دليل مجاني: تحسين سير عمل تنقية البروتين

تعد تنقية البروتين تقنية أساسية في الكيمياء الحيوية وعلم الأحياء الجزيئي، وتُستخدم على نطاق واسع في الأبحاث والتشخيصات والتطبيقات العلاجية. لدراسة بروتين معين، فإن الخطوة الأولى هي عزله وتنقيته من العينات البيولوجية. ومع ذلك، فإن تحقيق بروتين عالي النقاء قد يكون تحديًا، نظرًا لتنوع البروتينات وتعقيد الأنظمة البيولوجية. إن فهم المبادئ الأساسية لتنقية البروتين واختيار التقنيات المناسبة لأبحاثك يمكن أن يعزز كفاءة سير العمل لديك بشكل كبير.

أساسيات تنقية البروتين

تعتمد تنقية البروتينات على الاختلافات في الخصائص الفيزيائية والكيميائية للبروتينات، مثل الحجم والشحنة وكراهية الماء والتقارب مع ربيطات معينة. ومن خلال استغلال هذه الاختلافات، يمكن للباحثين فصل البروتينات المستهدفة عن المكونات البيولوجية الأخرى بشكل فعال، مما يقلل من التلوث.

وفيما يلي التقنيات الأساسية لتنقية البروتين استنادًا إلى آليات الفصل المميزة:

يمكن تحسين كل من هذه التقنيات من خلال اختيار المواد والأعمدة المناسبة. تعتمد الطريقة المثالية على خصائص البروتين ومستوى النقاء المطلوب للتطبيقات اللاحقة.

تحسين سير عمل تنقية البروتين باستخدام Yخفف منتجات بيولوجية

في ياسين في مجال علم الأحياء، نوفر مجموعة واسعة من الكواشف والمواد عالية الجودة المصممة لتبسيط عملية تنقية البروتين. سواء كنت تتعامل مع عينات بيولوجية معقدة أو تحتاج إلى بروتينات عالية الغلة وعالية النقاء، فإننا نقدم أدوات لتعزيز عملية التنقية الخاصة بك. فيما يلي نظرة عامة على بعض منتجاتنا الرئيسية لمساعدتك في تحسين سير عمل التنقية لديك:

علامته تنقية البروتين (القطة رقم 20502ES:

في التعبير عن البروتين المعاد تركيبه، علامته (عادةً 6×His) يستخدم على نطاق واسع بسبب حجمه الصغير ومناعته المنخفضة وتأثيره الضئيل على وظيفة البروتين. يمكن تنقية بروتينات علاماته بكفاءة بواسطة راتنجات التقارب المخلبة بأيونات النيكل، مثل راتنجات Ni-NTA. راتنج الآجاروز HisSep Ni-NTA ((رقم القطة 20502ES) مقدمة من Yخفف علم الأحياء يستخدم هلام الآجاروز المترابط بشكل كبير كمصفوفة، مع ربيطة حمض النيتروجين الثلاثي الأسيتيك (NTA) المنسقة رباعيًا لتكوين مخلبات أيونات النيكل المستقرة. يضمن الهيكل المشترك كفاءة ربط البروتين وأداء الإيلوشن.

تنقية تقارب الأجسام المضادة للعلامة

تستخدم عملية تنقية الأجسام المضادة للوسم عن طريق التقارب ارتباطًا خاصًا عاليًا بين الجسم المضاد ووسمه الخاص لتحقيق تنقية البروتين المندمج. تشمل العلامات الشائعة العلم، HA، Myc، إلخ. ومن خلال الاستفادة من وسائط تقارب الأجسام المضادة المقابلة، يمكن عزل البروتين المطلوب بكفاءة من العينات المعقدة.

ييسن علم الأحياء توفر مجموعة متنوعة من منتجات تنقية الأجسام المضادة ذات العلامات التجارية:

• تقارب ضد العلم جل (القطة رقم 20584ES):
  تم تحضيره من جسم مضاد أحادي النسيلة عالي الجودة من نوع IgG2b للفئران مع 4% من هلام الأجار المترابط بشكل كبير من خلالأوه، اقتران العرض، لديه قدرة تحميل عالية لبروتين اندماج العلامة، سوبرصالحة للترسيب المناعي وتنقية بروتينات العلامة المميزة. Yeasen.com

• جل مضاد لحمض الهيالورونيك(القطة رقم 20586اللغة الاسبانية):
  تم تحضيره من جسم مضاد وحيد النسيلة IgG1 عالي الجودة من الفئران وهلام Sepharose 4B من خلال ربط الإمداد، وله قدرة تحميل عالية لبروتينات اندماج علامة HA، وهو مناسب للترسيب المناعي وتنقية بروتينات علامة HA.كوم

• جل مضاد للفطريات(القطة رقم 20587اللغة الاسبانية):
  تم ربط الأجسام المضادة أحادية النسيلة عالية الجودة من نوع IgG1 الفأرية بهلام Sepharose 4B، المصمم لتنقية البروتينات التي تحمل علامة Myc، مع خصوصية عالية وقدرة عالية على الارتباط.

• خرزات مناعية مغناطيسية مضادة للعلم(القطة رقم 20565ES):
  يتم ربط هذه الخرزة المناعية المغناطيسية مع كريات مجهرية مغناطيسية من الأجار باستخدام جسم مضاد وحيد النسيلة عالي الجودة مشتق من الفأر من نوع IgG2b، والذي يمكنه تنقية البروتينات التي تحمل علامة Flag بسرعة تحت تأثير المجالات المغناطيسية، وهو مناسب لتنقية أحجام العينات الصغيرة.

تنقية تقارب الأجسام المضادة (رقم القطعة 36401ES):

تنقية تقارب الأجسام المضادة هي طريقة لاستخدام الارتباط النوعي بين جسم مضاد ومستضده لتنقية البروتين. يستخدم راتنج تنقية بروتين أ المؤتلف المقاوم للقلويات (رقم القطعة 36401ES) بشكل شائع كوسيط لتنقية الأجسام المضادة ويستخدم على نطاق واسع لتنقية الأجسام المضادة وإثرائها.

البروتيناز

في دراسات البروتين، يتم استخدام البروتياز لتقسيم علامات الاندماج، واستعادة الحالة الطبيعية للبروتين المستهدف. إن دمج هذه البروتيازات في سير عمل تنقية البروتين الخاص بك يمكن أن يعزز جودة ووظائف البروتينات المستهدفة، مما يسهل مشاريع البحث والتطوير المتقدمة.

• إنتيروكيناز معاد التركيب (رقم القطعة 20401ES):

إن إنتيروكيناز، المعروف أيضًا باسم إنتيروبيبتيداز، هو بروتياز سيريني ينشطر على وجه التحديد بعد تسلسل الأحماض الأمينية DDDDK. يتم التعبير عن إنتيروكيناز ييسن المعاد تركيبه في الإشريكية القولونية وهو خالٍ من العلامات، مما يضمن عدم تداخله مع التطبيقات اللاحقة. يعد هذا الإنزيم مثاليًا لإزالة علامات الاندماج من البروتينات المعاد تركيبها، مما يسهل إنتاج البروتينات الأصلية للدراسات البنيوية والوظيفية.

• لPNGase F (الفئة رقم 20407ES):

PNGase F هو أميداز ينشطر بشكل خاص بين بقايا GlcNAc وAsn الداخلية للجليكوبروتينات المرتبطة بالنيتروجين. يتم توفير PNGase F من Yeasen بتركيز 100000 وحدة/مل، مما يوفر نشاطًا عاليًا لتفاعلات إزالة الجليكوزيل. يعد هذا الإنزيم ضروريًا لدراسة هياكل ووظائف الجليكوبروتينات، لأنه يزيل الجليكان المرتبط بالنيتروجين دون التأثير على العمود الفقري للببتيد.

• التربسين المؤتلف (MS-SAFE) (رقم القطعة 20416ES):

التربسين هو بروتياز سيريني يشق الروابط الببتيدية على الجانب الكربوكسيلي من بقايا الليسين والأرجينين. التربسين المؤتلف من Yeasen آمن على MS-SAFE، مما يعني أنه مناسب لتطبيقات مطياف الكتلة بسبب نقائه العالي ونشاطه التحللي الذاتي الضئيل. هذا الإنزيم مثالي للدراسات البروتينية، بما في ذلك هضم البروتين لتحليل مطياف الكتلة.

طهارة طريقة	نوع الكاشف	نوع المنتج	المنتجات الموصى بها
ترشيح الجل	دكسترين جل الكروماتوغرافيا	حشوات إزالة الأملاح إزالة الأملاح من الأعمدة المعبأة مسبقًا إزالة الأملاح عن طريق أعمدة الجاذبية وأعمدة الدوران	عمود إزالة الأملاح G25 M(القطة رقم 20590ES) عمود تحلية المياه الدوراني، 0.5 مل (القطة رقم 20599ES) عمود تحلية الجاذبية، 8.3 مل (القطة رقم 20741ES)
	أغاروز جل الكروماتوغرافيا	حشو أعمدة معبأة مسبقًا	تعبئة كروماتوغرافيا جل الآجاروز عالية الدقة Geldex 200 PG (10-600 كيلو دالتون) (رقم الكتالوج 20598ES) عمود الكروماتوغرافيا Geldex 200 PG (القطة رقم 20593ES)
تبادل الأيونات	التبادل الأنيوني الكروماتوغرافيا	حشو أعمدة معبأة مسبقًا	Q Agarose HP (كروماتوغرافيا التبادل الأنيوني Q القوية للتعبئة HP) (رقم الكتالوج 20460ES) عمود Q HP Strong Anion Exchange المعبأ مسبقًا، 5 مل (رقم الكتالوج 20462ES)
	كروماتوغرافيا التبادل الكاتيوني		SP Agarose HP (تعبئتها بتقنية تبادل الكاتيون القوي SP HP) (رقم الكتالوج 20463ES) عمود مسبق التعبئة لتبادل الكاتيون القوي SP HP، 5 مل (رقم الكتالوج 20465ES)
كروماتوغرافيا التفاعل الكاره للماء	ضعيف كاره للماء الكروماتوغرافيا	حشو أعمدة معبأة مسبقًا	وسط كروماتوغرافيا ضعيف كاره للماء من البوتيل عالي الدقة (رقم الكتالوج 20484ES) عمود محمل مسبقًا بالكروماتوغرافيا الكارهة للماء ببوتيل HP، 5 مل (رقم الكتالوج 20485ES)
	كاره للماء قوي الكروماتوغرافيا		وسط كروماتوغرافي عالي الدقة من الفينيل شديد الكراهية للماء (رقم الكتالوج 20486ES) عمود محمل مسبقًا بالكروماتوغرافيا الكارهة للماء بقوة فينيل HP، 5 مل (رقم الكتالوج 20487ES)
تنقية التقارب	علامته تنقية البروتين	الراتنج أعمدة معبأة مسبقًا خرزات التنقية المغناطيسية	راتنج تنقية بروتين الآجاروز من علامة His (القط رقم 20502ES) عمود مسبق التحميل لتنقية البروتين His-tag، 5 مل (رقم الكتالوج 20504ES) خرزات مغناطيسية لتنقية البروتين من His-tag (رقم القطعة 20561ES)
	ضريبة السلع والخدمات-علامة تنقية البروتين	الراتنج أعمدة معبأة مسبقًا خرزات التنقية المغناطيسية	راتنج أجاروز الجلوتاثيون (لتنقية البروتين المُوسوم بـ GST) (رقم الكتالوج 20507ES) عمود تنقية البروتين المُحمَّل مسبقًا والمُعَلَّم بعلامة GST، 5 مل (رقم الكتالوج 20510ES) خرزات مغناطيسية لتنقية البروتين تحمل علامة GST (رقم القطعة 20562ES)
	م ب ب-علامة تنقية البروتين	الراتنج أعمدة معبأة مسبقًا	راتينج تنقية عالي الترابط مع بروتين موسوم بـ MBP (رقم القطعة 20515ES) عمود مسبق التحميل لتنقية البروتين المميز بعلامة MBP، 5 مل (رقم الكتالوج 20517ES)
	المكورات العنقودية2-) العلامة تنقية البروتين	الراتنج أعمدة معبأة مسبقًا	راتينج تنقية بروتين الأجاروز المُعَلَّم بـ Strep(II) (رقم القطعة 20495ES)
	بيوتي-علامة تنقية البروتين	الراتنج أعمدة معبأة مسبقًا خرزات مناعية مغناطيسية	راتنج تنقية الأجاروز ستريبتافيدين (رقم القطعة 20512ES) عمود مسبق التحميل لتنقية الجزيئات بالبيوتين، 5 مل (رقم الكتالوج 20514ES) حبيبات مناعية مغناطيسية من مادة ستريبتافيدين (SAV) (رقم القطعة 47503ES)
	تنقية تقارب الأجسام المضادة للعلامة	جل خرزات مناعية مغناطيسية	جل تنقية مضاد للعلم (القط رقم 20584ES) جل تنقية مضاد لحمض الهيالورونيك (القط رقم 20586ES) جل تنقية مضاد للميكروبات (القط رقم 20587ES) خرزات مناعية مغناطيسية مضادة للعلم (القط رقم 20565ES)
	تنقية تقارب الأجسام المضادة	الراتنج أعمدة معبأة مسبقًا خرزات مناعية مغناطيسية	راتنج تنقية الأجاروز البروتيني A المعاد تركيبه (القط رقم 36401ES) راتينج تنقية بروتين ج أجاروز (رقم القطعة 36405ES) راتينج تنقية الأجاروز البروتيني A/G (رقم القطعة 36403ES) حبيبات مناعية مغناطيسية من البروتين A/G (القط رقم 36417ES)
	تنقية الأجسام المضادة الأخرى	الراتنج أعمدة معبأة مسبقًا	راتينج تنقية عالي الكفاءة لإزالة السموم الداخلية (رقم القطعة 20518ES) وسط تنقية الهيبارين (رقم القطعة 20493ES)
ملاك أو ملك	البروتياز	إنزيمات انقسام العلامات جليكوسيدازات إنزيمات درجة مطياف الكتلة	هـ.إنزيم إنتيروكيناز معاد التركيب من نوع coli (بدون تسمية) (القط رقم 20401ES) الثرومبين البقري (قابلية عالية للبقاء، >2000 وحدة دولية/ملغ) (رقم الكتالوج 20402ES) إنزيم بروتياز rTEV المعاد تركيبه لفيروس نخر التبغ (رقم الصنف 20403ES) PNGase F، N-جليكوزيداز F (100000 وحدة/مل) (القط رقم 20407ES) التربسين المؤتلف (MS-SAFE) التربسين المؤتلف (درجة مطياف الكتلة) (القط رقم 20416ES)
	المواد الاستهلاكية للكروماتوغرافيا	أعمدة فارغة لتدفق الجاذبية نوع الأعمدة الفارغة أعمدة YXK أكياس غسيل الكلى	عمود فارغ سعة 12 مل من كروماتوغرافيا الجاذبية (رقم الكتالوج 20523ES) عمود فارغ سعة 5 مل من النوع C (متصل بجهاز Akata أو المحقنة أو المضخة التمعجية) (رقم الفئة 20526ES) عمود فارغ للكروماتوغرافيا YXK16/70 (رقم الكتالوج 20443ES) كيس غسيل الكلى مقاس 27 مم (MWCO 50 kDa) (رقم القطعة 20534ES)

الاستنتاج: قم بتخصيص سير عملك وفقًا لاحتياجاتك

يعد تحسين سير عمل تنقية البروتين أمرًا بالغ الأهمية لتحقيق بروتينات عالية النقاء وعالية الإنتاجية لأبحاثك أو تطبيقاتك. من خلال فهم مبادئ التنقية واختيار الأدوات المناسبة، يمكنك تبسيط عمليتك وتجنب الأخطاء الشائعة. ياسين توفر البيولوجيا الكواشف والمواد الاستهلاكية ذات الجودة الأعلى لجميع مراحل تنقية البروتين، مما يضمن أن تكون البروتينات الخاصة بك نقية وعملية وجاهزة للتحليل.

لمعرفة المزيد حول كيفية مساهمة منتجاتنا في تعزيز عملية تنقية البروتين لديك، تفضل بزيارة صفحات منتجاتنا أو اتصل بفريقنا للحصول على توصيات مخصصة.

لمزيد من المعلومات أو الشراء، قم بزيارة موقعنا نحن الرسميونبموقع.