Yeasen جل مضاد لـ DYKDDDDK (Flag): تنقية دقيقة للبروتينات الغشائية منخفضة الوفرة

في مجال البحوث الطبية الحيوية، تعد تنقية البروتينات تقنية أساسية لاستكشاف ألغاز الحياة. ومع ذلك، فإن طرق التنقية التقليدية تعاني من عدم الكفاءة والتكاليف المرتفعة - وخاصة بالنسبة للبروتينات الغشائية، والتي تشكل محور أبحاث علم الأحياء البنيوي. هذه البروتينات معقدة بنيوياً، ولديها مستويات تعبير منخفضة في أغشية الخلايا، وهي حساسة للظروف البيئية، مما يجعل تنقيتها صعبة بشكل خاص. الآن، Yeasen أطلقت شركة بيوتيك، بقدراتها المتميزة في البحث والتطوير، النسخة المحدثة جل مضاد لـ DYKDDDDK(العلم) (القط رقم 20584ES)، أداة قوية لتنقية البروتين بكفاءة وراحة، حتى بالنسبة للبروتينات الغشائية الصعبة.

أداء المنتج

1. الخصوصية العالية والقدرة العالية على الارتباط: المزايا الرئيسية لالتقاط البروتين المستهدف

Yeasen جل مضاد لـ DYKDDDDK(العلم) (القط رقم 20584ES) يتم تحضيره عن طريق ربط الأجسام المضادة أحادية النسيلة IgG2b عالية الجودة للفأر بشكل تساهمي مع هلام أجاروز عالي الارتباط بنسبة 4%. تمنح عملية التصنيع الفريدة هذه المنتج خصوصية عالية للغاية، مما يمكنه من التعرف بدقة على البروتينات المندمجة التي تحمل علامة Flag وربطها. سواء كان بروتين الاندماج الطرفي N Flag المعدل بواسطة Met (ميت فلاج بروتين)، بروتين الاندماج الطرفي N (بروتين العلم)، أو بروتين الاندماج الطرفي C (بروتين فلاج), يمكن للهلام التعامل معهم بسهولة.

في تنقية بروتين الغشاء، تكون هذه الخصوصية مهمة بشكل خاص لأن هذه البروتينات معقدة هيكليًا وعرضة للارتباط غير المحدد ببروتينات أخرى. تعمل الخصوصية العالية لهلام Flag على تقليل التداخل من البروتينات غير المحددة بشكل فعال، مما يضمن نقاءً عاليًا لبروتينات الغشاء المنقاة. بالإضافة إلى ذلك، يتمتع الهلام بسعة ارتباط عالية لبروتينات الاندماج التي تحمل علامة Flag (على الأقل 1.1 ملغ بروتين/مل وهذا يعني أنه حتى لو تم التعبير عن البروتين المستهدف بمستويات منخفضة، فما زال من الممكن التقاطه وتنقيته بكفاءة باستخدام هلام Flag.

2. نقاء عالي وإنتاجية عالية: تمكين التطبيقات اللاحقة

Yeasen جل مضاد لـ DYKDDDDK(العلم) (القط رقم 20584ES) تتميز هذه الطريقة بقدر ضئيل من الارتباط غير النوعي بالشوائب، مما يؤدي إلى الحصول على عينات بروتينية نقية للغاية بعد التنقية. وهذا أمر بالغ الأهمية للتطبيقات اللاحقة مثل اختبارات النشاط الحيوي والتحليل البنيوي. توفر عينات البروتين عالية النقاء بيانات تجريبية أكثر دقة، مما يضع أساسًا متينًا لدراسات الباحثين.

3. سير العمل التجريبي المحسن: تبسيط تحديات تنقية البروتين

يجب أن تتم عملية تنقية البروتين في ظروف معتدلة لتجنب الضرر البنيوي للبروتينات، وخاصة بالنسبة للبروتينات الغشائية المعقدة. Yeasen جل مضاد لـ DYKDDDDK(العلم) (القط رقم 20584ES) تم تصميمه مع وضع هذا في الاعتبار. مخزن التخزين المؤقت الخاص به هو TBS يحتوي على 50٪ من الجلسرين عند درجة الحموضة 7.4، والذي لا يحمي نشاط الجل فحسب، بل يوفر أيضًا بيئة لطيفة لتنقية البروتين.

إن عملية التنقية باستخدام جل فلاج بسيطة وفعالة. لتسهيل استخدام عملية استخلاص الببتيد 1×فلاج، تتضمن عبوة المنتج ببتيد 1×فلاج مجاني (رقم الصنف 20572ES). وهذا يجعل عملية الاستخلاص لطيفة (دون إحداث أي ضرر للبروتينات تقريبًا) ومريحة للغاية (مما يعزز سهولة التجربة).

4. أحجام متعددة وخيارات شحن مرنة: تلبية الاحتياجات التجريبية المتنوعة

مع الأخذ في الاعتبار المقاييس والاحتياجات المختلفة للمختبرات المختلفة، Yeasen تقدم جل العلم بأحجام متعددة، بما في ذلك 1 مل، 5 مل، 25 مل، و100 ملسواء كان الأمر يتعلق بالاستكشاف الأولي على نطاق صغير أو إنتاج البروتين على نطاق واسع، فهناك خيار مناسب متاح. بالنسبة للمشتريات السنوية ذات الحجم الكبير، يمكن للعملاء اختيار استلام الشحنات على دفعات، مما يسمح لهم بالاستمتاع بخصومات الأسعار مع تجنب ضغط المخزون المفرط.

بيانات الاختبار

م: علامة البروتين 1: عينة خام ما قبل العمود من بروتين Flag-N/Flag-M/Flag-C 2: تدفق ما بعد العمود لبروتين Flag-N/Flag-M/Flag-C 3: الإيلوشن (درجة الحموضة 2.7) 4: الإيلوشن (إيلوشن بدرجة حموضة 12) 5: الإيلوشن (1×إستخلاص الببتيد العلمى 6: جل نقي (إيلوشن بدرجة حموضة 2.7) 7: جل نقي (درجة حموضة 12) 8: جل نقي (1×إستخلاص الببتيد العلمى أ:العلم-ن   ب:العلم-M   ج:العلم-C

الشكل 1.   Yeasen جل مضاد لـ DYKDDDDK(العلم) نتائج التنقية للبروتينات منخفضة التعبير (Flag-N (أ)، Flag-M (ب)، Flag-C (ج)) موضحة في SDS-PAGE.

م: علامة البروتين 1: عينة خام ما قبل العمود من بروتين Flag-C 2: تدفق ما بعد العمود لبروتين Flag-C 3: الإيلوشن (درجة الحموضة 2.7) 4: الإيلوشن (إيلوشن بدرجة حموضة 12) 5: الإيلوشن (1×إستخلاص الببتيد العلمى 6: جل نقي (درجة الحموضة 2.7) الإيلوشن 7: جل نقي (إيلوشن درجة الحموضة 12) 8: جل نقي (1×إستخلاص الببتيد العلمى أ:Yeasen ب:العلامة التجارية S*   ج:العلامة التجارية G*

شكل 2. مقارنة بين Yeasen (أ) معبراند S* (ب) و بrand G* (ج) المواد الهلامية المضادة للعلم في تنقية البروتينات منخفضة التعبير (على سبيل المثال، البروتينات الغشائية) كما هو موضح في SDS-PAGE.

الاستنتاجات:

1. Yeasen جل مضاد لـ DYKDDDDK(العلم) (القط رقم 20584ES) يتميز بخصوصية عالية ويمكنه الارتباط بعلامات Flag في مواضع مختلفة (بروتينات اندماج Flag الطرفية الأمينية، بروتينات اندماج Flag الطرفية الأمينية المعدلة بواسطة Met، بروتينات اندماج Flag الطرفية الكربوكسيلية).

2. في ظل ظروف التعبير عن البروتين المستهدف المنخفض للغاية (على سبيل المثال، بروتينات الغشاء)، Yeasen جل مضاد لـ DYKDDDDK(العلم) (Cat#20584ES) يحقق عائدات ونقاءات أعلى بشكل ملحوظ مقارنة بالمنافسين. استخدام Yeasen يوفر الببتيد المجاني 1 ×Flag (Cat#20572ES) لعملية الاستخلاص نتائج أفضل.

حلول كاملة لبروتينات الاندماج ذات العلامة المميزة:

إنتيروكيناز معاد التركيب (رقم الفهرس 20395ES):إنزيم بروتياز محدد يشق الطرف الكربوكسيلي لليسين مسبوقًا بأربعة أحماض أسبارتيكية: Asp-Asp-Asp-Asp-Lys. هذا التسلسل هو جزء من علامة العلم الثماني الببتيد (DYKDDDDK). يمكن لإنتروكيناز معاد التركيب (rEK) إزالة علامة العلم بسهولة من البروتينات المندمجة، مما يجعلها أداة مثالية لدراسة بنية ووظيفة البروتينات الأصلية.

خرزات مغناطيسية مضادة لـ DYKDDDDK(العلم) (القط رقم 20565ES): كرات مغناطيسية مجهرية من البوليمر تم تحضيرها عن طريق الربط التساهمي للأجسام المضادة أحادية النسيلة عالية الجودة المضادة لـ DYKDDDDK (Flag) مع حبيبات مغناطيسية قائمة على السيليكا (قطرها ل هذه الخرزات مناسبة للترسيب المناعي (IP) أو الترسيب المناعي المشترك (Co-IP) للبروتينات التي تحمل علامة العلم.

معلومات المنتج

اسم المنتج	رقم المنتج	مواصفة
جل مضاد لـ DYKDDDDK(العلم)	20584اللغة الاسبانية03/25/08	1 مل/5 مل/25 مل
إنتيروكيناز البقري المعاد تركيبه، His، المعبر عنه في الخميرة	20395ES60/76/90	100 و/500 يو/5000 يو
خرزات مغناطيسية مضادة لـ DYKDDDDK(العلم)	20565ES03/08	1 مل/5 مل