وصف
يمثل Hifair™ AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR تكرارًا محسنًا لـ Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA Digester Plus). تم تصميمه لتلبية متطلبات إجراء تفاعلات النسخ العكسي وإزالة الجينوم داخل أنبوب واحد. علاوة على ذلك، فهو يبسط عملية التفاعل، ويقلل بشكل كبير من وقت التفاعل، ويزيد من إنتاجية منتج النسخ العكسي. يشتمل 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix على جميع الكواشف الأساسية لتفاعل النسخ العكسي. أثناء التفاعل، تحتاج ببساطة إلى استكماله بمزيج gDNA Remover Mix وRNA القالب والماء لتخليق الخيط الأولي من cDNA بكفاءة مع القضاء في نفس الوقت على تلوث الحمض النووي الجينومي. هذا المنتج مناسب تمامًا للنسخ العكسي لقوالب RNA المعقدة ويثبت فعاليته العالية للنسخ العكسي الذي يتضمن كميات ضئيلة من القوالب والجينات ذات النسخ المنخفضة.
إن منتج النسخ العكسي الناتج عن هذا المنتج المحدد متوافق تمامًا مع كل من طرق qPCR القائمة على المسبار والقائمة على الصبغة. بالنسبة لـ qPCR القائم على المسبار، نوصي باستخدام مزيج Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR الرئيسي (Cat#11211)، بينما بالنسبة لـ qPCR القائم على الصبغة، فإن مزيج Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Cat#11184) هو الخيار الموصى به لتحليل التعبير الجيني عالي الأداء.
ومع ذلك، من المهم ملاحظة أن منتج النسخ العكسي الذي ينتجه هذا المنتج غير مناسب للتطبيقات اللاحقة مثل تضخيم الأجزاء الطويلة. إذا كنت بحاجة إلى نسخ عكسي فعال لهذه الأغراض، فنحن نوصي باستخدام مجموعة Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11149, Cat#11150).
سمات
- 5 دقائق من إعادة التغريد
-
هضم الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين (RT) وgDNA في أنبوب واحد
التطبيقات
- RT-qPCR
- تخليق الحمض النووي الريبوزي المضاد للاتجاه
تحديد
| نوع المنتج النهائي | cDNA (السلسلة الأولى) |
| طريقة تفاعل البوليميراز المتسلسل | تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي العكسي |
| نوع الكاشف | النسخ العكسي |
| نوع العينة | الحمض النووي الريبوزي |
| درجة حرارة التفاعل المثالية | 37 درجة مئوية |
| النسخ العكسي | م-ملف |
عناصر
| لا. | اسم | 11151ES10 (10 طن) | 11151ES60 (100 طن) |
| 11151-أ | 4×هايفير® AdvanceFast One-Step RT SuperMix | 50 ميكرولتر | 500 ميكرولتر |
| 11151-ب | مزيج إزالة الحمض النووي | 10 ميكرولتر | 100 ميكرولتر |
| 11151-ج | ماء خالٍ من RNase | 1 مل | 2×1 مل |
الشحن والتخزين
يتم شحن المنتج مع الثلج الجاف ويمكن تخزينه في درجة حرارة تتراوح بين -15 درجة مئوية إلى -25 درجة مئوية لمدة 12 شهرًا.
تعليمات الاستخدام
ذوبان قم بخلط مكونات 11151-A/B/C على الثلج، ثم حرك كل مكون من مكونات الكاشف برفق واخلطه جيدًا. ثم قم بتجميع المكونات التالية عناصر داخل أنبوب خالٍ من RNase:
| عنصر | الحجم (ميكرولتر) |
| خالية من RNase ماء | إلى 20 ميكرولتر |
| 4×هايفير® AdvanceFast One-Step RT SuperMix | 5 ميكرولتر |
| مزيج إزالة الحمض النووي | 1 ميكرولتر |
| مجموع الحمض النووي الريبوزي | 10 بيكو جرام -5 ميكرو جرام* |
| أو mRNA | 10 بيكو جرام-500 نانوجرام* |
الجدول 1: تحضير التفاعل
*نقترح عدم تجاوز 2 ميكروجرام ككمية إجمالية لمدخلات الحمض النووي الريبي. وفي حالة انخفاض وفرة التعبير عن الجين المستهدف، يمكن زيادة إجمالي مدخلات الحمض النووي الريبي حتى 5 ميكروجرام كحد أقصى.
| درجة حرارة | وقت |
| 37 درجة مئوية | 5 دقائق* |
| 85 درجة مئوية | 30 ثانية |
الجدول 2: بروتوكولات التفاعل
*تتضمن هذه العملية كل من النسخ العكسي وهضم gDNA.
منتج النسخ العكسي مناسب للاستخدام الفوري في تفاعلات qPCR أو يمكن تخزينه عند درجة حرارة -20 درجة مئوية لمدة قصيرة. للتخزين الممتد، نوصي بتقسيمه وتخزينه عند درجة حرارة -80 درجة مئوية لمنع دورات التجميد والذوبان المتعددة.
احتياطات:
1. يجب إجراء كافة الإجراءات على الجليد، مع أقصى درجات العناية لمنع تلوث RNase.
2. تأكد من سلامتك ورفاهتك من خلال ارتداء معطف المختبر والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة.
3. هذا المنتج مخصص فقط لأغراض البحث العلمي ولا يجوز استخدامه لأي غرض آخر.
الدفع والأمن
تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.
سؤال
قد تعجبك أيضًا
التعليمات
المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.
قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.
تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.