فيروس حمى الخنازير الأفريقية - محلول تضخيم مباشر/مزيج رئيسي كامل لتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي

حمى الخنازير الأفريقية مرض معدي حاد وشديد وشديد العدوى يسببه فيروس حمى الخنازير الأفريقية الذي يصيب الخنازير المنزلية أو الخنازير البرية. ويمكن أن تصل معدلات الإصابة به والوفيات الناجمة عنه إلى 100%، مما يعرض صناعة الخنازير العالمية للخطر بشكل خطير ويسبب خسائر اقتصادية لا يمكن حسابها. وتدرجه المنظمة العالمية لصحة الحيوان ضمن الأمراض الحيوانية التي يجب الإبلاغ عنها.

في الوقت الحاضر، لا يوجد لقاح أو علاج فعال لحمى الخنازير الأفريقية. التشخيص السريع والدقيق لحمى الخنازير الأفريقية من خلال طرق التشخيص المختبرية أمر بالغ الأهمية لمنع انتشار المرض. توصي المنظمة العالمية لصحة الحيوان باستخدام اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي كأداة رئيسية للتشخيص الروتيني لحمى الخنازير الأفريقية.

تعد شركة Yeasen شركة مصنعة تتمتع بخبرة كبيرة في مجال البحث والتطوير للمواد الخام المستخدمة في التشخيص المخبري. وفي مواجهة حمى الخنازير الأفريقية، تستجيب شركة Yeasen بشكل إيجابي وتتعاون مع العملاء لتطوير ثلاثة حلول شاملة للعملية من الاستخلاص إلى الكشف عن فيروس حمى الخنازير الأفريقية. فما هي الحلول الثلاثة؟ وما هي تطبيقات هذه الحلول؟ تابع القراءة...

الشكل 1. حلول الكشف عن حمى الخنازير الأفريقية من شركة Yeasen

الحل الأول: مزيج رئيسي من TaqMan Multiplex qPCR (UDG plus)(سؤال)

مزيج TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus) (Cat#13171) من Yeasen هو مزيج رئيسي مُحسَّن للكشف عن فيروس حمى الخنازير الأفريقية والذي يحتوي على مزيج إنزيمي وMg2+ وdNTPs ومحلول عازل. يُستخدم المزيج الرئيسي في خطوة التضخيم ويتم تكوينه كمحلول مخلوط مسبقًا عن طريق إضافة بادئات ومجسات. تم تصميم المزيج الرئيسي بعوامل يمكنها تثبيط تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل غير المحدد بشكل فعال وتحسين كفاءة التضخيم إلى 4-plex.

مميزات المنتج

👍نظام UDG المضاد للتلوث، والذي يمنع بشكل فعال خطر تلوث الهباء الجوي

👍استقرار طويل الأمد لمحلول تفاعل البوليميراز المتسلسل المختلط مسبقًا (مزيج رئيسي + بادئات + مجسات) في درجة حرارة الغرفة، مما يبسط إلى حد كبير صعوبة الكشف

👍كفاءة تضخيم عالية وإمكانية تكرار جيدة

👍مناسب للمنصات المتعددة والأنظمة المتعددة

عرض الحالة

👉استقرار طويل الأمد لمحلول تفاعل البوليميراز المتسلسل المختلط مسبقًا
تم استخدام Cat#13171 لتكوين محلول PCR المختلط مسبقًا والذي يمكن وضعه عند 37 درجة مئوية لمدة 7 أيام، وتكرار التجميد والذوبان 15 مرة في تضخيم نظام بلازميد ASF. أظهرت النتائج أن قيمة Ct وحساسية محلول PCR لم تختلف بشكل كبير بعد وضعه لمدة 7 أيام عند 37 درجة مئوية، ولم تتغير قيمة Ct بشكل كبير بعد التجميد والذوبان المتكرر 15 مرة.

الشكل 2. Cat#13171 TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)(الاستفسار) يستخدم في محلول تفاعل البوليميراز المتسلسل المختلط مسبقًا مع استقرار طويل الأمد في تضخيم نظام بلازميد ASF. قيمة 2A-Ct عند 37 درجة مئوية لمدة 0 يوم و7 أيام 2B-الحساسية عند 37 درجة مئوية لمدة 0 يوم و7 أيام 2C-الثبات بعد التجميد والذوبان 15 مرة

👉الكواشف المستقرة والقابلة للتكرار
تم اختيار أربع دفعات مختلفة من Cat#13171 لتكرار تجربة تضخيم نظام البلازميد ASFV 20 مرة. لم تكن هناك فروق كبيرة في قيم Ct، مع معامل تباين أقل من 1%.

الشكل 3.اختبار تكرار Yeasen Cat#13171

👉قابل للتطبيق على أنظمة متعددة ومنصات متعددة
تم استخدام Yeasen Cat#13171 لتضخيم البلازميدات المزدوجة لحمى الخنازير الأفريقية ASFV/ACT على منصات Bio-Rad CFX96 وABI Q5 وSlan على التوالي. ويمكن ملاحظة أن Yeasen Cat#13171 مناسب لأنواع مختلفة من الأجهزة، والبيانات موثوقة ومستقرة.

الشكل 4. نظام Bio-Rad CFX96 Real Time PCR


الشكل 5. نظام ABI Q5 Real Time PCR

الشكل 6. نظام Slan Real Time PCR

الحل الثاني:مزيج رئيسي متعدد الإرسال من نوع TaqMan qPCR

تم تحسين مزيج Yeasen Universal TaqMan multiplex qPCR الرئيسي (Cat#11211) بشكل كبير لتضخيم القوالب منخفضة التركيز بكفاءة باستخدام بوليميراز الحمض النووي Hot-Start Taq المعدل بالأجسام المضادة ومحلول متعدد الوصلات مطابق. يدعم هذا المنتج تفاعلات PCR تصل إلى 4 وصلات في أنبوب واحد وهو مثالي للتحليل الجيني وتحليل qPCR المتعدد الوصلات.

مميزات المنتج

👍يتحمل بشدة شوائب الدم، ويمكن استخدامه مع كاشف استخلاص الأحماض النووية من Yeasen Cat#13720 Nucleic Acid Release Reagent V2، وهو مثالي لـ qPCR المباشر
👍حساسية عالية للغاية تصل إلى 3 نسخ/تفاعل، مما يحسن دقة الكشف بشكل كبير
👍استقرار طويل الأمد لمحلول تفاعل البوليميراز المتسلسل المختلط مسبقًا (مزيج رئيسي + بادئات + مجسات) في درجة حرارة الغرفة، مما يبسط إلى حد كبير صعوبة الكشف

عرض الحالة

👉تحمل قوي لشوائب الدم
بالمقارنة مع المنتجات المماثلة من العلامات التجارية الأخرى، يتمتع Yeasen Cat#11211 بتحمل أعلى للمثبطات في عينات الدم. أظهرت النتائج أن Yeasen Cat#11211 يتمتع بتحمل عالٍ لـ EDTA وسيترات الصوديوم، ويمكنه تحمل 0.5% من الدم الكامل.

الشكل 7. رقم القط 11211 مزيج رئيسي متعدد الإرسال من نوع TaqMan يتم استخدام مزيج رئيسي من علامات تجارية مختلفة لمحاليل ASF qPCR المضافة إلى 3 ملي مولار EDTA (3A)، و6 ملي مولار سترات الصوديوم (3B)، و0.5% دم (3C)، على التوالي.

👉حساسية عالية جدًا لـ 3 نسخ/تفاعل

تم إجراء تضخيم بلازميد ASFV بـ 20 تكرارًا بناءً على المنتجات من علامات تجارية مختلفة. تظهر نتائج التجارب أن معدل اكتشاف منتجات Yeasen أعلى.

الشكل 8. مقارنة معدلات الكشف بين المنتجات المماثلة من علامات تجارية مختلفة (3 نسخ في النظام النهائي)

👉ثبات طويل الأمد، ثابت لمدة 7 أيام في درجة حرارة الغرفة

يمكن لمحلول تفاعل البوليميراز المتسلسل لنظام البلازميد المزدوج ASFV/ACT الحفاظ على أداء مستقر بعد 7 أيام عند 4 درجات مئوية و25 درجة مئوية و37 درجة مئوية. ويمكن ملاحظة أن قيمة Ct وقيمة الفلورسنت لم تتغير بشكل كبير.

الشكل 9. استقرار محلول تفاعل البوليميراز المتسلسل

الحل الثالث: التضخيم المتساوي الحرارة

تدعم منتجات Yeasen تقنية التضخيم المتساوي الحرارة التي تساعد على إجراء اكتشاف ASF بشكل أسرع وأكثر كفاءة. رقم القط 14402 بوليميراز الحمض النووي Hieff™ Bst Plus (40 وحدة/ميكرولتر) مشتق من بوليميراز الحمض النووي I من نوع Geobacillus sp المحب للحرارة، والذي يفتقر إلى نشاط إكسونوكلياز 5'-3'. يتمتع هذا المنتج بنشاط بوليميراز الحمض النووي 5'-3' أقوى، ونشاط إزاحة الخيوط وتحمل dUTP، وهو أكثر ملاءمة لتفاعلات التضخيم الحراري المضاد للتلوث، مثل LAMP وCPA وما إلى ذلك.

مميزات المنتج

👍كفاءة تضخيم عالية

👍تضخيم عالي الغلة

👍تحمل dUTP، يمكن استخدامه بالاشتراك مع Cat#10303 Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG)(الاستفسار)، غير قابل للتأثر بالحرارة، 1 وحدة/ميكرولتر لمنع خطر تلوث الهباء الجوي

عرض الحالة

👉بديل ممتاز لمنتجات العلامة التجارية المستوردة N*

تم إجراء عملية التضخيم باستخدام بوليميراز الحمض النووي Bst من Yeasen و N* Company على التوالي. لم يكن هناك فرق كبير في قيمة Ct وكثافة الفلورسنت بين العلامات التجارية المختلفة.

الشكل 10. منحنيات التضخيم للعلامات التجارية المختلفة

طلب المنتجات

توفر شركة Yeasen منتجات متنوعة للكشف عن فيروس حمى الخنازير الأفريقية في الحلول الثلاثة المذكورة أعلاه. المنتجات الموصوفة والمنتجات ذات الصلة مدرجة في الجدول أدناه. يرجى اختيار طريقة الكشف المناسبة والمنتجات المثلى وفقًا لاحتياجاتك.

فئة

وصف المنتج

اسم المنتج

رقم المنتج

اِستِخلاص

استخراج الخرز المغناطيسي

كاشف إطلاق الأحماض النووية V2 (الاستفسار)

13720ES

مزيج qPCR

مزيج ثابت

مزيج رئيسي لـ Hieff Unicon™ TaqMan Multiplex qPCR (UDG plus)(الاستفسار)

13171ES

حساسية عالية

مزيج رئيسي متعدد الإرسال من Hieff Unicon™ Universal TaqMan qPCR

11211ES

الإنزيم والأجسام المضادة

طق

بوليميراز الحمض النووي Hieff UNICON™ HotStart Direct Taq(الاستفسار)

10717ES

الأجسام المضادة Taq

جسم مضاد لبوليميراز الحمض النووي Hieff™ مزدوج الكتلة

31303ES

بيست

بوليميراز الحمض النووي Hieff™ Bst Plus (40 وحدة/ميكرولتر)

14402ES

بوليميراز الحمض النووي Hieff™ Bst Plus (2000 وحدة/ميكرولتر)(الاستفسار)

14403ES

يو دي جي

جليكوزيلات اليوراسيل DNA (UDG)، غير قابلة للتأثر بالحرارةالاستفسار)

10303ES

فيما يتعلق بالقراءة:

الحل الشامل من شركة Yeasen Biology للكشف عن فيروس حمى الخنازير الأفريقية

تفشي فيروس جدري القرود في جميع أنحاء العالم، ماذا يجب أن نفعل؟ - توفر شركة Yeasen المواد الخام الإنزيمية للكشف عن الفيروس

سؤال