وصف
وصف المنتج
2×هايف كاناس™ Plus PCR Master Mix (مع الصبغة) عبارة عن محلول جاهز للاستخدام مخلوط مسبقًا يحتوي على Hieff Canace™ بالإضافة إلى بوليميراز الحمض النووي عالي الدقة، وdNTPs، ونظام عازل محسن. يتضمن المزيج جسمين مضادين وحيدي النسيلة يثبطان نشاط البوليميراز ونشاط إكسونوكلياز 3'→5' في درجة حرارة الغرفة، مما يتيح تفاعل البوليميراز المتسلسل الساخن عالي التحديد. تسمح إضافة عوامل الاستطالة بتضخيم الأجزاء الطويلة، مع أجزاء مستهدفة تصل إلى 13 كيلو بايت. يُظهر هذا الإنزيم نشاط بوليميراز الحمض النووي 5'→3' ونشاط إكسونوكلياز 3'→5'، بدقة 83 مرة من بوليميراز الحمض النووي Taq و9 مرات من بوليميراز الحمض النووي Pfu العادي. إنه مناسب لتضخيم القوالب المعقدة، وإنتاج منتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل ذات النهاية الحادة.
2×هايف كاناس™ يوفر Plus PCR Master Mix (With Dye) مزايا مثل البساطة والحساسية العالية والخصوصية القوية والاستقرار الممتاز. يتطلب نظام التفاعل فقط إضافة البادئات والقالب، ويمكن استخدام بروتوكول PCR المكون من خطوتين لتبسيط الإجراء وتوفير الوقت. يتضمن المنتج صبغة تتبع الرحلان الكهربائي، مما يسمح بالتحميل المباشر لمنتجات PCR لتحليل الهلام. بالإضافة إلى ذلك، يحتوي على عامل حماية خاص يضمن نشاطًا مستقرًا حتى بعد دورات التجميد والذوبان المتكررة.
تحديد
القط.ناوه. | 10154ES01 / 10154ES03 / 10154ES08 / 10154ES60 |
مقاس | 100 ميكرولتر / 1 مل / 5×1 مل / 100×1 مل |
تخزين
يجب تخزين هذا المنتج في درجة حرارة -25~-15 درجة مئوية لمدة 1 سنين.
تعليمات
1. أنظمة تفاعل البوليميراز المتسلسل الموصى بها.
عناصر | مقدار(ميكرولتر) | أخير تركيز |
2× هييف كاناس™ زائد مزيج رئيسي من تفاعل البوليميراز المتسلسل (مع الصبغة)* | 25 | 1× |
نموذج*** | س | - |
إلى الأمام صحافة(10 ميكرومول/ل)** | 2 | 0.4 ميكرومول/ل |
رالعكس صحافة(10 ميكرومول/ل)** | 2 | 0.4 ميكرومول/ل |
دي دي اتش2ا | حتى 50 | - |
*يحتوي التركيز النهائي 1 × للمزيج على 1 وحدة/50 ميكرولتر من البوليميراز، و2 مليمول/لتر من المغنيسيوم2+، و 200 ميكرومول/لتر من dNTPs.
**التركيز النهائي الموصى به للبادئات في تفاعل PCR هو 0.2-1 ميكرومول/لتر، مع تفضيل 0.4 ميكرومول/لتر.
***كميات القالب الموصى بها لنظام تفاعل سعة 25 ميكرولترًا:
نوع القالب | حجم القطعة (1 كيلو بايت - 10 كيلو بايت) |
الحمض النووي الجينومي | 50 نانوجرام-200 نانوجرام |
البلازميد أو الحمض النووي الفيروسي | 10 بيكو جرام - 20 نانوجرام |
الحمض النووي التكميلي | 1-2.5 ميكرولتر (لا يتجاوز 1/10 من إجمالي حجم تفاعل البوليميراز المتسلسل) |
2. برنامج رد الفعل.
1)بروتوكول من خطوتين (المفضل):
دورة خطوة | تموظف | وقت | الدورات |
التحلل الأولي | 98 درجة مئوية | 3 دقيقة | 1 |
التحلل | 98درجة مئوية | 10 ثانية | 30-35 |
امتداد | 68درجة مئوية | 30 ثانية/كيلو بايت | |
فإينال هـامتداد | 72درجة مئوية | 5 دقيقة | 1 |
2)بروتوكول الثلاث خطوات (التقليدي):
دورة خطوة | تموظف | وقت | الدورات |
التحلل الأولي* | 98 درجة مئوية | 3 دقيقة | 1 |
التحلل | 98درجة مئوية | 10 ثانية | 30-35 |
التلدين** | 60درجة مئوية | 20 ثانية | |
امتداد*** | 72درجة مئوية | 30 ثانية/كيلو بايت | |
فإينال هـامتداد | 72درجة مئوية | 5 دقيقة | 1 |
*التحلل الأولي: يوصى به عند 98 درجة مئوية لمدة 3 دقائق (5-10 دقائق لقوالب GC عالية).
**التلدين: يوصى به عند 60 درجة مئوية لمدة 20 ثانية (قابل للتعديل بين 10 إلى 30 ثانية). قد يؤدي التلدين المطول إلى تلطيخ المواد الهلامية.
***التمديد: يوصى به عند 72 درجة مئوية لمدة 30 ثانية/كيلو بايت (حتى 60 ثانية/كيلو بايت للقوالب المعقدة).
3)بروتوكول التلدين المتدرج (الموصى به للأهداف الصعبة):
دورة خطوة | تموظف | وقت | الدورات |
التحلل الأولي | 98 درجة مئوية | 3 دقيقة | 1 |
التحلل | 98درجة مئوية | 10 ثانية | 15 (انخفاض بمقدار 1 درجة مئوية لكل دورة) |
التلدين المتدرج | 70-55 درجة مئوية | 20 ثانية | |
امتداد | 72درجة مئوية | 30 ثانية/كيلو بايت | |
التحلل | 98 درجة مئوية | 10 ثانية | 20 |
التلدين | 55 درجة مئوية | 20 ثانية | |
امتداد | 72 درجة مئوية | 30 ثانية/كيلو بايت | |
فإينال هـامتداد | 72درجة مئوية | 5 دقيقة | 1 |
4)خصائص بروتوكولات تفاعل البوليميراز المتسلسل المختلفة:
نوع البروتوكول | سرعة | الخصوصية | عائد تفاعل البوليميراز المتسلسل | معدل الكشف |
خطوتين | الأسرع | عالي | واسطة | عالي |
ثلاث خطوات | واسطة | واسطة | أعلى | واسطة |
التلدين المتدرج | بطيئ | عالي | واسطة | عالي |
ملحوظات
1.هذا المنتج مخصص للاستخدام البحثي فقط.
2. يرجى العمل مرتديًا معاطف المختبر والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة،من أجل سلامتك.
الدفع والأمن
تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.
سؤال
قد تعجبك أيضًا
التعليمات
المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.
قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.
تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.