يعتبر الحمض النووي بمثابة الأساس لجميع أبحاث البيولوجيا الجزيئية. علاوة على ذلك، فإن جودة الحمض النووي المستخرج هي أيضًا أحد العوامل الرئيسية التي تحدد نجاح أو فشل التجارب اللاحقة. عند تطوير كواشف استخلاص الحمض النووي، بالإضافة إلى المكونات الكيميائية التقليدية، يمكن لبعض الأحماض النووية أو الإنزيمات ذات الجزيئات الصغيرة تحسين كفاءة الاستخلاص بشكل كبير أو إزالة تداخل المواد غير المستهدفة وتصبح مكونات مهمة في استخلاص الحمض النووي.

حول المواد المساعدة لترسيب الأحماض النووية

الحمض النووي الريبوزي الناقل

1. مفهوم ووظيفة الحمض النووي الريبوزي الناقل

الحمض النووي الريبوزي الناقل، والمعروف أيضًا باسم مساعد ترسيب الأحماض النووية في اللغة الصينية. في عملية استخلاص الأحماض النووية، تكون أنابيب الطرد المركزي المستخدمة في الاستخلاص مصنوعة في الغالب من مادة البولي بروبيلين. توجد كهرباء ساكنة على جدار الأنبوب، والتي ستمتص الأحماض النووية. يمكن أن يساعد استخدام الحمض النووي الريبوزي الناقل في عملية الاستخلاص والتنقية الأحماض النووية على إزالة التأثير الكهروستاتيكي، وضمان امتصاص الأحماض النووية جيدًا على عمود التنقية، وتحسين كفاءة الإيلوشن، وبالتالي تحقيق استعادة الأحماض النووية في العينة قدر الإمكان.

2. أنواع شائعة من الحمض النووي الريبوزي الناقل

باعتبارها مادة مساعدة لترسيب الأحماض النووية، فإن Carrier RNA لها أنواع متعددة، مثل ملح البوتاسيوم PolyA، وإجمالي E. coli RNA، وإجمالي خميرة RNA، وtRNA، وما إلى ذلك.

3. المشاكل الشائعة في الاستخدام الحمض النووي الريبوزي الناقل

هل يمكن استخدام Carrier RNA بعد وضعه في درجة حرارة الغرفة لفترة من الوقت؟ هل يؤثر تحلل Carrier RNA على استخدامه؟ هل يؤثر Carrier RNA على التجارب اللاحقة؟
يتم إذابة الحمض النووي الريبي الحامل في مادة واقية من الحمض النووي الريبي. يكون للحمض النووي الريبي الحامل السائل تأثير ضئيل عند وضعه عند درجة حرارة 37 درجة مئوية أو درجة حرارة الغرفة لفترة قصيرة (خلال 7 أيام). في الأساس، يكون الحمض النووي الريبي الحامل عبارة عن جزء يتراوح حجمه بين 500 إلى 1000 نانوميتر. لا يؤثر التحلل الطفيف على الاستخدام العادي. بالنسبة للتطبيقات اللاحقة مثل تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي الفلوري، لا يؤثر الحمض النووي الريبي الحامل على قيمة Ct. بالنسبة للتطبيقات اللاحقة مثل الجيل التالي من التسلسل، يمكن إضافته وفقًا للاحتياجات الفعلية.

4. مقدمة المنتج الحمض النووي الريبوزي الناقل

إن حمض ياسين الناقل هو حمض نووي ريبوزي مشتق من الخميرة. لا توجد أي بقايا من إنزيمات DNase أو RNase، كما أن المحتوى المتبقي من البروتين والحمض النووي منخفض للغاية. يمكن استخدامه في تجارب مثل استخلاص الأحماض النووية الفيروسية واستخلاص الحمض النووي النزر. يمكن استخدام الأحماض النووية المستخرجة في تجارب لاحقة مثل RT-PCR وRT-qPCR. يتوفر المنتج في صيغ سائلة ومسحوقة مجففة بالتجميد للاستخدام المباشر المريح والنقل لمسافات طويلة والتخزين.

اسم المنتج	منتج رقم	مواصفة	ظروف التخزين ومدة الصلاحية
الحمض النووي الريبوزي الناقل، 6 ميكروجرام/ميكرولتر	19701ES	1 مل / 5 مل / 100 مل	يتم تخزينه في درجة حرارة تتراوح بين -25 إلى -15 درجة مئوية. مدة الصلاحية سنتان.
مسحوق الحمض النووي الريبوزي الناقل، 216 ميكروجرام/أنبوب	19703ES	1 أنبوب / 100 أنبوب / 1000 أنبوب	يتم تخزينه في درجة حرارة الغرفة. مدة الصلاحية 2 سنة.
مسحوق الحمض النووي الريبوزي الناقل، 310 ميكروجرام/أنبوب	19704ES	1 أنبوب / 100 أنبوب / 1000 أنبوب	يتم تخزينه في درجة حرارة الغرفة. مدة الصلاحية 2 سنة.

محلول الأكريلاميد الخطي

1. مفهوم ووظيفة محلول الأكريلاميد الخطي

الأكريلاميد الخطي، والمعروف أيضًا باسم الأكريلاميد الخطي (Linear Polyacrylamide، والمختصر باسم LPA)، هو مادة مساعدة في ترسيب الأحماض النووية أثناء عملية تنقية الأحماض النووية.

2. خصائص محلول الأكريلاميد الخطي

إنه ناقل محايد وليس من أصل بيولوجي، وبالتالي فهو لا يحتوي على أي تلوث محتمل بالأحماض النووية أو النوكلياز.

لن يتداخل مع قراءات A260/A280 ولن يمنع أنشطة البوليميراز والنوكلياز المقيّد.

وهو متوافق مع تطبيقات البيولوجيا الجزيئية اللاحقة الأخرى مثل تفاعل البوليميراز المتسلسل والهضم الأنزيمي.

يمكن أن يساعد في ترسيب الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين (DNA) والحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين (RNA) بمستوى بيكوجرام أو أعلى (بما في ذلك الأوليغو). يبلغ طول القطعة القابلة للاسترداد أكثر من 20 نوكليوتيدًا، ويمكن استخدام الأحماض النووية أحادية السلسلة ومزدوجة السلسلة.

3. مقدمة المنتج

اسم المنتج	منتج رقم	مواصفة	ظروف التخزين ومدة الصلاحية
محلول الأكريلاميد الخطي (5 ملغ / مل)	10408ES	1 مل	مخزنة في 4 درجة مئوية. مدة الصلاحية 3 سنين.

إنزيم مساعد لاستخراج الأحماض النووية

RNase A

1. مفهوم ووظيفة RNase A

إن ريبونوكلياز أ (RNase A)، باعتباره إندوريبونوكلياز، يقوم على وجه التحديد بتحلل بقايا السيتوزين (C) أو اليوراسيل (U) على الحمض النووي الريبي أحادي السلسلة. إن التطبيق الأكثر شيوعًا للريبونوكلياز أ (RNase A) هو إزالة الحمض النووي الريبي أثناء تحضير الحمض النووي البلازميدي أو الحمض النووي الجينومي. بالإضافة إلى ذلك، يمكن أيضًا استخدام هذا المنتج في تجارب البيولوجيا الجزيئية مثل اختبارات حماية RNase وتحليل تسلسل الحمض النووي الريبي.

2. خصائص RNase A

يتم استخلاص RNase A من بنكرياس البقر. لا يوجد تلوث بالنوكلياز الداخلي والخارجي للديوكسي ريبونوكلياز. يمكن استخدامه مباشرة دون تسخين مسبق ومقاوم للبيئات ذات درجات الحرارة العالية.

3. مقدمة المنتج

اسم المنتج	منتج رقم	مواصفة	ظروف التخزين ومدة الصلاحية
RNase A (100 ملغ / مل)	10406ES	1 مل	يتم تخزينه عند درجة حرارة -20 درجة مئوية. مدة الصلاحية 2 سنة.
RNase A (10 ملغ / مل)	10405ES	1مل	مخزنة في درجة حرارة الغرفة.مدة الصلاحية 1 سنين.
ريبونوكلياز أ (RNase A)، من بنكرياس البقر	10407ES	100 ملغ/1 جرام	يتم تخزينه في درجة حرارة الغرفة. مدة الصلاحية 2 سنة.

ديوكسي ريبونوكلياز 1 (DNase I)

إن إنزيم الديوكسي ريبونوكلياز الأول (DNase I)، وهو إنزيم نوكلياز داخلي يوجد في العديد من الخلايا والأنسجة، يستهدف ويقطع الرابطة الفوسفودايسترية المجاورة للبيريميدينات، مما ينتج عنه بولينيوكليوتيدات تحتوي على مجموعة فوسفات عند الطرف 5' ومجموعة هيدروكسيل عند الطرف 3'. إن متوسط ​​ناتج الهضم الأدنى هو بوليمر رباعي النوكليوتيدات. يمكن أن يحفز إنزيم الديوكسي ريبونوكلياز الأول أشكالاً مختلفة من الحمض النووي، مثل الحمض النووي أحادي السلسلة، والحمض النووي ثنائي السلسلة، وحتى الكروماتين (الذي يتأثر معدل انقسامه بالهستونات). في تجارب علم الأحياء الجزيئي، غالبًا ما يستخدم لإزالة الحمض النووي من البروتينات أو لإدخال شقوق في الحمض النووي لإدخال قواعد مُسمَّاة في الحمض النووي.

2.خصائص DNase I

النطاق الأمثل لعمل DNase I هو pH 7-8، ويعتمد نشاطه على Ca²⁺ ويمكن تنشيطها بواسطة أيونات معدنية ثنائية التكافؤ مثل Co²⁺، من²⁺, الزنك²⁺، إلخ. 5 مليمولار كالسيوم²⁺ يمكن أن يحمي الإنزيم من التحلل المائي. في وجود المغنيسيوم²⁺يمكن لهذا الإنزيم التعرف بشكل عشوائي على أي موقع على أي من خيوط الحمض النووي وقطعه؛ وفي وجود المنغنيز²⁺يمكنه التعرف على كلا سلسلتي الحمض النووي في نفس الوقت وقطعهما في نفس الموقع تقريبًا.

3.مقدمة المنتج

اسم المنتج	منتج رقم	مواصفة	ظروف التخزين ومدة الصلاحية
ديوكسي ريبونوكلياز I (DNase I) من بنكرياس البقر	10607ES	15 وحدة/10×15 وحدة	يتم تخزينه عند درجة حرارة -20 درجة مئوية. مدة الصلاحية 2 سنة.
ديوكسي ريبونوكلياز I (DNase I) من بنكرياس البقر	10608ES	25 ملغ/100 ملغ/1 جرام	يتم تخزينه عند درجة حرارة -20 درجة مئوية. مدة الصلاحية 2 سنة.

بروتيناز ك

1. مفهوم ووظيفة البروتيناز ك

إن بروتيناز ك (Proteinase K) عبارة عن بروتياز سيريني يتمتع بمجموعة واسعة من أنشطة الانقسام. يبلغ وزنه الجزيئي النسبي حوالي 29.3 كيلو دالتون ويمكنه تقسيم الروابط الببتيدية الكربوكسيلية للأحماض الأمينية الأليفاتية والأحماض الأمينية العطرية. يتمتع بروتيناز ك بمجموعة واسعة من التطبيقات ويمكن استخدامه في التجارب مثل تحضير الحمض النووي الكروموسومي للرحلان الكهربائي للهلام بالحقل النبضي، وتقنية ويسترن بلوت، وإزالة النوكليازات في مستحضرات الحمض النووي والحمض النووي الريبي. يمكن لعوامل التحلل مثل SDS (1%) أن تزيد من نشاطه.

2.خصائص البروتيناز ك

مشتق من سلالة الخميرة المعدلة وراثيا.

خالية من RNase و DNase.

نشط ومستقر في اليوريا وSDS.

نشط في نطاق واسع من درجة الحموضة (درجة الحموضة 4.0 - 12.0)، ونطاق درجة الحموضة الأمثل هو درجة الحموضة 7.5 - 9.0.

اسم المنتج	منتج رقم	مواصفة	ظروف التخزين ومدة الصلاحية
بروتيناز ك	10401ES	100 ملغ/1 جرام/5 جرام/100 جرام	يتم تخزينه عند درجة حرارة 4 درجة مئوية، مدة الصلاحية 3 سنوات سنين.
محلول بروتيناز ك (20 ملغ/مل)	10412ES	1مل/10مل/25مل/500مل	يتم تخزينه عند درجة حرارة 4 درجة مئوية، مدة الصلاحية 2 سنين.
محلول بروتيناز ك (20 ملغ/مل)	10410ES	1مل/10مل/25مل/500مل	يتم تخزينه عند درجة حرارة 4 درجة مئوية، مدة الصلاحية 2 سنين.

مثبت الحمض النووي الريبوزي

محلول مثبت الحمض النووي الريبوزي (RNA) للأنسجة الحيوانية والنباتية

1. وظيفة محلول تثبيت الحمض النووي الريبوزي للأنسجة الحيوانية والنباتية

تنتشر إنزيمات الريبونوكلياز على نطاق واسع في البيئة ومن المرجح جدًا أن تتسبب في تدهور الحمض النووي الريبي في العينات التي تم جمعها حديثًا من أنسجة الحيوانات والنباتات والدم وسوائل الجسم وما إلى ذلك. تم تطوير مثبت الأنسجة الآمن للحمض النووي الريبي للأنسجة الحيوانية والنباتية (مثبت الأنسجة الآمن للحمض النووي الريبي) خصيصًا لتثبيت وحماية الحمض النووي الريبي في العينات التي تم جمعها. وباعتباره محلولًا غير سام، يمكنه اختراق الأنسجة بسرعة وتعطيل إنزيمات الريبونوكلياز الذاتية.

2. خصائص محلول مثبت الحمض النووي الريبي للأنسجة الحيوانية والنباتية

سهل الاستخدام للغاية: ما عليك سوى قطع الأنسجة الطازجة إلى كتل أنسجة ذات حجم مناسب (≤0.5 سم) وغمرها في 5 إلى 10 أضعاف حجم RNAsafe.

فترة تثبيت طويلة: يمكن تخزين الأنسجة/الخلايا المتسللة بـ RNAsafe عند 37 درجة مئوية لمدة يوم واحد، وفي درجة حرارة الغرفة لمدة أسبوع واحد، وعند 4 درجات مئوية لمدة 4 أسابيع، وللتخزين طويل الأمد عند -20 درجة مئوية/-80 درجة مئوية.

توافق واسع النطاق: متوافق مع جميع طرق عزل الحمض النووي الريبي تقريبًا، مثل كاشف استخلاص الحمض النووي الريبي الكلي HieffTM (رقم الكتالوج: 10606ES60)، وجميع مجموعات استخلاص الحمض النووي الريبي التجارية تقريبًا، بما في ذلك طريقة الاستخلاص بالعمود الطارد المركزي وطريقة التنقية بالخرز المغناطيسي.

تطبيق واسع للمواد: يمكن استخدامه للحفاظ على مختلف الأنسجة الحيوانية والنباتية (مثل الدماغ والقلب والكبد والبنكرياس والكلى والطحال والخصية والعضلات والسيقان وأوراق النباتات، وما إلى ذلك)، وأيضا للخميرة وخلايا زراعة الأنسجة، وما إلى ذلك.

3.مقدمة المنتج

اسم المنتج	منتج رقم	مواصفة	ظروف التخزين ومدة الصلاحية
مثبت الأنسجة RNAsafe RNAsafe	10604ES60	100 مل	يتم تخزينه في درجة حرارة الغرفة. مدة الصلاحية 5 سنوات سنين.

المنتجات ذات الصلة

اسم المنتج	منتج رقم	مواصفة	ظروف التخزين ومدة الصلاحية
الليزوزيم	10402ES	5/50 ج	يتم تخزينه عند درجة حرارة -20 درجة مئوية. مدة الصلاحية 3 سنوات سنين.
ليتيكاز (10 وحدة/ميكرولتر)	10403ES	1500/3000/10000 وحدة	مخزنة في -20 درجة مئوية.
سنيليز	10404ES	5/10 ج	يتم تخزينه في درجة حرارة تتراوح بين 2 إلى 8 درجات مئوية. مدة الصلاحية 2 سنين.
RNAsafe-ICE	10605ES	100 مل	يتم تخزينه في درجة حرارة الغرفة. مدة الصلاحية 2 سنين.