Human Wnt3a المعبر عنها في خلايا HEK293 تظهر نشاطًا عاليًا يعزز زراعة الأعضاء

إن الأعضاء هي نماذج ثلاثية الأبعاد تم إنشاؤها في المختبر تشبه إلى حد كبير الأنسجة أو الأعضاء الطبيعية، ولها أهمية كبيرة في مجالات نمذجة الأمراض وتجديد الأعضاء والرعاية الطبية الفردية. تتطلب زراعة هذه الأعضاء الإدارة الدقيقة لمجموعة متنوعة من السيتوكينات، حيث يبرز Wnt3a كعامل مستخدم بشكل متكرر ويتولى دورًا محوريًا في رعاية الأعضاء المستمدة من مجموعة واسعة من الأنسجة.

ما هو Wnt-3a؟

ينتمي بروتين Wnt-3a إلى عائلة Wnt، وهي مجموعة من البروتينات المفرزة التي تضم 19 نوعًا بشريًا، بما في ذلك Wnt1 وWnt2 وWnt2b (Wnt13) وWnt3 وWnt3a وWnt4 وWnt5a وWnt5b وWnt6 وWnt7a وWnt7b وWnt8a وWnt8b وWnt9a (المعروف أيضًا باسم Wnt14) وWnt9b (Wnt14b) وWnt10a وWnt10b وWnt11 وWnt16. تتميز هذه العائلة بتكوينها الغني بالسيستين. تسهل بروتينات Wnt مسار إشارات Wnt عن طريق الارتباط بمستقبلات غشاء الخلية أو مستقبلات غشاء الخلية المجاورة. يمكن تصنيف هذا المسار إلى المسار التقليدي، الذي يتوسطه β-catenin، والذي يشمل Wnt1 وWnt2 وWnt2b وWnt3 وWnt3a وWnt7a وWnt8 وWnt8b وWnt10a، والمسار غير التقليدي، المستقل عن β-catenin، والذي يشمل Wnt4 وWnt5a وWnt6 وWnt11. Wnt3a، باعتباره العضو الجوهري في عائلة Wnt، منتشر في كل مكان ويمارس دورًا محوريًا في التحكم في العديد من الوظائف الخلوية، مثل التجديد الذاتي والتكاثر والتمايز والحركة.

آلية نقل مسار إشارات Wnt-3a

إن مسار إشارات Wnt عبارة عن شبكة متعددة الأوجه من التفاعلات البروتينية المرتبطة في المقام الأول بالتطور الجيني والسرطان. ومع ذلك، فإنه يلعب أيضًا دورًا في العمليات الفسيولوجية الطبيعية في الكائنات البالغة. يرتبط Wnt3a بمستقبله، بروتين Frizzled (Fz)، جنبًا إلى جنب مع البروتين المرتبط بمستقبل البروتين الدهني المشارك (LRP5/6)، مما يؤدي لاحقًا إلى تنشيط بروتين السقالة Disheveled (Dvl). يؤدي هذا التنشيط إلى تفكيك "مجمع التدمير"، والذي يتكون من كيناز الكازين 1 (CK1)، وغليكوجين سينثاز كيناز-3β (GSK-3β)، وبروتينات السقالة adenomatous polyposis coli (APC)، وAxin1، وAxin2. يعمل إذابة هذا المجمع على تثبيت بروتين β-Catenin الحر في السيتوبلازم. تنتقل بعد ذلك مادة β-Catenin المتراكمة في السيتوبلازم إلى النواة، حيث ترتبط بعوامل النسخ من عائلة TCF/LEF، مما يؤدي في النهاية إلى تنشيط جينات الهدف التالية مثل c-myc وCyclin D1. تحفز هذه السلسلة الاستجابات الخلوية اللاحقة. باختصار، يمكن تبسيط مسار إشارات Wnt على النحو التالي: Wnt3a→FZD→DVL→complex dissolution→β-Catenin تدخل النواة→TCF/LEF→نسخ الجينات التالية. بدون Wnt3a، يتحلل β-catenin بشكل طبيعي في السيتوبلازم بواسطة "مجمع التدمير"، الذي يستهدفه لليوبيكويتين والتحلل اللاحق في البروتيازوم. نتيجة لذلك، لا يمكنه دخول النواة لبدء نسخ الجينات التالية. يعد مسار إشارات Wnt/β-catenin محفوظًا للغاية طوال التطور ويلعب دورًا أساسيًا في التطور الجيني ونمو الخلايا والتمايز وتكوين القطبية والتطور العصبي والسرطان.

Wnt3a والأعضاء

يحتل Wnt3a مكانة مركزية كواحد من أكثر عوامل الثقافة المستخدمة في توليد الأعضاء. إن نشاطه العالي، والاتساق بين الدفعات، وغياب التلوث، والتحضير الخالي من المصل هي عوامل رئيسية تساهم في نجاح تجارب الأعضاء.وقد وجد بروتين Wnt3a استخدامًا واسع النطاق في زراعة الأعضاء من أنسجة مختلفة، بما في ذلك الأمعاء والمعدة والبنكرياس والكبد والغدة الدرقية والمريء والجهاز العصبي. وفي محاولة لمساعدة الباحثين العلميين وشركات الأدوية في دراساتهم حول التطبيق السريري لبروتين Wnt3a في تكوين الأعضاء وأبحاث الأورام، قدمت شركة YEASEN منتج بروتين Wnt3a عالي النشاط (الكتالوج: 92276ES) مصمم لتسهيل زراعة الأعضاء.

الشكل 3. تم قياس ذلك من خلال قدرته على تحفيز نشاط المراسل Topflash في خلايا الكلى الجنينية البشرية HEK293T. تبلغ الجرعة ED50 لهذا التأثير 25 نانوجرام/مل.

التحقق من صحة زراعة العضويات

ياسين تم التحقق من وجود السيتوكينات في الأعضاء السرطانية البشرية مثل سرطان الرئة وسرطان عنق الرحم وسرطان المبيض وسرطان البنكرياس وسرطان الأمعاء، والأعضاء الطبيعية مثل الأعضاء المعوية الدقيقة للإنسان والفئران.

السيتوكينات ذات الصلة معلومة