وصف
مجموعة تفاعل البوليميراز المتسلسل المباشر للأنسجة النباتية هي مجموعة يمكنها تضخيم أنواع مختلفة من أوراق النباتات بشكل مباشر عن طريق تفاعل البوليميراز المتسلسل، مع قدرة كبيرة على التكيف واستقرار قوي. تستخدم المجموعة نظامًا فريدًا من نوعه لتحلل العينات النباتية، والذي يمكنه تحلل مجموعة متنوعة من عينات النباتات بسرعة وإطلاق الحمض النووي الجينومي. يمكن استخدام الحمض النووي الجينومي المنطلق مباشرة كقالب دون إزالة البروتين أو الحمض النووي الريبي أو المستقلبات الثانوية في تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل. بالإضافة إلى ذلك، تتطلب المجموعة كمية صغيرة من العينة، يمكن استخدام أوراق النبات التي يبلغ حجمها 1 مم فقط للتجارب.
يتميز خليط 2×Plant Master Mix الموجود في هذه المجموعة بتوافق تضخيم قوي ويمكنه استخدام محلول العينة مباشرةً كقالب للتضخيم الفعال والمحدد. هذا الكاشف عبارة عن خليط تفاعل PCR مركّز مرتين، والذي يحتوي على جميع المكونات المستخدمة لتضخيم PCR باستثناء القالب والبادئات، مما يبسط عملية التشغيل بشكل كبير ويقلل من فرصة التلوث.
يمكن استخدام هذه المجموعة لتحديد النباتات المعدلة وراثيًا، وتحديد النمط الجيني للنباتات، وما إلى ذلك.
شحن
يتم شحن المنتجات مع أكياس الثلج.
تخزين
1. يمكن تخزين الكاشف 10187-A [المحلول العازل P1] عند درجة حرارة 4 درجات مئوية لمدة عام واحد.
2. الكاشف 10187-B [المحلول العازل P2]، المستخدم لتحييد المحلول، وهو مفيد لتخزين العينة لفترة أطول، ويمكن تخزينه عند 4 درجات مئوية لمدة عام واحد.
3. يمكن تخزين الكاشف 10187-C [2 × Plant Master Mix] عند درجة حرارة -20 درجة مئوية لمدة عام واحد. تجنب التجميد والذوبان المتكرر.
تحذيرات
1. عند إجراء تجارب الأوراق، يوصى باستخدام أنسجة الأوراق المجمعة حديثًا. إذا كانت أنسجة مجمدة لفترة طويلة، فيجب تخزينها عند درجة حرارة -80 درجة مئوية. يجب تجنب التجميد والذوبان المتكرر قدر الإمكان لتجنب تدهور القالب والتأثير على كفاءة تفاعل البوليميراز المتسلسل. أنسجة الأوراق مناسبة للأوراق الصغيرة. إذا كانت ورقة ناضجة، تجنب استخدام أنسجة الوريد الرئيسي للورقة.
2. يوصى بتضخيم القطعة ضمن 1 كيلو بايت في الطول للحصول على أفضل كفاءة تضخيم.
3. عند أخذ العينات، استخدم مثقابًا أو سكينًا لأخذ عينة بحجم مناسب. عندما تكون العينات مختلفة، يجب تنظيف مثقاب الثقب أو السكين في كل مرة قبل معالجة العينة.
4. بالنسبة لأنسجة الأوراق، يوصى بأخذ أوراق بطول 1-10 مم، سيؤدي طول الأوراق الصغير جدًا إلى انخفاض إنتاج تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل، وسيؤدي الإفراط في ذلك إلى تثبيط تفاعل البوليميراز المتسلسل، استخدم طريقة التكسير الحراري والهرس بطرف ماصة والسحق بالمطحنة لمعالجة أوراق النبات. بعد العلاج، يجب رجها وطردها مركزيًا. تأكد من أخذ السائل العلوي للاختبار. سيمنع الترسيب بشكل خطير تفاعل البوليميراز المتسلسل.
5. من أجل سلامتك وصحتك، يرجى ارتداء المعاطف المخبرية والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة أثناء العمل.
6. هذا المنتج مخصص للاستخدام البحثي فقط!
| المشاكل الشائعة | الأسباب المحتملة | الحلول |
| ولم تكن هناك أي نطاقات في الضوابط الإيجابية والعينات التي سيتم اختبارها. | لم يكن نظام تفاعل PCR أو ظروف التفاعل مناسبة. | استخدم تفاعل البوليميراز المتسلسل المتدرج لاستكشاف ظروف التفاعل المثالية لتفاعل البوليميراز المتسلسل. |
| يؤدي التخزين غير السليم لمواد تفاعل البوليميراز المتسلسل إلى إبطال فعاليتها. | يجب تخزين مزيج 2×PCR عند درجة حرارة -20 درجة مئوية، وتجنب التجميد والذوبان المتكرر عند الاستخدام. في حالة الاستخدام المتكرر، يمكن تخزينه عند درجة حرارة 4 درجات مئوية لفترة قصيرة. | |
| قضايا التصميم التمهيدي. | حاول إعادة تصميم البادئات للتحقق. | |
| تحتوي المجموعة الضابطة الإيجابية على نطاق اهتمام، بينما العينة التي سيتم اختبارها ليس لها نطاق أو نطاق ضعيف. | إن نسبة محلول التحلل ومحلول المعادلة غير مناسبة، وسوف يؤثر خليط التحلل على قيمة الرقم الهيدروجيني لنظام تفاعل البوليميراز المتسلسل. | في الظروف العادية، يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني لخليط التحلل المحايد حوالي 7-8 (يجب تحييد منتج التحلل والمحلول العازل P2 وفقًا صارمًا لنسبة 5:1). |
| لقد تم تخزين خليط تحلل العينة بشكل غير صحيح أو لفترة طويلة جدًا، مما أدى إلى تدهور جينوم الحمض النووي. | يمكن تخزين مزيج المحلول عند 4 درجات مئوية لمدة 5 أيام، حاول استخدام مزيج محلول تم تحضيره حديثًا لإجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل. | |
| كمية القالب المضافة غير مناسبة. | تحسين كمية القالب المضاف ضمن نطاق <5% من نظام التفاعل. | |
| عدد غير كافي من دورات PCR. | قم بزيادة عدد دورات تفاعل البوليميراز المتسلسل بشكل مناسب، ويفضل أن يكون ذلك 35-40 دورة. ونظرًا لتعقيد القالب، فمن الأفضل عمومًا استخدام 5-10 دورات إضافية من تفاعل البوليميراز المتسلسل بدلاً من استخدام قالب الحمض النووي النقي. | |
| تضخيم غير محدد | درجة حرارة التلدين في تفاعل البوليميراز المتسلسل منخفضة للغاية، أو رقم الدورة، أو تركيز البادئ، أو تركيز القالب مرتفع للغاية. | زيادة درجة حرارة التلدين لتفاعل البوليميراز المتسلسل وتقليل رقم دورة تفاعل البوليميراز المتسلسل أو تركيز البادئ أو تركيز القالب. |
| عدم تطابق برايمر PCR. | إعادة تصميم تمهيدات PCR. | |
| درجة الحرارة مرتفعة جدًا عند تحضير نظام تفاعل PCR أو الوقت المحدد طويل جدًا بعد التحضير. | يتم تحضير نظام تفاعل PCR عند درجة حرارة منخفضة، ويتم إجراء تفاعل تضخيم PCR في أقرب وقت ممكن بعد اكتمال التحضير. | |
| يظهر النطاق المستهدف في حالة تحكم سلبية | تلوث أدوات التشغيل أو الكواشف. | ينبغي تعقيم جميع الكواشف أو المعدات المستخدمة في التجربة بالبخار.كن حذرًا ولطيفًا عند التعامل لمنع امتصاص تسلسل الهدف في مسدس العينة أو انسكابها خارج أنبوب الطرد المركزي. |
| التلوث المتبادل بين العينات. | يتم استخدام كل أداة أخذ عينات لعينة واحدة فقط؛ أو بعد أخذ عينة واحدة، اغمر شفرة أداة أخذ العينات في محلول هيبوكلوريت الصوديوم 2%، ثم اشطفها بشكل متكرر، ثم جفف البقايا بمنشفة ورقية نظيفة. |
الدفع والأمن
تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.
سؤال
قد تعجبك أيضًا
التعليمات
المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.
قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.
تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.