هيفير™ V Reverse Transcriptase هو إصدار محدث من Hieff™تم الحصول على إنزيم النسخ العكسي M-MLV (H-) من خلال تقنية الهندسة الوراثية. يتمتع بقدرة أعلى على تخليق الحمض النووي التكميلي، والاستقرار الحراري، وحدود درجة حرارة التفاعل (حتى 60 درجة مئوية) مقارنة بإنزيم Hieff™ النسخ العكسي لـ M-MLV (H-). يصل حجم منتج cDNA المُصنَّع إلى 10 كيلو بايت. Hifair™ يعمل V Reverse Transcriptase على تعزيز تقارب القوالب ويكون مناسبًا للنسخ العكسي لقوالب RNA ذات الهياكل الثانوية المعقدة أو الجينات ذات النسخ المنخفضة.

سمات

مقاومة حرارية ممتازة.

مناسب لتطبيقات RT-PCR/RT-qPCR.

خالي من الجلسرين، أكثر ملاءمة للتجفيف.

عرض الأداء

1. قادر على تحمل درجة حرارة تفاعل تصل إلى 58 درجة مئوية، وهو مناسب للنسخ العكسي لقوالب الحمض النووي الريبي المعقدة.

الشكل 1. النسخ العكسي لـ Hifair™ تم تحضين إنزيم النسخ العكسي V والعلامة التجارية T* عند 55 درجة مئوية و58 درجة مئوية على التوالي لمدة 30 دقيقة للكشف عن نشاط الإنزيم المتبقي. أظهرت النتائج أن Hifair™ لا يزال بإمكان V Reverse Transcriptase الحفاظ على نشاط بنسبة 70% بعد الحضانة عند 58 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة، وهو أعلى بكثير من نشاط العلامة التجارية T*.

2. كان معدل اكتشاف RT-qPCR أفضل من العلامات التجارية الأخرى, و تكان مدى الكشف 1 بيكو جرام - 1 ميكرو جرام.

الشكل 2. باستخدام 1 بيكو جرام - 1 ميكروجرام (7 تدرجات) من إجمالي الحمض النووي الريبي لخلايا 293T كقالب، تم إجراء النسخ العكسي باستخدام Hifair™ تم تحليل الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين الناتج عن عملية هضم الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين في خطوة واحدة باستخدام تقنية qPCR (رقم القطعة 11142)، V*، T*. وقد تم تحليل الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين الناتج عن عملية qPCR كميًا. وأظهرت النتائج أن حساسية 11142ES قد تصل إلى 1 بيكو جرام، وهو ما كان أفضل من حساسية العلامات التجارية الأخرى.