وصف
هييف كاناسالعلامة التجارية بوليميراز الحمض النووي عالي الدقة Uracil+، هو جيل جديد من الحمض النووي عالي الدقة بوليميراز يعتمد على بوليميراز الحمض النووي Pfu. هييف كاناسالعلامة التجارية يتيح بوليميراز الحمض النووي عالي الدقة Uracil+ تفاعلات PCR سريعة ودقيقة للقوالب المعقدة. تم تحسين دقته بشكل كبير، كما أنه يتجنب تمامًا فشل التضخيم الناتج عن استخدام البادئات/القوالب/dNTPs المحتوية على dUTP. تم تجهيز المنتج بمخزن إنزيم محسن وإضافة مكونات معززة لتفاعل PCR، مما يجعل الإنزيم عالي الكفاءة وقابل للتكيف مع مجموعة واسعة من القوالب، ومناسب لتضخيم القوالب المعقدة.
مكونات المنتج
| رقم المكون | عناصر | القطة رقم/الحجم | |
| 10145ES60 | 10145ES76 | ||
| 10145-أ | هييف كاناس™ بوليميراز الحمض النووي عالي الدقة يوراسيل+ (1 وحدة/ميكرولتر) | 100 ميكرولتر | 500 ميكرولتر |
| 10145-ب | 2×كاناس™ عازل تفاعل البوليميراز المتسلسل لليوراسيل + (يحتوي على Mg2+، dNTPs) | 1 مل × 3 | 1 مل × 15 |
الشحن والتخزين
يتم شحن المكونات مع أكياس الثلج ويمكن تخزينها عند درجة حرارة -20 درجة مئوية لمدة عام واحد.
تطبيق المنتج
تضخيم المكتبة عالية الدقة باستخدام البادئات/القوالب/dNTPs المحتوية على dUTP.
تحذيرات
1. من أجل سلامتك وصحتك، يرجى ارتداء المعاطف المخبرية والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة أثناء العمل.
2. للاستخدام البحثي فقط!
تعليمات
هييف كاناسالعلامة التجارية يتم استخدام بوليميراز الحمض النووي عالي الدقة Uracil+ بطريقة مختلفة قليلاً عن الإنزيمات عالية الدقة التقليدية. يرجى قراءة التعليمات بعناية قبل الاستخدام.
1. نظام التفاعل الموصى به
يجب أن تتم جميع العمليات على الجليد. 2×Canaceالعلامة التجارية يجب خلط محلول Uracil+ PCR جيدًا بعد إذابته. قبل تكوين النظام، يرجى تسخين جهاز PCR مسبقًا. بعد إضافة المكونات، قم بخلط العينة جيدًا باستخدام ماصة وقم بتدويرها لأسفل الأنبوب، ثم ضعها في جهاز PCR المسخن مسبقًا للتضخيم. بعد الاستخدام، قم بإعادة جميع المكونات إلى -20 درجة مئوية للتخزين.
الجدول 1. تفاعل تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل
| عناصر | مقدار |
| قالب أو منتج ربط | X ميكرولتر |
| 2×CanaceTM Uracil+ PCR buffer (يحتوي على Mg2+، dNTPs) | 25 ميكرولتر |
| البادئ الأمامي (10-25 ميكرومتر) | 1-2.5 ميكرولتر |
| برايمر عكسي (10-25 ميكرومتر) | 1-2.5 ميكرولتر |
| هيف كاناس™ يوراسيل+ بوليميراز الحمض النووي عالي الدقة (1 وحدة/ميكرولتر) | 1 ميكرولتر |
| دي إتش تو أو | المجموع إلى 50 ميكرولتر |
[ملحوظات]:
1) الكواشف: قم بتذويب كل مكون بشكل كافٍ قبل الاستخدام؛
2) القوالب: إن استخدام قوالب الحمض النووي النقية عالية الجودة يمكن أن يحسن بشكل كبير من كفاءة ومعدل نجاح التضخيم؛
3) dNTPs: التركيز النهائي الموصى به لـ dNTPs هو 200 ميكرومولر. لا تحتوي dNTPs المتوفرة في المجموعة على dUTP. إذا كانت الظروف الخاصة تتطلب تحضير قوالب تحتوي على dUTP، فيمكن إضافة dUTP إضافي إلى تركيز نهائي يبلغ 400 ميكرومولر.
4) تركيز البوليميراز: يوصى بتركيز 1 وحدة/50 ميكرولتر. ويمكن تحسينه بين 0.5-2 وحدة/50 ميكرولتر، ولا يتجاوز 2 وحدة/50 ميكرولتر. ولمنع البوليميراز من تدهور البادئات بسبب نشاط النويدات الخارجية 3 '→5'، يُقترح إضافة البوليميراز إلى نظام التفاعل في الخطوة الأخيرة.
5) التركيز النهائي لـ Mg2+: التركيز النهائي للنظام هو 2 مليمول. يرجى أن تطلب من شركتنا توفير محلول عازل بتركيز منخفض لـ Mg2+ أو بدون Mg2+ إذا كانت لديك احتياجات خاصة.
2. إجراءات التفاعل الموصى بها
الجدول 2. إجراء تفاعل تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل
| خطوة | درجة حرارة | مدة | عدد الدورات |
| التحلل الأولي | 98 درجة مئوية | 1 دقيقة | 1 |
| التحلل | 98 درجة مئوية | 10 ثانية | 1~15 |
| التلدين | 60 درجة مئوية | 30 ثانية | |
| امتداد | 72 درجة مئوية | 30 ثانية | |
| التمديد النهائي | 72 درجة مئوية | 5 دقائق | 1 |
| يمسك | 4 درجة مئوية | - | - |
[ملحوظات]:
1) درجة حرارة ووقت التحلل الأولي: يوصى بدرجة حرارة 98 درجة مئوية. الوقت الموصى به هو 30 ثانية للقوالب البسيطة مثل DNA البلازميدي، ودقيقة واحدة للمكتبات، و3 دقائق للقوالب المعقدة مثل cDNA والحمض النووي الجينومي، و5-10 دقائق للقوالب ذات محتوى GC العالي.
2) درجة حرارة ووقت التلدين: يوصى بدرجة حرارة 60 درجة مئوية، أو يمكن ضبط تدرج درجة الحرارة للعثور على درجة الحرارة المثالية لتليين البرايمر وفقًا للاحتياجات. يبلغ وقت التلدين الموصى به 20 ثانية ويمكن تعديله في غضون 10-30 ثانية. قد يؤدي وقت التلدين الطويل جدًا إلى تشتت المنتجات المكبرة على الجل.
3) درجة حرارة التمديد ووقته: يوصى بـ 72 درجة مئوية. يتم تعديل وقت التمديد وفقًا للاحتياجات الفعلية.
الدفع والأمن
تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.
سؤال
قد تعجبك أيضًا
التعليمات
المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.
قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.
تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.