إن إنزيم فايرفلاي لوسيفيراز هو بروتين ذو وزن جزيئي يبلغ حوالي 61 كيلو دالتون، ويمكنه تحفيز أكسدة اللوسيفيرين إلى أوكسيلوسيفيرين في وجود ATP وأيونات المغنيسيوم والأكسجين. وهو يصدر ضوءًا حيويًا بطول موجي يبلغ حوالي 560 نانومتر. إن إنزيم رينيلا لوسيفيراز هو بروتين ذو وزن جزيئي يبلغ حوالي 36 كيلو دالتون، ويمكنه تحفيز أكسدة الكولينترازين إلى الكولينتراميد في وجود الأكسجين، ويصدر طول موجي يبلغ 480 نانومتر أثناء عملية الأكسدة. حول الضوء الحيوي. يمكن قياس الضوء الحيوي عن طريق الكيمياء الحيوية. يظهر مبدأ الكشف في الشكل 1:

الشكل 1: مخطط تحليل إنزيم فايرفلاي ورينيلا لوسيفيراز

عادةً، يتم استنساخ الجزء 5´UTR أو المروج للجين المستهدف قبل إنزيم Firefly Luciferase، أو يتم استنساخ الجزء 3´UTR قبل إنزيم Firefly Luciferase، ويتم الكشف عن تأثير التنظيم النسخي للمروج أو العنصر التنظيمي من خلال الكشف عن كمية إنزيم Firefly Luciferase. تم استخدام إنزيم Renilla Luciferase كعنصر تحكم داخلي للقضاء على الاختلافات في عدد الخلايا وكفاءة النقل، وما إلى ذلك. تستخدم مجموعة اختبار جين Dual Luciferase Reporter لوسيفيرين كركيزة للكشف عن نشاط جين المراسل الخاص بإنزيمات Firefly Luciferase، ثم تستخدم الكولينترازين كركيزة للكشف عن إنزيم Renilla Luciferin أثناء إخماد تفاعل الفلورسنت. نشاط جين المراسل الإنزيمي. تتميز المجموعة بحساسية عالية.

سمات

قدرة محسنة على التحلل: قادرة على تحلل الغالبية العظمى من أنواع الخلايا بشكل كامل.

إشارة أقوى: الكشف الدقيق عن التعبير الضعيف للمروج.

حساسية أعلى: يمكن اكتشافها حتى 10-20 بيكومول من جزيئات لوسيفيراز.

نطاق خطي أوسع: يتجاوز نطاق الكشف الخطي 8 أوامر من حيث حجم تركيز الإنزيم.

التطبيقات

التحقق من تفاعلات miRNA مع الجينات المستهدفة 3'UTRs

التحقق من تفاعلات lncRNA-miRNA

التحقق من تنظيم عامل النسخ في منطقة المحفز

تحليل مسار الإشارة

تحليل نشاط SNP

تحديد

عناصر

الشحن والتخزين

يجب تخزين منتجات مجموعة تحليل جينات Dual Luciferase Reporter في درجة حرارة -15 درجة مئوية ~ -25 درجة مئوية ل 1 سنة.

الأرقام

الشكل 1. ييسن (قطة#:11402) له شدة فلورسنت مماثلة لتلك الموجودة في Brand P.

شكل2. يخفف (قطة#:11402) تتفاعل كواشف الكشف مع لوسيفيراز لتحقيق شدة التوهج المثالية. بعد إضافة ركيزة لوسيفيراز رينيلا، يتم إخماد التوهج الحيوي للوسيفيراز اليراع: يمكن إخماده بالكامل تقريبًا.

وثائق:

ورقة بيانات السلامة

11402 ورقة بيانات سلامة المواد HB220209 EN.PDF

الدليل

11402 دليل HB241230 EN.بي دي اف

الاستشهادات والمراجع:

[1] Wang H، Yang J، Cai Y، Zhao Y. تعمل الخلايا البلعمية على قمع إعادة برمجة القلب للخلايا الليفية في الجسم الحي عبر دائرة تحفيز ذاتية بين الخلايا بوساطة IFN [ظهر التصحيح المنشور في Protein Cell. 2024 Dec 2؛ 15(12):938. doi: 10.1093/procel/pwae038]. (إذا = 21.1)

[2] Zhao L, Zhu Y, Tao H, et al. Ailanthone ameliorates pulmonary provosis by suppressing JUN-dependent MEOX1 activation. Acta Pharm Sin B. 2024;14(8):3543-3560. doi:10.1016/j.apsb.2024.04.013(إذا = 14.5)

[3] وو إكس، تشين إس، تشانغ زد، وآخرون. مسار mRNA صغير الحجم يتداخل مع الحمض النووي الريبي في النبات المضيف، يعمل على تعديل تحمل الجفاف الناجم عن الفيروس من خلال تعزيز الالتهام الذاتي. Plant Cell. 2024؛36(9):3219-3236. doi:10.1093/plcell/koae158(إذا = 12.6)

[4] Xuan H, Li Y, Liu Y, et al. يساهم مجال H1/H5 في فصل طور OsTRBF2 وقمع الجينات أثناء نمو الأرز. Plant Cell. 2024؛36(9):3787-3808. doi:10.1093/plcell/koae199(إذا = 12)

[5] هان يي، هو كيو، جونج إن، وآخرون. التباين الطبيعي في MORE GRAINS 1 ينظم عدد الحبوب ووزن الحبوب في الأرز. مجلة علم الأحياء النباتية المتكاملة. 2024؛ 66(7): 1440-1458. doi:10.1111/jipb.13674(إذا = 11.4)

[6] Pan M, Luo M, Liu L, et al. EGR1 يقمع نمو سرطان الخلايا الكبدية والتحلل الجلوكوزي الهوائي عن طريق تقليل تنظيم PFKL نسخيًا. J Exp Clin Cancer Res. 2024؛43(1):35. نُشر في 29 يناير 2024. doi:10.1186/s13046-024-02957-5(إذا = 11.3)

[7] Hao X, Wang S, Fu Y, et al. تلعب وحدة WRKY46-MYC2 دورًا حاسمًا في الاستجابات المضادة للنباتات التي يسببها E-2-hexenal من خلال تعزيز تراكم الفلافونويد. Plant Commun. 2024؛5(2):100734. doi:10.1016/j.xplc.2023.100734(إذا = 10.5)

[8] وو جيه، لي بي، لي إم، وآخرون. الإجهاد الحراري يضعف إنهاء نمو الأنسجة الزهرية وتطور الثمار من خلال التأثير على سلسلة BR-SlCRCa في الطماطم. Plant Commun. 2024؛5(4):100790. doi:10.1016/j.xplc.2023.100790(إذا = 10.5)

[9] Chen L, Xia S, Wang F, et al. يؤدي استئصال NR1D1 الناتج عن مثيلة m6A إلى تعطيل الساعة البيولوجية للخلايا الجذعية المكونة للدم ويعزز تليف الكبد. Pharmacol Res. 2023؛189:106704. doi:10.1016/j.phrs.2023.106704(إذا = 10.33)

[10] نيو إم إكس، فينج سي إتش، هي إف، وآخرون. تنظم وحدة miR6445-NAC029 تحمل الجفاف من خلال تنظيم التعبير عن إنزيم الجلوتاثيون إس ترانسفيراز يو 23 وإزالة أنواع الأكسجين التفاعلية في الحور. نيو فيتول. 2024؛ 242(5): 2043-2058. doi:10.1111/nph.19703(إذا = 9.4)

[11]هوانغ ت، يو كيو، هوانغ د، وآخرون.تعزز التغذية الراجعة الإيجابية بين PDIA3P1 وOCT4 خصائص الخلايا الجذعية السرطانية لسرطان الخلايا الحرشفية في المريء. Cell Commun Signal. 2024؛22(1):60. نُشر في 22 يناير 2024. doi:10.1186/s12964-024-01475-3(إذا = 8.4)

[12]Wang S، Liu Y، Hao X، Chen Y، Wang Z، Shen Y. تعزيز الدفاعات النباتية في شجيرة صحراوية: استكشاف مسار تنظيمي لـ AnWRKY29. Int J Biol Macromol. 2024؛ 270 (الجزء 1): 132-259. doi:10.1016/j.ijbiomac.2024.132-259(إذا = 8.2)