وصف
يمكن لهذه المجموعة إجراء تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل بشكل مباشر وسريع لأنسجة الفأر (مثل ذيل الفأر، وأذن الفأر، وإصبع قدم الفأر، والعضلات، وما إلى ذلك)، وتتمتع بتوافق قوي مع العينات. مزودة بمحلول تحلل قوي، يمكن لهذه المجموعة تحلل العينات بسرعة وإطلاق الحمض النووي الجينومي. يمكن إضافة المحلول مباشرة إلى نظام تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل دون تنقية، والعملية مريحة. بالإضافة إلى ذلك، تتطلب هذه المجموعة إدخال عينة منخفض، ويمكن استخدام أنسجة الفأر 5 ملغ أو ذيل الفأر 1-5 مم للتجارب.
إن مزيج تفاعل البوليميراز المتسلسل المباشر 2× Mouse Direct PCR الذي توفره هذه المجموعة عبارة عن محلول تفاعل البوليميراز المتسلسل الساخن بتركيز مضاعف. ويحتوي على جميع المكونات المستخدمة في تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل باستثناء القالب والبادئات، مما يبسط عملية التشغيل بشكل كبير ويقلل من فرصة التلوث. ويمكن استخدام المجموعة لتحديد الجينات المتحولة، وتحديد النمط الجيني للفئران، وما إلى ذلك.
سمات
- أقل عينة مطلوبة: 5 ملغ من أنسجة الفأر أو 1-5 ملم من ذيل الفأر
- إعداد قالب مريح: لا حاجة للطحن، ولا حاجة لتكرير وتنقية الحمض النووي، وتدفق أعلى، وتوفير الوقت والمال
- نظام تفاعل البوليميراز المتسلسل المحسن: مع خصوصية أعلى وتحمل أقوى لمثبط تفاعل البوليميراز المتسلسل
التطبيقات
- تحديد الفئران المعدلة وراثيا
- تحديد النمط الجيني للفئران
- تحليل إخراج الجينات من الفأر
تحديد
| مواصفات المنتج | عدة |
| بداية ساخنة | بدء التشغيل الساخن المدمج |
| شروط النقل | كمادات الثلج |
| نوع المنتج | طقم اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل المباشر |
| يتقدم ل (طلب) | ذيل الفأر، أذن الفأر، إصبع قدم الفأر، الأحشاء، الجلد، إلخ. |
عناصر
| المكونات رقم | اسم | 10185ES50 | 10185ES70 |
| 10185-أ | المخزن المؤقت مل | 5×1 مل | 20×1 مل |
| 10185-ب | المخزن المؤقت إم تي | 0.6 مل | 2×1.25 مل |
| 10185-ج | 2 × مزيج تفاعل البوليميراز المتسلسل المباشر للفأر | 500 ميكرولتر | 2×1 مل |
- أ) Buffer ML هو عبارة عن عازل تحلل يحتوي على عوامل تغيير بروتينية قوية، يرجى ارتداء القفازات.
- ب) Buffer MT هو مخزن توقف يستخدم لإيقاف وظيفة التحلل في Buffer ML.
- ج) 2 × مزيج تفاعل البوليميراز المتسلسل المباشر للفأر: يحتوي على بوليميراز الحمض النووي Taq الساخن، ومزيج dNTP، وMgCl2، ومنظم التفاعل، ومعزز تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل، ومحسن، ومثبت، وصبغة مؤشر الرحلان الكهربائي، وما إلى ذلك.
تخزين
- المكون أ: يجب أن يكون المنتج يجب تخزينه في درجة حرارة تتراوح بين 2°C و8°C لمدة عام واحد. للاستخدام المتكرر لفترة طويلة، يرجى تجنب التلوث المتبادل.
- المكون ب/ج: المنتج ينبغي تخزينها في-25 درجة مئوية ~ -15 درجة مئوية لمدة عام واحد. يرجى تجنب التجميد والذوبان المتكرر.
الأرقام
1. نتيجة تضخيم الجين المستهدف (في حدود 1 كيلو بايت)
الشكل 1.مناسب لتضخيم الجينات المستهدفة في حدود 1 كيلو بايت.
2. عرض توضيحي لسرعة التمديد
الشكل 2. جين بطول 500 قاعدة قاعدية، يمكن أن تصل سرعة الامتداد إلى 1 ثانية/كيلو بايت.
مقتبس من "TFPI هو مستقبل خبيث القولون لـ TcdB من فرع 2 شديد الضراوة C. difficile. Cell. 2022 Mar 17;185(6):980-994.e15. doi: 10.1016/j.cell.2022.02.010."
[1] Luo J، Yang Q، Zhang X، وآخرون. TFPI هو مستقبل القولون لـ TcdB من الفرع 2 C شديد الضراوة. صعب. Cell. 2022؛185(6):980-994.e15. doi:10.1016/j.cell.2022.02.010(IF:41.584)
[2] Zhao J، Chen J، Li YY، Xia LL، Wu YG. ينظم كيناز تيروزين بروتون الالتهاب الناجم عن الخلايا البلعمية في الكلى المصابة بمرض السكري عن طريق تنشيط إنفلماسوم NLRP3. Int J Mol Med. 2021؛48(3):177. doi:10.3892/ijmm.2021.5010(IF:4.101)
| مشكلة شائعة | سبب محتمل | حل |
| ولم تكن هناك أي نطاقات في الضوابط الإيجابية والعينات التي سيتم اختبارها. | لم يكن نظام تفاعل PCR أو ظروف التفاعل مناسبة. | استخدم تفاعل البوليميراز المتسلسل المتدرج لاستكشاف ظروف التفاعل المثالية لتفاعل البوليميراز المتسلسل. |
| يؤدي التخزين غير السليم لمواد تفاعل البوليميراز المتسلسل إلى فقدان نشاطها. | يجب تخزين 2× Mouse Direct PCR Mix عند درجة حرارة -20 درجة مئوية وتجنب التجميد والذوبان المتكرر أثناء الاستخدام. في حالة الاستخدام المتكرر، يمكن تخزينه عند درجة حرارة 4 درجات مئوية لفترة قصيرة. | |
| قضايا التصميم التمهيدي. | حاول إعادة تصميم البادئات للتحقق. | |
| تحتوي المجموعة الضابطة الإيجابية على نطاق اهتمام، بينما العينة التي سيتم اختبارها ليس لها نطاق أو نطاق ضعيف. | قد يؤدي التخزين غير السليم أو التخزين لفترات طويلة إلى فقدان نشاط الكاشف. | استخدم الكواشف الطازجة. |
| أضف كمية زائدة من محلول الأنسجة. | زيادة نظام التفاعل، أو تقليل كمية المحلول. | |
| لقد تم تخزين خليط تحلل العينة بشكل غير صحيح أو تم تخزينه لفترة طويلة جدًا، مما أدى إلى تدهور جينوم الحمض النووي. | يمكن تخزين خليط المحلل عند 4 درجات مئوية لمدة 2-3 أيام.حاول استخدام خليط المحلل الطازج المحضر لتفاعل البوليميراز المتسلسل. | |
| كمية القالب المضافة غير مناسبة. | تم تحسين كمية القالب المضاف ضمن نطاق 1-10% من نظام التفاعل. | |
| عدد غير كافي من دورات PCR. | زيادة عدد دورات تفاعل البوليميراز المتسلسل، ويفضل أن تكون 35-40 دورة. ونظرًا لتعقيد القالب، فيجب إجراء تفاعلات تفاعل البوليميراز المتسلسل بعدد دورات أكثر من 5-10 دورات باستخدام قالب الحمض النووي النقي. | |
| تضخيم غير محدد | درجة حرارة التلدين في تفاعل البوليميراز المتسلسل منخفضة للغاية، أو رقم الدورة، أو تركيز البادئ، أو تركيز القالب مرتفع للغاية. | زيادة درجة حرارة التلدين لتفاعل البوليميراز المتسلسل وتقليل رقم دورة تفاعل البوليميراز المتسلسل أو تركيز البادئ أو تركيز القالب. |
| عدم تطابق برايمر PCR. | إعادة تصميم تمهيدات PCR. | |
| درجة الحرارة مرتفعة جدًا عند تحضير نظام تفاعل البوليميراز المتسلسل أو الوقت طويل جدًا بعد اكتمال التحضير. | يتم تحضير نظام تفاعل PCR عند درجة حرارة منخفضة، ويتم إجراء تفاعل تضخيم PCR في أقرب وقت ممكن بعد اكتمال التحضير. | |
| يظهر النطاق المستهدف في حالة تحكم سلبية | تلوث أدوات التشغيل أو الكواشف. | يجب تعقيم جميع الكواشف أو المعدات المستخدمة في التجربة في جهاز التعقيم بالبخار. كن حذرًا ولطيفًا عند التعامل معها لمنع امتصاص تسلسل الهدف في مسدس العينة أو انسكابها من أنبوب الطرد المركزي. |
| التلوث المتبادل بين العينات. | يتم استخدام كل أداة أخذ عينة واحدة فقط؛ أو بعد أخذ عينة واحدة، يتم غمر حافة أداة أخذ العينة في محلول هيبوكلوريت الصوديوم 2%، ثم يتم شطفها بشكل متكرر، ثم يتم تجفيف البقايا بمنشفة ورقية نظيفة. |
الدفع والأمن
تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.
سؤال
قد تعجبك أيضًا
التعليمات
المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.
قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.
تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.