وصف
هيفير™ مجموعة Advanced One Step RT-qPCR هي مجموعة لقياس كمية الفلورسنت بناءً على صبغة SYBR Green I. باستخدام بادئات خاصة بالجين، يتم إكمال النسخ العكسي وتفاعلات qPCR في أنبوب واحد، مما يلغي الحاجة إلى عمليات فتح الغطاء والتنقيط المتكررة، مما يحسن كفاءة التحليل بشكل كبير ويقلل من خطر التلوث. بالنسبة لعينات الحمض النووي الريبي، تستخدم المجموعة أنابيب Hifair المقاومة للحرارة™ V النسخ العكسي لتخليق الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين بكفاءة وUNICON™ إنزيم بوليميراز الحمض النووي HotStart Taq للتضخيم الكمي. في ظل نظام التخزين المؤقت المحسن، يمكن أن تصل حساسية الطقم إلى 0.1 بيكو جرام للأهداف عالية التعبير وتصل إلى 1 بيكو جرام للأهداف متوسطة التعبير، كما أن الطقم مناسب أيضًا لتضخيم عينات الحمض النووي وتحديد كميتها. الطقم مناسب لتضخيم عينات الحمض النووي وتحديد كميتها. إنه يتيح الكشف الدقيق وتحديد كميتها للأحماض النووية من عينات نباتية وحيوانية مختلفة وخلايا وكائنات دقيقة.
تحديد
| رقم القط. | 11175ES20 / 11175ES70 |
| مقاس | 20 ت/200 ت |
عناصر
| المكونات رقم | اسم | 11175ES20 | 11175ES70 |
| 11175-أ | 2× هيفير™ مخزن SG المتقدم | 250 ميكرولتر | 2×1.25 مل |
| 11175-ب | هيفير™ مزيج إنزيم UH المتقدم | 20 ميكرولتر | 200 ميكرولتر |
| 11175-ج | بروتين ريبونوكلياز حر2ا | 250 ميكرولتر | 2×1.25 مل |
تخزين
يجب تخزين هذا المنتج في درجة حرارة -25~-15 درجة مئوية بعيد من ضوء ل 1 سنة.
تعليمات
- رد فعل نظام إعدادات*****
| عناصر | الحجم (ميكرولتر)**** | الحجم (ميكرولتر) | التركيز النهائي |
| 2× هيفير™ مخزن SG المتقدم* | 12.5 | 25 | 1× |
| هيفير™ مزيج إنزيم UH المتقدم | 1 | 2 | - |
| مادة تمهيدية (10 ميكرومول/لتر)** | 0.5 | 1 | 0.2 ميكرومول/لتر |
| برايمر عكسي (10 ميكرومول/لتر)** | 0.5 | 1 | 0.2 ميكرومول/لتر |
| RNA*** | إكس | إكس | - |
| بروتين ريبونوكلياز حر2ا | الى 25 | ل 50 | - |
* يتم تحضير نماذج Rox المنخفضة والنماذج بدون تصحيح Rox مباشرةً وفقًا لنظام التفاعل المذكور أعلاه. عند استخدام نموذج High Rox، أضف Hieff™ SP High Rox إلى 2 × Hifair™ Advanced SG Buffer عند 1:250 v/v، واخلط جيدًا وقم بالطرد المركزي.™ لا يؤثر Advanced SG Buffer مع Hieff™ SP High Rox على استخدام نماذج التصحيح Low Rox وNo Rox.
** وكان تركيز البادئ النهائي 0.2 ميكرومول/لتر، والذي يمكن تعديله أيضًا بين 0.1 و1 ميكرومول/لتر حسب الاقتضاء.
*** الكاشف حساس للغاية، مع إجمالي RNA في نطاق 1 بيكو جرام - 1 ميكروجرام، وأظهر اختبار العينات البشرية مدخلاً مثاليًا يبلغ 1 بيكو جرام - 100 نانوجرام، مع التحكم في قيمة Ct الإجمالية في نطاق 15-30 حسب الاقتضاء.
**** من المستحسن استخدام 20 ميكرولترًا أو 50 ميكرولترًا لضمان صحة وإمكانية تكرار تضخيم الجينات المستهدفة.
***** يرجى التحضير في منضدة فائقة النظافة واستخدام أطراف وأنابيب تفاعل خالية من بقايا النوكلياز؛ يوصى باستخدام أطراف مزودة بخراطيش فلتر. تجنب التلوث المتبادل والتلوث بالهباء الجوي.
2) برنامج رد الفعل
| دورة خطوة | درجة حرارة. | وقت | الدورات |
| النسخ العكسي | 50 درجة مئوية* | 6 دقيقة | 1 |
| التحلل الأولي | 95 درجة مئوية | 5 دقيقة | 1 |
| تفاعل التضخيم | 95 درجة مئوية | 15 ثانية | 40 |
| 60 درجة مئوية** | 30 ثانية | ||
| مرحلة منحنى الانصهار | الإعدادات الافتراضية للأداة | 1 | |
*يمكن اختيار درجة حرارة النسخ العكسي بين 50-55 درجة مئوية وفقًا للاحتياجات التجريبية. بالنسبة لعينات الحمض النووي، يمكن حذف عملية النسخ العكسي.
** في حالات خاصة، يمكن تعديل درجة حرارة التلدين/التمديد وفقًا لقيمة Tm للبرايمر، ويوصى بدرجة حرارة 60 درجة مئوية.
3) النموذج المطبق
نماذج الأجهزة التي لا تتطلب معايرة Rox:
بيو راد: CFX96، CFX384، iCycler iQ، iQ5، MyiQ، MiniOpticon، Opticon، Opticon 2، Chromo4؛
إيبندورف: Mastercycler ep realplex، realplex 2 s؛
كياجن: كوربيت روتور جين كيو، روتور جين 3000، روتور جين 6000؛
روش للعلوم التطبيقية: LightCycler 480، LightCycler2.0، لايتسايكلير 96؛
Thermo Scientific: PikoReal Cycler؛ Cepheid: SmartCycler؛ Illumina: Eco qPCR؛
الموديلات القابلة للتطبيق من Low Rox:
ABI 7500، 7500 Fast، ViiA7، QuantStudio 3 و5، QuantStudio 6، 7، 12k Flex؛
ستراتاجين MX3000P، MX3005P، MX4000P؛
الموديلات المطبقة High Rox*:
أبي 5700، 7000، 7300، 7700، 7900HT سريع، ستيبوان، ستيبون بلس.
* بالنسبة لنماذج High Rox، لاحظ أنه يجب إضافة Hieff™ SP High Rox بشكل متناسب إلى 2 × Hifair™ قم بتنظيف SG Buffer المتقدم قبل الاستخدام.
ملحوظات
- هذا المنتج مخصص للاستخدام البحثي فقط.
- يرجى العمل باستخدام معاطف المختبر والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة، من أجل سلامتك.
وثائق:
الدليل
الدفع والأمن
تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.
سؤال
قد تعجبك أيضًا
التعليمات
المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.
قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.
تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.