وصف
يُعد مزيج Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR Master Mix (بدون Rox) محلولًا أوليًا لتضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الفعلي مرتين، ويتميز بكثافة فلورية عالية وحساسية عالية وخصوصية عالية وعائد تضخيم مرتفع. يتم تشغيل المكون الأساسي، بوليميراز Hieff UNICON™ Taq DNA، بطريقة الأجسام المضادة، والتي يمكنها أن تمنع بشكل فعال التضخيم غير النوعي الناجم عن التلدين الأولي أثناء تحضير العينة. في الوقت نفسه، تضيف التركيبة عوامل لتعزيز كفاءة التضخيم لتفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل وعوامل تسهيل معادلة تضخيم الجينات ذات محتويات GC المختلفة (30~70%)، بحيث يمكن لتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي الحصول على علاقة خطية جيدة في مجموعة واسعة من المناطق الكمية. يستخدم المنتج تفاعل تغيير اللون المختلط للصبغات المختلفة لمراقبة عملية التقطير، مما يقلل بشكل فعال من حدوث أخطاء التقطير.
سمات
تتبع القياسات: تقليل مخاطر الأخطاء الفائتة/الأخطاء الإضافية
تضخيم ممتاز: خطية جيدة عبر نطاق خطي واسع
دقة عالية: يمكن التمييز بدقة بين القوالب ذات الفارق في التركيز بمقدار ضعفين
القدرة على التكرار الجيد: تباين صغير بين الآبار في الآبار المكررة، مما يؤدي إلى إمكانية تكرار أفضل
مستقر وموثوق به: يمكن تخزين نظام التفاعل في درجة حرارة الغرفة لمدة 24 ساعة، ويظل المنتج غير متأثر بعد 20 دورة تجميد وإذابة.
التطبيقات
تحليل اختلاف التعبير الجيني
التحليل الكمي المطلق
تحديد
| تركيز | 2 ×(مزيج qPCR) |
| طريقة الكشف | طريقة الصبغ |
| طريقة تفاعل البوليميراز المتسلسل | تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي |
| بوليميراز | بوليميراز الحمض النووي Taq |
| نوع العينة | الحمض النووي |
| معدات التطبيق | Bio-Rad CFX96، CFX384، iCycler iQ، iQ5، MyiQ؛ MiniOpticon، Opticon، Opticon 2، Chromo4؛ Cepheid SmartCycler؛ Eppendorf Mastercycler ep realplex، realplex 2 s؛ Illumina Eco qPCR؛ Qiagen/Corbett Rotor-Gene Q، Rotor-Gene 3000، Rotor-Gene 6000؛ Roche Applied Science LightCycler 480؛ Thermo Scientific PikoReal Cycler وأجهزة تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي الأخرى التي لا تتطلب إضافة صبغة مرجعية ROX |
| نوع المنتج | خليط مسبق لتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي الفلوري في الوقت الحقيقي |
| التقدم بطلب إلى (التطبيق) | التعبير الجيني |
عناصر
| المكونات رقم | اسم | 11188ES03 | 11188ES08 | 11188ES60 |
| 11188-أ | هييف يونيكون™ نظام ColorGPS qPCR مزيج رئيسي (لا روكس) | 1 مل | 5×1 مل | 100×1 مل |
| 11188-ب | 10 × محلول التخفيف | 1 مل | 1 مل | 20×1 مل |
الشحن والتخزين
يجب تخزين هذا المنتج في درجة حرارة -25~-15 درجة مئوية لمدة عام واحد.
الأرقام
الشكل 1. يمكن الحصول على نتائج موثوقة ضمن النطاق الديناميكي.
باستخدام 2 ميكرولتر من قوالب البلازميد بتدرج 10^1-10^7، تم تضخيم الجينات ذات الصلة. Hieff UNICON™ يمكن لمزيج ColorGPS الرئيسي اكتشاف نطاق كمية القالب بمقدار 7 أوامر من حيث الحجم بشكل فعال، مما يحقق خطية جيدة ضمن نطاق خطي واسع.
شكل2. يمكن التمييز بدقة بين اختلافات تركيز القالب بمقدار 2 ضعف.
باستخدام 2 ميكرولتر من البلازميد المخفف بتدرج مضاعف كقالب، تم تضخيم الجينات ذات الصلة. Hieff UNICON™ يمكن لمزيج ColorGPS الرئيسي حل اختلافات تركيز القالب بدقة.
شكل3تم ملاحظة اختلافات صغيرة بين الآبار، مما يدل على إمكانية التكرار بشكل أفضل.
باستخدام عشرات النسخ من البلازميد كقالب، تم إجراء التضخيم باستخدام كواشف كمية فلورية مختلفة وفقًا للإجراءات المحددة في أدلة التعليمات الخاصة بكل منها. تشير قيم الانحراف المعياري إلى أنه مقارنة بكواشف النسخ العكسي الأخرى، فإن المنتج الجديد لديه اختلافات أصغر بين الآبار المكررة وقابلية أفضل للتكرار.
شكل4. أكثر مرونة، ومناسبة للإجراءات القياسية أو السريعة.
في الإجراء القياسي، يتم ضبط وقت التحلل ووقت التمديد على 10 ثوانٍ و30 ثانية على التوالي، بينما في الإجراء السريع، يتم ضبط وقت التحلل ووقت التمديد على 3 ثوانٍ و10 ثوانٍ على التوالي، للكشف عن قيم Ct المقابلة لـ 10 جينات مستهدفة.وتظهر النتائج أن قيم Ct التي تم الحصول عليها بالمنتج الجديد في كل من الإجراءات القياسية والسريعة لها ارتباط قوي، ويمكن للمنتج الجديد تحقيق نتائج جيدة باستخدام الإجراء السريع.
شكل5بعد تحضير نظام التفاعل، يمكن أن يظل مستقراً في درجة حرارة الغرفة لمدة 24 ساعة.
باستخدام جينات مختلفة من خلايا الفأر والبشر 293 ونبات أرابيدوبسيس ثاليانا كأهداف، وبعد تحضير نظام التفاعل، تم وضعه في الظلام في درجات حرارة مختلفة لمدة 24 ساعة قبل الكشف. وبالمقارنة بالمعالجة الفورية، فإن فرق الكشف للجينات المختلفة لا يتجاوز 0.5 Ct، مما يشير إلى أنه يمكن الحصول على نتائج مستقرة أيضًا من خلال العمليات طويلة الأمد.
دالوثائق:
الدليل
الدفع والأمن
تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.
سؤال
قد تعجبك أيضًا
التعليمات
المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.
قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.
تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.