HIEFF ™ متعدد الاستخدامات T4 DNA ligase (600 U/µL)- التحول الحراري والختم العالي 12996ES

SKU: 12996ES60

مقاس: 60 كو
سعر:
سعر البيع$175.00

الشحن محسوب عند الخروج

مخزون:
في الأوراق المالية

وصف

هييف™ إن إنزيم T4 DNA Ligase متعدد الاستخدامات هو أحد أشكال إنزيم T4 DNA Ligase. هذا الإنزيم مناسب لتحفيز تفاعل الربط بين الجزيئات المتماسكة أو ذات النهايات غير الحادة. وهو عبارة عن منتج إنزيمي واحد مصمم لربط شظايا الحمض النووي والمحولات أثناء عملية تحضير المكتبة في تسلسل الجيل التالي (NGS).® تم التحقق من تعدد استخدامات T4 DNA Ligase على نطاق واسع من خلال التسلسل عالي الإنتاجية ويظهر جودة استثنائية.

ميزة

  • دقة عالية
  • متحمل للحرارة

تعرف على المزيد حول تطوير رباط الحمض النووي T4 متعدد الاستخدامات

تحديد

مصدر البكتيريا القولونية المعاد تركيبها
مخزن التخزين المؤقت 50 مم تريس-اتش سي 1,100 مليمولار KC1,0.1 ملي مولار EDTA، 1 ملي مولار DTT، 50% جلسرين، درجة الحموضة 7.50.2 عند 25 درجة مئوية
تعريف الوحدة في نظام تفاعل ربط 20 ميكرولتر، يتم تعريف كمية الإنزيم المطلوبة لتحفيز ربط أكثر من 50٪ من شظايا الحمض النووي، عندما يتم تفاعل 6 ميكروجرام من λDNA-Hind III عند 16 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة، على أنها وحدة نشاط واحدة (U).

عناصر

عناصر اسم

12996ES60

60كو

12996ES62

600كو

12996-أ هييف® ربطة الحمض النووي T4 متعددة الاستخدامات (600 وحدة/ميكرولتر) 100 ميكرولتر 1000 ميكرولتر
12996-ب 10×T4 DNA Ligase Buffer 500 ميكرولتر 3×1500 ميكرولتر

تخزين

يجب تخزين هذا المنتج في درجة حرارة -25~-15 درجة مئوية لمدة 2 سنين.

شكل

الشكل 1. يوضح تطور إنزيم ربط الحمض النووي Versatility T4. (أ) التصميم العقلاني (ب) فحص طفرات رباط الحمض النووي T4 المقاومة للحرارة عند 45 درجة مئوية، مما يؤدي إلى تحديد الطفرات ذات النشاط النوعي المعزز بشكل كبير. (ج) فحص طفرات رباط الحمض النووي T4 بهدف تقليل تكوين ثنائي المحول أثناء تحضير مكتبة الحمض النووي. (د) تقييم احتباس عائدات المكتبة بعد المعالجة الحرارية عند 42 درجة مئوية لمدة ساعة باستخدام طريقة تحضير مكتبة الحمض النووي.


الجدول 1. إن إنزيم Yeasen Versatile T4 DNA ligase مستقر حراريًا. تمت معالجة الإنزيم عند 30 درجة مئوية لمدة 5 أيام وتم تحليله باستخدام طريقة DNA Lib Prep.

الشكل 2. يتميز رباط الحمض النووي Yeasen Versatile T4 بدقة أعلى كما يتضح من خلال تكوين ثنائي المحول الأقل بسبب الربط الذاتي الخاطئ (أ) وتم تحليله بواسطة طريقة DNA Lib Prep (ب).

الشكل 3. إن إنزيم ربط الحمض النووي T4 متعدد الاستخدامات من شركة Yeasen يتميز بدقة أعلى، وهو ما يشير إليه تكوين ثنائي المحول الأقل مقارنةً بإنزيمات ربط الحمض النووي T4 من العلامات التجارية الأخرى التي تم تحليلها باستخدام طريقة DNA Lib Prep.

الشكل 4. يقلل Versatile T4 DNA Ligase من معدلات النتائج الإيجابية الكاذبة لعينات FFPE. باستخدام مجموعة DNA Lib Prep، التي تتضمن Versatile T4 DNA Ligase، قمنا بإعداد المكتبات لثلاثة أنواع من العينات القياسية (FFPE وgDNA وctDNA) وأجرينا مقارنة مباشرة مع منتج المورد W.تشير البيانات إلى أنه بالنسبة لكل من gDNA وctDNA، فإن معدلات Soft Clip والكيميرا الكاذبة لـ 12996 قابلة للمقارنة مع تلك الخاصة بالمنافس W. ومع ذلك، يظهر 12996 ميزة ملحوظة في عينات FFPE.


يرجى ترك رسالة للاستفسار عن بيانات مقارنة الأداء بين هذا الإنزيم وغيره من ربيطات الحمض النووي T4 التقليدية والمقاومة للحرارة.


ملحوظات

1. يرجى العمل باستخدام معاطف المختبر والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة،من أجل سلامتك.

2. إذا حدث ترسب بكمية صغيرة في المحلول العازل، فهذه ظاهرة طبيعية. يرجى قلب المحلول العازل وخلطه جيدًا قبل استخدامه.

3. هذا المنتج مخصص للاستخدام البحثي فقط.

بروتوكول

1. لا تتطلب مجموعات تحضير مكتبة الحمض النووي الحالية السائدة باستخدام الطريقة القائمة على الربط عادةً خطوات تنقية بعد إصلاح النهاية وربط الذيل A. تخضع شظايا الحمض النووي مباشرة لربط المحول دون تنقية. هذه المجموعة متوافقة مع الطريقة السائدة أنظمة إصلاح النهاية وذيل A المتاحة تجاريا لربط المحول بسلاسة.

قم بإعداد التفاعل التالي في أنبوب الطرد المركزي الصغير على الجليد، ثم قم بالخلط بلطف باستخدام الماصة أو الرج، ثم قم بالطرد المركزي لفترة وجيزة وقم بتسخينه حتى يصبح غير نشط عند 20 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.

الجدول 1. نظام التفاعل لربط المحول

عنصر

مقدار(ميكرولتر)

التركيز النهائي

الحمض النووي ذو الذيل dA

60

10×T4 DNA Ligase Buffer

10

0.1 ميكرومتر-0.5 ميكرومتر

50% بي اي جي 6000

12*

1 نانوغرام -400 نانوغرام

محول الحمض النووي

5**

هييف® ربطة الحمض النووي T4 متعددة الاستخدامات (600 وحدة/ميكرولتر)

3~5***

ماء خالي من النوكلياز

أعلى الى 100

-

ملحوظة*لا يتم توفير محلول PEG6000 بنسبة 50% في المجموعة، وسوف تحتاج إلى تحضيره بنفسك

**يرجى الرجوع إلى الجدول 2 من اجل كمية المحول.

***يمكن إضافة كمية من T4 DNA Ligase حسب الحاجة بمقدار 3-5 ميكرولتر.

2. يؤثر تركيز المحول بشكل مباشر على كفاءة الربط وإنتاجية المكتبة. قد يؤدي الاستخدام المفرط للمحولات إلى في مزيد من ثنائيات المحول، في حين أن الاستخدام المنخفض قد يؤثر على كفاءة الاتصال وإنتاج المكتبة. الجدول 2 يسرد كمية المحول الموصى بها لكميات مختلفة من الحمض النووي المدخل.

الجدول 2. كمية المحول الموصى بها لـ 100 بيكو جرام - 1 ميكروجرام من الحمض النووي المدخل

إدخال الحمض النووي

تركيز

0.1 نج

0.1 ميكرومتر

1 نانوغرام

0.5 ميكرومتر

10 نانوغرام

1 ميكرومتر

25 نانوغرام

2 ميكرومتر

100 نانوجرام~1000 نانوجرام

10 ميكرومتر

ملحوظة】:كمية المحول يمكن تعديلها وفقًا للمتطلبات المذكورة في الجدول أعلاه.

الدفع والأمن

American Express Apple Pay Diners Club Discover Google Pay Mastercard Visa

تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.

سؤال

قد تعجبك أيضًا

التعليمات

المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.

قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.

تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.