في عملية إنتاج الأدوية العلاجية (مثل الأجسام المضادة وأدوية ناقلات الفيروسات وما إلى ذلك) وتدفقها، فإن إزالة شوائب الأحماض النووية أمر بالغ الأهمية. يمكن لـ UltraNuclease، المعروف أيضًا باسم النوكلياز واسع النطاق أو النوكلياز غير التقييدي، أن يشق ويحلل أشكالًا مختلفة من الحمض النووي والحمض النووي الريبي في ظل ظروف تجريبية متعددة، ويُستخدم على نطاق واسع لإزالة الأحماض النووية من المواد البيولوجية.
يمكن لـ UltraNuclease، والذي يُشار إليه أيضًا باسم النوكلياز واسع النطاق والنوكلياز غير المحدد، أن يشق ويحلل أشكالًا مختلفة من الحمض النووي والحمض النووي الريبي في ظل ظروف تجريبية متعددة. ويُستخدم على نطاق واسع لإزالة الأحماض النووية من المنتجات البيولوجية.
سيناريوهات تطبيق المنتج
- إزالة الأحماض النووية المتبقية في المواد البيولوجية: أثناء إنتاج المواد البيولوجية، مثل الفيروسات واللقاحات والبروتينات، يمكن إضافة UltraNuclease لتحلل الأحماض النووية المتبقية. لا تؤدي هذه الخطوة إلى زيادة إنتاج الفيروسات فحسب، بل تقلل أيضًا بشكل كبير من محتوى الأحماض النووية المتبقية، وبالتالي ضمان سلامة وفعالية الأدوية.
- تقليل اللزوجة: عن طريق تحلل الأحماض النووية، يتم تقليل لزوجة محاليل الخلايا، مما يسهل عمليات الترشيح/الترشيح الفائق أثناء تنقية الجسيمات المشتقة من الخلايا مثل الفيروسات، ونواقل الفيروس الغدي المرتبط بالغدة الدرقية، والأجسام المتضمنة.
- تحسين الدقة والاسترداد: في تحليل ELISA، والرحلان الكهربائي ثنائي الأبعاد، وتحليل المناعة الغربية، فإنه يحسن الدقة والاسترداد.
- منع تراكم الخلايا: يمكن أن يمنع UltraNuclease بشكل فعال تراكم خلايا الدم المحيطية البشرية أحادية النواة (PBMCs).
لاستكشاف ظروف التشغيل المثالية لـ UltraNuclease، قمنا بدراسة تأثيرات أنظمة التخزين المتنوعة على نشاط الإنزيم.
تحليل مقارن للمنتجات المنافسة (من شركة أ)
يتوافق أداء UltraNuclease مع أداء الشركة A، ويمكنه تحقيق تأثير الاستبدال.
يتوافق معيار فحص الجودة مع معيار إنتاج GMP
| عناصر الكشف | معايير الجودة | طريقة الكشف |
| نشاط الانزيم | 250-300 وحدة/ميكرولتر | طريقة الركيزة العالمية |
| نشاط محدد | ≥1.5×106 وحدة/ملجم | طريقة الركيزة العالمية |
| نقاء البروتين | ≥99% | صفحة SDS |
| البروتياز | يلبي المتطلبات | طريقة الركيزة العالمية |
| السموم البكتيرية | يلبي المتطلبات | طريقة الجل |
| البروتين المضيف | سلبي | طريقة الاليزا |
| الحمض النووي المضيف | سلبي | طريقة qPCR |
| الاختبار المعقم | نمو عقيم | القاعدة العامة 1101 |
| الكشف عن مسببات الأمراض | سلبي (لم يتم اكتشافه) | راجع الطريقة الداخلية |
| اختبار الميكوبلازما | سلبي (لم يتم اكتشافه) | راجع الطريقة الداخلية |
| اختبار المعادن الثقيلة | يلبي المتطلبات | القاعدة العامة 0821 |
لتتناسب مع استخدام UltraNuclease، طورت Yeasen أيضًا بشكل مستقل مجموعة كشف محددة لـ UltraNuclease، والتي يمكنها الكشف بشكل فعال عن الإنزيم المتبقي وتقليل المخاطر. تم تطوير مجموعة الكشف عن بقايا Yeasen UltraNuclease في إشارة إلى إرشادات التحقق من صحة الطريقة التحليلية لدستور الأدوية الصيني لعام 2020 <9101>، وتتبع بدقة المتطلبات الأساسية للاختبار متعدد المعلمات (النطاق الخطي، والخصوصية، والدقة، والحساسية، والاستقرار المتسارع، وما إلى ذلك).
الكشف عن بقايا الترانوكلياز
في خطوات التنقية العادية، يمكن إزالة UltraNuclease بسهولة كشوائب. من أجل الكشف عن الكمية المتبقية المحددة من UltraNuclease القادر على كل شيء، غالبًا ما يتم استخدامه كمنتج قياسي في الصناعة ويتم تطوير مجموعة ELISA مطابقة.
UCF.ME® ألترانوكليز تتبنى مجموعة ELISA التي طورتها شركة Yeasen بشكل مستقل مبدأ اختبار المناعة المرتبط بالإنزيم ذي الساندويتش المزدوج للأجسام المضادة (اختبار ELISA الساندويتش)، والذي يمكنه الكشف بدقة عن الكمية المتبقية من UltraNuclease في العينات. تتميز المجموعة بالثبات في الخطية والقدرة على التكرار ومعدل الاسترداد والخصوصية.
مبدأ مجموعة Yeasen UltraNuclease ELISA (اختبار المناعة الأنزيمية ثنائي الموقع)
مميزات المنتج:
الامتثال التنظيمي: تم التحقق من صحته بالكامل وفقًا للمتطلبات التنظيمية، وتتوفر تقارير التحقق؛ ضمان الجودة: يتم تطوير جميع المواد الخام للمجموعة بشكل مستقل، مما يضمن مراقبة الجودة؛
حساسية عالية: الحد الكمي منخفض يصل إلى 23.5 بيكو جرام/مل؛
دقة عالية: إمكانية تكرار عالية داخل الدفعة وتباين منخفض بين الدفعات؛
خصوصية قوية: لا يوجد تفاعل متبادل مع بروتينات الخلايا المعدلة الأخرى
معايير الأداء:
| معلمات المنتج | محتوى |
| وقت التحليل | 3.5 ساعة |
| مبدأ التحليل | اختبار المناعة الأنزيمية في موقعين |
| تضخيم الإشارة | نظام البيوتين-ستربتافيدين |
| طول موجة الكشف | 450 نانومتر و 630 نانومتر |
| حساسية | 23.5 بيكو جرام/مل |
| مدى الكشف | 0.047~3 نانوغرام/مل |
| كائن الكشف | ألترانوكليز |
| الأداة المعمول بها | الأجهزة الجزيئية: سلسلة M وسلسلة i |
| طلب | الكشف عن بقايا UltraNuclease في عمليات تنقية العلاج الخلوي والجينى واللقاحات المعاد تركيبها المرتبطة بالفيروس الغدي |
بيانات المنتج:
منحنى معيار مجموعة الكاشف:
تجربة استرداد العينة الفعلية:
تم إضافة UltraNuclease إلى محاليل تحلل الخلايا (HEK293، E.coli، CHO، وVero) بتركيز 5 ميكروجرام/مل بشكل مستقل مع تركيز نهائي 1.5 نانوجرام/مل. أظهرت الدقة في عينات الخلايا المختلفة تفوقًا على دقة البائعين الآخرين.
إثبات الخصوصية
النتيجة: تتمتع مجموعة الاختبار بخصوصية عالية بدون تفاعل متبادل؛ المقارنات الزوجية، "*" فرق كبير عن العينة السلبية؛ "NS" لا يوجد فرق كبير عن العينة السلبية.
دقة:إمكانية التكرار:
| التركيز نانوغرام/مل | 6 تاريخ مكرر في نفس اللوحة | قيمة السيرة الذاتية | |||||
| 3 | 2.412 | 2.390 | 2.323 | 2.367 | 2.476 | 2.291 | 2.53% |
| 1.5 | 1.780 | 1.883 | 1.884 | 1.908 | 1.876 | 1.883 | 2.19% |
| 0.75 | 1.123 | 1.215 | 1.166 | 1.183 | 1.140 | 1.109 | 3.12% |
| 0.375 | 0.691 | 0.706 | 0.708 | 0.722 | 0.722 | 0.679 | 2.21% |
| 0.1875 | 0.449 | 0.462 | 0.453 | 0.460 | 0.447 | 0.433 | 2.13% |
| 0.094 | 0.306 | 0.308 | 0.304 | 0.311 | 0.295 | 0.302 | 1.65% |
| 0.047 | 0.242 | 0.241 | 0.240 | 0.241 | 0.256 | 0.240 | 2.37% |
| 0 | 0.183 | 0.192 | 0.189 | 0.187 | 0.189 | 0.189 | 1.43% |
النتيجة: تم اختبار 6 مكررات عند كل تركيز على المنحنى القياسي، وكانت جميع نسب التباين المئوية أقل من 5%.
الدقة المتوسطة:
| دقة متوسطة | |||
| تركيز العينة | 1.5 نانوجرام/مل | 0.375 نانوغرام/مل | 0.094 نانوغرام/مل |
| محلل 1 | 1.388 | 0.382 | 0.079 |
| محلل 2 | 1.458 | 0.363 | 0.068 |
| محلل 3 | 1.318 | 0.37 | 0.063 |
| متوسط | 1.388 | 0.372 | 0.07 |
| SD | 0.070 | 0.010 | 0.008 |
| قيمة السيرة الذاتية | 5.04% | 2.59% | 11.69% |
أجرى 3 محللين تجربة UCF.ME™ UltraNuclease ELISA وكانت نسبة المعامل CV% أقل من 15%
معلومات المنتج:
| اسم المنتج | منتج رقم | مواصفات المنتج |
| 20157ES25/50/60/80/90 | 25 وحدة/50 وحدة/100 وحدة/1 وحدة/5 وحدات | |
| 36701ES59 | 96 طن |
منتجات أخرى ذات صلة
| اسم المنتج | منتج رقم | مواصفات المنتج |
| 20159ES25/50/60/80/90 | 25 وحدة/50 وحدة/100 وحدة/1 وحدة/5 وحدات | |
| 36703ES96 | 96 طن |