وصف
مجموعة Hieff® Blood Advanced Direct PCR هي مجموعة يمكنها تضخيم عينات الدم الكاملة بشكل مباشر دون تنقية الحمض النووي أو معالجة العينة مسبقًا، وهي متوافقة مع الدم الطازج والدم المبرد (المجمد) وبقع الدم المجففة التجارية التي تحتوي على مضادات التخثر التقليدية مثل EDTA والهيبارين والسيترات وما إلى ذلك. تحتوي المجموعة على تركيبة بوليميراز DNA معدلة وراثيًا بدقة عالية ومقاومة لمثبطات PCR، و2 × Hieff® Blood Advanced PCR Buffer مع عامل استطالة قوي وعامل تعزيز التضخيم ونظام عازل محسن لتضخيم 8 كيلو بايت من شظايا الجينوم بكفاءة في ظل ظروف التمديد السريع، وتعيين وقت تمديد 3-5 ثانية / كيلو بايت للشظايا أقل من 2 كيلو بايت، وبالتالي تقصير وقت تحديد عينة الدم واختبارها بشكل كبير.
تحديد
| الإخلاص (مقابل التاق) | 1 × |
| بداية ساخنة | نعم |
| بروز | 3'-أ |
| بوليميراز | بوليميراز الحمض النووي Taq (التصنيف: 10726) |
عناصر
| لا. | اسم | 10188ES20 | 10188ES60 |
| 10188-أ | 2× هييف® تحليل الدم المتقدم لتفاعل البوليميراز المتسلسل | 500 ميكرومترل | 2.5 مل |
| 10188-ب | هييف® مزيج بوليميراز الحمض النووي عالي الدقة المتقدم | 20 ميكرومترل | 100 ميكرولتر |
| 10188-ج | مزيج برايمر التحكم الإيجابي (10 ميكرومتر لكل منهما) | 100 ميكرولتر | 200 ميكرولتر |
| 10188-د | 10 × عازل تحميل الحمض النووي | 1 مل | 1 مل |
تعليمات
أنظمة تفاعل البوليميراز المتسلسل الموصى بها.
| عناصر | الحجم (ميكرولتر) |
| دي دي اتش2ا | إلى 50 ميكرولتر |
| 2× هييف® تحليل الدم المتقدم لتفاعل البوليميراز المتسلسل | 25 ميكرولتر |
| مادة تمهيدية (10 ميكرومتر) | 2 ميكرولتر |
| برايمر عكسي (10 ميكرومتر) | 2 ميكرولتر |
| هييف® مزيج بوليميراز الحمض النووي عالي الدقة المتقدم | 1 ميكرولتر |
| عينة الدم | إكس |
2. يوصى بتركيز نهائي قدره 0.4 ميكرومتر لكل بادئ، حيث أن التركيز العالي جدًا سيؤدي إلى تضخيم غير محدد.
3. يتراوح تركيز قالب الدم الكامل الأمثل من 0.5% إلى 20%، والاستخدام الموصى به هو 10% كشرط للتجربة الأولية، أي إضافة 5 ميكرولتر من الدم الكامل كقالب إلى نظام التفاعل 50 ميكرولتر، مع الحرص على تجنب شفط جلطات الدم. بالنسبة لبقع الدم المجففة المخزنة على بطاقات مرشح Whatman®، يمكن أخذ حوالي 1 مم2 من القطع المستديرة من الورق مع بقع الدم وتضخيمها مباشرة في تفاعل PCR دون معالجة مسبقة.
برنامج رد الفعل
| دورة خطوة | درجة حرارة. | وقت | الدورات |
| التحلل الأولي | 95 درجة مئوية | 5 دقائق | 1 |
| التحلل | 95 درجة مئوية | 15 ثانية | 30-35 |
| التلدين | 60 درجة مئوية | 15 ثانية | |
| امتداد | 72 درجة مئوية | 3-10 ثانية/كيلو بايت | |
| أخير امتداد | 72 درجة مئوية | 5 دقائق | 1 |
درجة حرارة التلدين هي قيمة Tm عامة أو 1-2 درجة مئوية أقل من قيمة Tm للبادئ. إذا كان منتج التضخيم أقل تحديدًا، فيمكن إنشاء تدرج في درجة حرارة التلدين للعثور على ظروف التلدين المثالية.
يمكن لوقت التمديد الذي يبلغ 10 ثوانٍ/كيلو بايت تضخيم معظم الشظايا المستهدفة التي يقل حجمها عن 8 كيلو بايت، ويمكن لوقت التمديد الذي يتراوح بين 3 و5 ثوانٍ/كيلو بايت تضخيم معظم الشظايا التي يقل حجمها عن 2 كيلو بايت. وإذا كانت كفاءة التضخيم منخفضة، فيمكن تمديد الوقت بشكل مناسب إلى 20-30 ثانية/كيلو بايت، ولا ينبغي أن يتجاوز 60 ثانية/كيلو بايت.
الشحن والتخزين
يجب تخزين المنتجات عند درجة حرارة -15 درجة مئوية ~ -25 درجة مئوية ل سنة واحدة
الأرقام
ملحوظات
1. يوصى باستخدام قالب الدم بنسبة 10% من إجمالي حجم التفاعل، أي إضافة 5 ميكرولتر من الدم الكامل إلى نظام التفاعل 50 ميكرولتر كقالب، مع الحرص على تجنب شفط جلطات الدم.
2. يمكن لوقت التمديد الذي يبلغ 10 ثوانٍ/كيلو بايت تضخيم معظم الأجزاء المستهدفة التي يقل حجمها عن 8 كيلو بايت، ويمكن لوقت التمديد الذي يتراوح بين 3 و5 ثوانٍ/كيلو بايت تضخيم معظم الأجزاء التي يقل حجمها عن 2 كيلو بايت. وإذا كانت كفاءة التضخيم منخفضة، فيمكن تمديد الوقت إلى 30 ثانية/كيلو بايت.
3. بعد تفاعل PCR، يوصى بطرد ناتج التفاعل بسرعة 4000 دورة في الدقيقة (1000 × ز) لمدة 1-3 دقائق لترسيب شظايا خلايا الدم، وأخذ السائل العلوي للتحليل اللاحق.
4. لا يمكن استخدام هذا المنتج بشكل مباشر للتشخيص الطبي.
5. من أجل سلامتك وصحتك، يرجى ارتداء معطف المختبر والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة.
الدفع والأمن
تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.
سؤال
قد تعجبك أيضًا
التعليمات
المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.
قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.
تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.