وصف
LZCap GG (3'Acm) هو نظير cap1. يتم استخدام المنتج للنسخ بالتسلسل الأولي 5'GG3'، ويتم إنتاج بنية cap1 الطبيعية عن طريق تغطية النسخ Cap1.
تمت الموافقة على براءة اختراع أمريكية.
عناصر
القطة رقم | اسم | مقاس |
10686 | LZCap GG (3'Acm) (50mM) | 100 ميكرولتر |
1 مل |
تفاصيل المنتج
الصيغة الجزيئية | ج35ح48ن16ا25ص4 (حمض حر) |
الوزن الجزيئي | 1216.19 (حمض حر) |
تركيز | 50±3 مليمول |
نقاء | HPLC ≥95% |
إل زد كاب قالب الحمض النووي ديسيجن
إل زد كاب جي جي (3'أسم) يكون مناسب ل مبادرة GG تسلسلات. كما مُظهَر في شكل أدناه، إس بي 6 المروج (مسطر تحته) متبوعًا من خلال تسلسل GG يمكن افبفعالية البدء النسخ.
بروتوكول
1. مكونات إذابة الجليد مطلوب للتجربةانطون على جليد.
2. يضيف الماء الخالي من RNase و NTPs إلى أنبوب رد الفعل.
3. حرارة إل زد كاب حصة GG(3'Acm) لـ 15 دقيقة في 60 درجة مئوية. تبريد عند درجة حرارة الغرفة ل 5 دقيقة.
4. أضف على الفور إل زد كاب GG(3'Acm) إلى الأنبوب والدوامة إلى مزيج. تدور باختصار يجمع سائل.
5. يضيف 10x النسخ المخزن المؤقت والدوامة.
6. يضيف قالب الحمض النووي أاختصار الثاني إس بي 6 إنزيم مزج.
7. امزج مُعد محلول التفاعل، الدوران باختصار، و حضن في 37 درجة مئوية ل 2-3 ساعات. إذا كانت النسخة طول يكون أقل من 100نت، زيادة وقت رد الفعل 4-8 ح.
عنصر | مقدار (ميكرولتر) | التركيز النهائي |
RNase مياه مجانية | حتى 20 ميكرولتر | / |
ثلاثي فوسفات الأدينوزين (100 مليمول) | 1 | 5 ملم |
UTP(100مليمول) | 1 | 5 ملم |
سي تي بي (100 مليمول) | 1 | 5 ملم |
GTP(100مليمول) | 0.2 | 1 مليمتر |
إل زد كاب جي جي (3'أسم) (50مليمتر) | 1.6 | 4ملم |
10×النسخ المخزن المؤقت | 2 | 1 × |
خطي الحمض النووي | 1ميكروجرام | 50 نانوغرام/ميكرولتر |
إس بي 6 إنزيم مزج | 2 | / |
المجلد النهائي | 20 ميكرولتر |
ملحوظات:
1) ال إس بي 6 إنزيم نخلط نحن مُستَحسَن ل مستخدم يكون ميجاسكرينقطة® طقم (AM1330).
2) إل زد كاب GG(3'Acm) مناسب لناقل نسخ محفز SP6 مع 5 تسلسلات بدأت بـ 'GG 3'، أيّ يحتاج إلى يجب أخذها في الاعتبار عند إنشاء المتجه.
3) ال الكواشف، المواد الاستهلاكية و حاويات مستخدم في ال تجربة نكون حر اوهف RNase تلوث.
4) هو - هي يكون يوصى به استخدم خطي درجة حرارة الحمض النوويمتأخر عن النسخ.
5) متى معدل النيوكليوتيدات كانت مستخدم في مكان من النوع البري النيوكليوتيدات، ال أخير مركزةنشوء ل ال وكان رد الفعل لم يتغير.
6) معدل N1-Me-pUTP يستطيع يكون مستخدم في مكان من النوع البري UTP. تعديلمُعَدَّل N1-Me-pUTP يقلل من المناعة ل mRNA. هينوفكوم يستطيع أيضًا يمد معدل النوكليوتيدات N1-Me-pUTP (قطة. لا.: (HN1002).
7) إذا كان تفاعل البوليميراز المتسلسل محترفقناة يكون مستخدم مثل النسخ البدء الحمض النووي نموذج، ال كمية ل الحمض النووي نموذج يستطيع يكون مخفض بواسطة نصف.
تخزين
يمكن تخزين هذا المنتج في درجة حرارة تتراوح بين -25 و-15 درجة مئوية لمدة عامين.
احتياطات
- من أجل سلامتك وصحتك، يرجى ارتداء معدات الحماية الشخصية (PPE)، مثل المعاطف المخبرية والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة، عند العمل مع هذا المنتج.
- للاستخدام البحثي فقط.
الأسئلة الشائعة
1. كيف تقوم بتصميم LZCap؟
تتمتع الإنزيمات بتعرف "محدد" نسبيًا على الركائز. لذلك، عند تصميم بنية غطاء جديدة، نحتاج من ناحية إلى تعديلات بنيوية جديدة لأغراض براءات الاختراع، ولكن من ناحية أخرى، نسعى جاهدين للحفاظ على التشابه مع الهياكل الطبيعية/المعروفة قدر الإمكان. تحتوي البنية الطبيعية على ريبوز 3'OH، والذي يمكن تعديله (على سبيل المثال، الميثلة). بناءً على هذا الاعتبار، اخترنا إضافة كربون في الموضع 3' لحداثة براءة الاختراع، يليه NH لمحاكاة الرابطة الهيدروجينية لـ OH، ثم مجموعة أسيتيل لتقليل قاعدية NH وتعزيز قدرتها على الرابطة الهيدروجينية. نشاط إل زد كاب أفضل من الميثيلاتغطاء طبيعي، ربما بسبب زيادة الرابطة الهيدروجينية. وبالمقارنة بمجموعات الميثيل والميثوكسي، قد تعمل مجموعة الأمين الأسيتيل أيضًا على زيادة تفاعلات فان دير فالس بين الركيزة (الغطاء) وعامل البدء (الإنزيم).
2.هل مجموعة الأسيتيل الأمينية مستقرة؟
إن مجموعة الأمين الأسيتيل مستقرة بدرجة كافية بالفعل. وهي أكثر استقرارًا بكثير من الموضع الميثيلي 7 والرابطة الفوسفوديسترية، وهما أقل أجزاء الغطاء استقرارًا.
يرجى الاتصال بنا للحصول على مزيد من التفاصيل حول ترخيص LZCap.
الدفع والأمن
تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.
سؤال
قد تعجبك أيضًا
التعليمات
المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.
قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.
تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.