聚體亞基組成。在細胞表面,Tf與Fe3+相互作用形成全Tf,並與TfR1受體結合,在內吞作用下進入內體。在酸性內體環境下,Fe3+與Tf分離,STEAP3將Fe3+還原為Fe2+,經由二價金屬離子轉運蛋白1(DMT1)轉運至細胞質。然後,釋放出 Fe3+ 的 Tf 與 TfR1 形成 Tf/TfR1 複合物,並透過胞吐作用遷移回細胞表面。在細胞表面,轉鐵蛋白(Tf)與受體TfR1分離成為脫輔基Tf,然後與Fe3+重新結合參與鐵循環。整個過程完成後,Tf和TfR1被回收並進入細胞鐵吸收的下一個循環。
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圖2. 轉鐵蛋白循環機製圖[1]
轉鐵蛋白的主要功能
- 避免自由基的產生,保護細胞生長。
- 抗菌、殺菌、解毒
- 維持細胞增生和生長
- 促進細胞外鐵的儲存與運輸
轉鐵蛋白的來源
來源 | 安全 | 批次差異 | |
天然萃取的轉鐵蛋白 | 人類和牛血漿萃取物 | 安全性較差,最終產品可能含有病原體 | 轉鐵蛋白是從不同批次的人類血清或牛血清中提取的,其性能差異很大 |
重組轉鐵蛋白 | 從原核和真核細胞表達 | 安全性好,最終產品不含病原體 | 每批均以同一細胞系表達,性能穩定 |
產品特性
安全性好: 產品經過多重品質檢驗和檢測,避免了病原體的污染;
低毒性: 細胞毒性很低,對後續實驗沒有影響;
性能穩定: 每批均由同一細胞系表達,性能差異小,蛋白質純度高
操作簡便: 只需將產品添加到基底中;
廣泛適用: 可用於培養不同類型的細胞。
常問問題
Q1:無血清培養基中是否應該添加萃取的轉鐵蛋白或重組轉鐵蛋白?
答:萃取的轉鐵蛋白有安全性差、批次間差異大等缺陷。特別是將萃取的轉鐵蛋白加入無血清培養基中進行細胞培養時,可能會將人類或動物的病原體(如瘋牛症病毒、克雅氏病毒及其他未知病原體)帶入細胞,污染細胞。重組轉鐵蛋白完全避免了病原體污染的可能性,因此重組轉鐵蛋白應加入無血清培養基中。
Q2:培養基中應該添加鐵飽和(Holo)轉鐵蛋白還是載脂蛋白(Apo)轉鐵蛋白?
A:當培養基中不含鐵或鐵含量較低時,選擇添加鐵飽和的(Holo)轉鐵蛋白;當培養基中富含鐵時,選擇載脂蛋白轉鐵蛋白。
Q3:鐵飽和(Holo)轉鐵蛋白和載脂蛋白(Apo)轉鐵蛋白哪個比較好?
答:理論上無法推論兩者的效果,需要實驗測試。
Q4:無血清培養基中轉鐵蛋白的濃度為何?
答:轉鐵蛋白的濃度與細胞類型有關。具體濃度與細胞狀態、細胞濃度、實驗目的有關。一般原代細胞:5-100mg/L;中國倉鼠卵巢細胞:10-50mg/L;雜交瘤和Vero細胞:5-20mg/L
訂購資訊
產品名稱 | 產品編號 | 規格 |
40102ES60/80 | 100 毫克 | |
牛轉鐵蛋白 (HOLO) | 40103ES60/80 | 100毫克/1克 |
人類轉鐵蛋白(來源於人類血漿) | 40133ES60/76/80 | 100 毫克/500 毫克/1 克 |
92288ES60/76/80 | 100 毫克/500 毫克/1 克 | |
92289ES60/76/80 | 100毫克/5 |