-- تظهر مجموعة اختبار Yeasen TUNEL فلورسنتًا أكثر جمالًا

يعد ربط فلوريسين-dUTP بالحمض النووي المقطوع بواسطة إنزيم TdT transferase أحد أكثر الطرق شيوعًا للكشف عن موت الخلايا المبرمج، على سبيل المثال، تعتمد مجموعة In Situ Cell Death Kit من Roche على هذا المبدأ. يؤثر نشاط إنزيم TdT transferase في المنتج بشكل مباشر على كفاءة الوسم. تسعى شركة Yeasen Biologicals، التي تعتمد على إنتاج الإنزيمات، إلى تطوير منتجات عالية الجودة تعتمد على الإنزيمات، وأطلقت ثلاثة اختبارات Tunel الموسومة بالفلوريسين (Alexa Fluor 640 وAlexa Fluor 488 وFITC) لتلبية متطلبات الجودة العالية لعملائنا.

في الوقت الحالي، يستخدم هذا المنتج أكثر من 120 مجموعة بحثية ونشرت العديد من المقالات باللغة الإنجليزية في مجلات معتمدة، مثل Theranostics وEMBO Molecular Medicine.

آلية الكشف

في المرحلة المتأخرة من موت الخلايا المبرمج، تنتج كسور السلسلة المزدوجة أو كسور السلسلة المفردة في الحمض النووي الكروموسومي عددًا كبيرًا من نهايات 3-OH اللزجة، وتحت تأثير نقل الطرف الريبوزي منقوص الأكسجين (TdT)، يرتبط dUTP المسمى بالفلوريسين/الإنزيم بالطرف الثالث من الحمض النووي، بحيث يمكن إنجاز اكتشاف موت الخلايا المبرمج من خلال الكشف عن الفلورسنت، والذي يشار إليه باسم وسم الطرف النك بوساطة ديوكسي ريبونوكليوتيد ترانسفيراز الطرفي. تسمى هذه الطريقة وسم الطرف النك بوساطة ديوكسي ريبونوكليوتيد ترانسفيراز الطرفي (TUNEL)، ويظهر المبدأ في الشكل 1.

الشكل 1: مخطط تخطيطي لوسم النهايات الطرفية الوسيطة بواسطة إنزيم ديوكسي نيوكليوتيديل ترانسفيراز (TUNEL)

مميزات المنتج

  • مجموعة واسعة من التطبيقات

يمكن استخدامه في أقسام الأنسجة المغطاة بالبارافين، وقسمات الأنسجة المجمدة، والخلايا المزروعة والخلايا المعزولة من الأنسجة.

  • حساسية عالية للكشف

يمكن الكشف عن كمية صغيرة جدًا من الخلايا الميتة.

  • تداخل خلفي منخفض

نسبة الإشارة إلى الضوضاء عالية.

  • تنوع الملاحظة

مراقبة المجهر الفلوري، وكشف التدفق.

عرض البيانات

1. اختبار الخلايا الدهنية الأولية للفأر (3T3-L)

الشكل 2: الكشف عن موت الخلايا المبرمج في الخلايا الدهنية 3T3-L لدى الفئران. يمثل الصف الأول التحكم السلبي ويمثل الصف الثاني التحكم الإيجابي. كاشف الكشف: رقم المجموعة 40306 مجموعة الكشف عن موت الخلايا المبرمج (FITC) TUNEL

2. الكشف عن النفق لعينات قسم البارافين

الشكل 3: أدى عقار LY3009120 بمفرده أو بالاشتراك مع عقار Vemurafenib وObatoclax إلى تأخير ظهور سرطان الغدة الدرقية بشكل فعال في نموذج ورم الطعم تحت الجلد. IF=8.8. نوع العينة: أنسجة ورم مغلفة بالبارافين (مأخوذة من فئران عارية). كاشف الكشف: رقم المجموعة 40307 TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 488).

3. الكشف عن النفق لزحف الخلايا

الشكل 4: تأثير كبريتات الزنك على موت الخلايا البطانية في مجموعات فرعية مختلفة. نوع العينة: خلايا بطانة الأوعية الدموية البشرية (HUVEC). كاشف الكشف: رقم المجموعة 40308 مجموعة الكشف عن موت الخلايا المبرمج (Alexa Fluor 640)

4. قياس التدفق الخلوي للكشف عن موت الخلايا المبرمج

الشكل 5: يمكن لعلاج PA أن يقلل بشكل فعال من حدوث موت الخلايا المبرمج أثناء إعادة البرمجة. IF=3.7. نوع العينة: خلايا iPS. كاشف الكشف: رقم المجموعة 40307 TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 488).

الاستشهاد بالأدب

[1] Li C, Wang Q, Gu X, et al. يعمل مركب النانو المسامي المصنوع من ثاني أكسيد السيليكون والسيليكون على تعزيز الهجرة والتمايز العظمي لخلايا جذعية نخاع العظم في الفئران لتسريع التئام كسور العظام في نموذج الفئران[J].المجلة الدولية للطب النانوي، 2019، 14: 3845. (إذا كان 4.76)

[2] Miao T، Qian L، Yu F، وآخرون. التأثيرات الوقائية لهيدروكسي سافلور الأصفر على إصابات الخلايا البطانية للشرايين التاجية البشرية الناجمة عن البروتين الدهني منخفض الكثافة المؤكسد [J]. التطوير، 2019، 22: 581-589.(إذا 6.208)

[3] Wen Y, Liu G, Zhang Y, et al. MicroRNA-205 مرتبط بضعف الانتصاب الناجم عن مرض السكري من خلال تقليل تنظيم مستقبلات الأندروجين [J]. مجلة الطب الخلوي والجزيئي، 2019، 23(5): 3257-3270.(إذا 4.41)

[4] Xu T، Ding W، Ao X، وآخرون. ARC ينظم النخر المبرمج وإصابة نقص تروية عضلة القلب/إعادة التروية من خلال تثبيط فتح mPTP[J]. Redox Biology، 2019، 20: 414-426.(إذا 8.37)

[5] Li P, Hao L, Guo YY, et al. Chloroquine يثبط الالتهام الذاتي ويؤدي إلى تدهور خلل الميتوكوندريا وموت الخلايا المبرمج في الخلايا العصبية للفئران التي تعاني من نقص الأكسجين [J]. Life Sciences, 2018, 202: 70-77.(إذا 3.40)

[6] Chen H، Guan B، Chen X، وآخرون. Baicalin يخفف من تعطل حاجز الدم في الدماغ والتحول النزفية ويحسن النتائج العصبية في الفئران المصابة بالسكتة الدماغية الإقفارية مع العلاج المتأخر بـ t-PA: تورط مسار ONOO−-MMP-9 [J]. Translational Stroke Research، 2018، 9(5): 515-529.(إذا كان 4.87)

[7] Liu Q, Qian Y, Li P, et al. التأثيرات العلاجية المشتركة للكرات المجهرية متعددة الوظائف المحملة بكبريتيد النحاس المسمى باليود 131 في علاج سرطان الثدي[J]. Acta Pharmaceutica Sinica B, 2018, 8(3): 371-380.(إذا كان 6.88)

[8] Han YQ, Ming SL, Wu HT, et al. Myostatin knockout induces apoptosis in human cervical cancer cells via elevated reactive oxygen genres generation[J]. Redox Biology, 2018, 19: 412-428.(إذا كان 8.37)
[9] Wang S, Xu Y, Weng Y, et al. Astilbin aeliorates nephrotoxicity induced cisplatin through reduction oxidative stress and infections[J]. Food and Chemical Toxicology, 2018, 114: 227-236.(إذا كان 3.78)

[10] Liu L, Pang XL, Shang WJ, et al. over-expressed microRNA-181a reduce glomerular sclerosity and renal tubular epithelial injury in rats with chronic kidney disease via down-regulation of the TLR/NF-κB pathogen by binding to CRY1[J]. Molecular Medicine, 2018, 24(1): 49.(إذا 3.46)

[11] Li G, Yin Q, Ji H, et al. دراسة حول الفحص والتأثير المضاد للأورام لببتيد الربيطة الخاص بـ CD55 في خلايا سرطان عنق الرحم[J]. تصميم الأدوية وتطويرها وعلاجها، 2018، 12: 3899.(إذا 3.27)

[12] Qian Y، Wang Y، Jia F، وآخرون. نانوميسلات محكومة ببيئة الورم مع خاصية AIE لتعزيز علاج السرطان ومراقبة موت الخلايا المبرمج [J]. Biomaterials، 2019، 188: 96-106.(إذا كان 9.85)

[13] Li Z، Li D، Li Q، وآخرون. جسيمات نانوية موجهة منخفضة المناعة من الألبومين-المقترن-التاجي في الموقع للعلاج الكيميائي المستهدف للورم[J]. علم المواد الحيوية، 2018، 6(10): 2681-2693.(إذا 5.31)

[14] Liu Y, Zhi X, Hou W, et al. Gd3+-Ion-induced carbon-dots self-assembly assembles loaded with photosensitives for enhance fluorescent/MRI dual photography and antitumor therapy[J]. Nanoscale, 2018, 10(40): 19052-19063.(إذا 7.17)
[15] Liu Q, Qian Y, Li P, et al. 131 كريات مجهرية محملة بكبريتيد النحاس المسمى باليود لعلاج أورام الكبد عن طريق انسداد الشرايين الكبدية[J]. Theranostics، 2018، 8(3): 785.(إذا 8.12 )

الأسئلة الشائعة

س: ظهور علامات الفلورسنت غير المحددة؟

1) تحتوي الأنسجة/الخلايا نفسها على مستويات عالية من نشاط النوكلياز أو البوليميراز، مما قد يؤدي بسهولة إلى ظهور علامات فلورية غير محددة، مثل خلايا العضلات الملساء. والحل هو تثبيت الخلايا أو الأنسجة فورًا بعد أخذها وتثبيتها بشكل كافٍ لمنع هذه الإنزيمات من التسبب في نتائج إيجابية كاذبة.

2) يؤدي استخدام مثبتات غير مناسبة، مثل بعض المثبتات الحمضية، إلى نتائج إيجابية خاطئة. يوصى باستخدام مثبت بارافورمالدهيد محايد بنسبة 4% تم تحضيره حديثًا.

3) قد يحدث أيضًا فلورسنت غير محدد عندما يكون وقت تفاعل اختبار TUNEL طويلاً للغاية ولا يمكن إبقاء سطح الخلية أو الأنسجة رطبًا. احرص على التحكم في وقت التفاعل وتأكد من أن محلول تفاعل اختبار TUNEL يغطي العينة جيدًا.

س: هل الخلفية الفلورية عالية جدًا؟

1) الخلايا التي تنقسم وتتكاثر بمعدلات عالية، مع مستويات عالية من النسخ، تظهر أحيانًا أيضًا كسور في الحمض النووي في النواة.

2) التعرض الطويل للضوء المثير يؤدي إلى نتائج إيجابية كاذبة.

س: كفاءة وضع العلامات منخفضة؟

1) التثبيت بالإيثانول أو الميثانول يؤدي إلى انخفاض كفاءة الوسم.

2) وقت التثبيت طويل جدًا، مما يؤدي إلى درجة عالية جدًا من الارتباط المتبادل. من المستحسن تقليل وقت التثبيت.

3) قسم الأنسجة سميك للغاية، مما يجعل تأثير التثبيت غير مرضٍ، ومن الأفضل التحكم في حدود 10 ميكرومتر.

(4) إخماد الفلورسنت: سوف يتم إخماد الفلورسنت بشدة في 10 دقائق من الضوء الطبيعي. والحل هو تجنب تشغيل الضوء.

تفاصيل المنتج

اسم المنتج

رقم الصنف.

مواصفة

مجموعة الكشف عن موت الخلايا المبرمج Annexin V-FITC/7-AAD

40311ES20/50/60

20 طن/50 طن/100 طن

مجموعة الكشف عن موت الخلايا المبرمج Annexin V-FITC/PI

40302ES20/50/60

20 طن/50 طن/100 طن

مجموعة الكشف عن موت الخلايا المبرمج Annexin V-PE/7-AAD

40310ES20/50/60

20 طن/50 طن/100 طن

مجموعة الكشف عن موت الخلايا المبرمج Annexin V-EGFP/PI

40303ES20/50/60

20 طن/50 طن/100 طن

مجموعة Annexin V-YSFluor™ 488/7-AAD للكشف عن موت الخلايا المبرمج

40313ES60

100 طن

مجموعة Annexin V-YSFluor™ 488/PI للكشف عن موت الخلايا المبرمج

40305ES20/50/60

20 طن/50 طن/100 طن

مجموعة Annexin V-YSFluor™ 647/PI للكشف عن موت الخلايا المبرمج

40304ES20/50/60

20 طن/50 طن/100 طن

مجموعة Annexin V-YSFluor™ 647/7-AAD للكشف عن موت الخلايا المبرمج

40312ES20/50/60

20 طن/50 طن/100 طن

مجموعة الكشف عن موت الخلايا المبرمج TUNEL (FITC)

40306ES20/50/60

20 طن/50 طن/100 طن

مجموعة الكشف عن موت الخلايا المبرمج TUNEL (YSFluor™ 488)

40307ES20/50/60

20 طن/50 طن/100 طن

مجموعة الكشف عن موت الخلايا المبرمج TUNEL (YSFluor™ 640)

40308ES20/50/60

20 طن/50 طن/100 طن

سؤال